噬菌體的檢查及效價測定
實驗方法原理噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,然后它們再擴散和侵染周圍細胞,最終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變清,或在含有敏感細菌的平板上出現肉眼可見的空斑──噬菌斑。了解噬菌體的特性,快速檢查、分離,并進行效價測定,對在生產和科研工作中防止噬菌體的污染具有重要作用。檢樣可以是發酵液、空氣、污水、土壤等(至于無法采樣而需檢查的對象,可以用無菌水浸濕的棉花涂拭表面作為檢查樣品)。為了易于分離可先經增殖培養,使樣品中的噬菌體數量增加。采用生物測定法進行噬菌體檢查,約需12h左右,因而不能及時判斷是否有噬菌體污染。通過快速檢查可大致確定是否有噬菌體污染,以采取必要的防治措施。根 據正常發酵(培養)液離心后菌體沉淀,上清液蛋白含量很少,加熱后仍然清亮;而侵染有噬菌體的發酵(培養)液經離心后其上清液中因......閱讀全文
噬菌體的檢查及效價測定
1、目的:1.1 了解噬菌體效價的含義及其測定原理。1.2 學會檢查噬菌體的方法。1.3 掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。2、原理:噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌 裂解,釋
噬菌體的檢查及效價測定
實驗方法原理噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,然后它們再擴散和侵染周圍細胞,最終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變清,或在含有敏感細菌的平板上出現肉眼可見的空斑──噬
噬菌體的檢查及效價測定(二)
六、結果:1. 噬菌體檢查① 離心分離加熱法OD650光密度值正常發酵液(對照) 異常發酵液(試驗)離心上清液(A1)離心上清液加熱煮沸后(A2)A2/A1② 繪出平板上的噬菌斑檢測結果,指出噬菌斑和宿主細菌。2. 噬菌體效價測定① 平板上噬菌斑數目噬菌體稀釋度10-4、10-5、10-6?對照噬菌
噬菌體的檢查及效價測定(一)
一、目的:1. 了解噬菌體效價的含義及其測定原理。2. 學會檢查噬菌體的方法。3. 掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。二、原理:噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量
噬菌體效價的測定
實驗方法原理 噬菌體的效價就是 1 ml 培養液中所含活噬菌體的數量。效價測定的方法,一般應用雙層瓊脂平板法。由于在含有特異宿主細菌的瓊脂平板上,噬菌體產生肉眼可見的噬菌斑,因此,能進行噬菌體的計數,但因噬菌斑計數方法其實際效率難以接近 100%(—般偏低,因為有少數活噬菌體可能未引起感
噬菌體的分離、純化及效價測定
一、目的要求 1、學習分離、純化噬菌體的基本原理和方法。 2、學習噬菌體效價測定的基本方法。 二、基本原理 因為噬菌體是專性寄生物,所以自然界中凡有細菌分布的地方,均可發現奇特異的噬菌體的存在,亦即噬菌體是伴隨著宿主細菌的分布而分布的,例如糞便與陰溝污水中含有大量大腸桿菌,故也能很容
噬菌體效價的測定實驗
實驗方法原理噬菌體的效價就是 1 ml 培養液中所含活噬菌體的數量。效價測定的方法,一般應用雙層瓊脂平板法。由于在含有特異宿主細菌的瓊脂平板上,噬菌體產生肉眼可見的噬菌斑,因此,能進行噬菌體的計數,但因噬菌斑計數方法其實際效率難以接近 100%(—般偏低,因為有少數活噬菌體可能未引起感染),所以為了
微生物學技術:噬菌體的檢查及效價測定
一、目的:1. 了解噬菌體效價的含義及其測定原理。2. 學會檢查噬菌體的方法。3. 掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。二、原理:噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量
噬菌體效價的計算和技術優點
又稱噬菌斑形成單位(pfu)數,指每毫升試樣中含有侵染性噬菌體的粒子數。測定方法有雙層平板法,其優點有:1)彌補平板不平2)噬菌斑位于同個平面,較清晰3)上層為半固體培養基,有利噬菌體擴散
胰酶腸溶片的檢查及效價測定方法
檢查微生物限度取本品,照胰酶項下的方法檢查應符合規定。其他應符合片劑項下有關的各項規定(通則0101)。效價測定胰蛋白酶照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品原液取本品5片(0.3g規格)或3片(0.5g規格),除去腸溶衣,研細,加冷至5℃以下的氯化鈣溶液適量,研磨均勻,移至200ml量瓶
注射用絨促性素的檢查及效價測定
檢查干燥失重取本品約0.1g,置五氧化二磷干燥器中,室溫減壓干燥至恒重,減失重量不得過5.0%(通則0831)。異常毒性與細菌內毒素照絨促性素項下的方法檢查,均應符合規定。其他應符合注射劑項下有關的各項規定(通則0102)。效價測定取本品5支,按標示效價分別加適量含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氯化
免疫血清的制備及效價測定
實驗概要本實驗制備了抗綿羊紅細胞 (SRBC)的免疫血清并對其效價進行了測定。實驗原理1. ?制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B ?細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B ?細胞系產生該決定簇的
免疫血清的制備及效價測定
實驗概要本實驗制備了抗綿羊紅細胞 (SRBC)的免疫血清并對其效價進行了測定。實驗原理1. ?制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B ?細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B ?細胞系產生該決定簇的
免疫血清的制備及效價測定
制備免疫血清的傳統方法是將抗原注入動物體內,由動物體內 B 細胞增殖分化成漿細胞產生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應抗原受體的 B 細胞系產生該決定簇的抗體,因此用抗原免疫機體獲得的免疫血清一般均為多克隆抗體。?制備的免疫血清的質量(特異性、
IgG抗A效價測定的檢查過程
采集被檢對象靜脈血,取血清標本50微升加入等體積的牛血清白蛋白,37度水浴溫育30-60分鐘,倍比稀釋后依次將稀釋血清分別加入標記的為主凝膠抗人球蛋白卡中,在所有孔中加入等量A型0.5%紅細胞懸液后37度孵育5分鐘,用專用離心機離心5分鐘并觀察結果。
尿激酶的效價測定
1 酶活力(1)試劑 牛纖維蛋白原溶液取牛纖維蛋白原,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝結蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0單位的溶液。牛纖維蛋白溶酶原溶液 取牛纖維蛋白溶酶原,加三羥甲基氨基甲烷緩沖
尿激酶的效價測定
1 酶活力(1)試劑 牛纖維蛋白原溶液取牛纖維蛋白原,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝結蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0單位的溶液。牛纖維蛋白溶酶原溶液 取牛纖維蛋白溶酶原,加三羥甲基氨基甲烷緩沖
雙層平板法測噬菌體效價的優缺點
雙層平板法的優點:①加了底層培養基后,可使原來底面不平的玻璃皿的缺陷得到了彌補;②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上,因此不僅每一-噬菌斑的大小接近、邊緣清晰,而且不致發生上下噬菌斑的重疊現象;③因上層培養基中瓊脂較稀,故形成的噬菌斑較大,更有利于計數。
IgG抗A效價測定的注意事項及檢查過程
注意事項 不合宜人群:暫無。 檢查前:空腹,清晨取血為佳。 檢查時:放松身體,積極配合醫生。 檢查過程 采集被檢對象靜脈血,取血清標本50微升加入等體積的牛血清白蛋白,37度水浴溫育30-60分鐘,倍比稀釋后依次將稀釋血清分別加入標記的為主凝膠抗人球蛋白卡中,在所有孔中加入等量A型0.
ELISA測定抗體效價方法
我用的是間接ELISA,以下copy自我的畢業論文:將抗原用包被液稀釋至約10 ?g/mL;分別將陽性血清和陰性血清用TBS倍比稀釋,稀釋梯度從1:200,1:400至1:204800,二抗用的是HRP標記的羊抗兔IgG(1:5000稀釋) 。酶標儀測定450nm處各個孔的吸光度(A450),計算陽
肝素鈣的效價測定方法
照肝素鈉項下的方法測定抗Ⅱa因子效價應為標示值的90%~110%,抗Xa因子效價與抗Ⅱa因子的效價比應符合規定。
硫酸魚精蛋白的效價測定
效價測定照硫酸魚精蛋白生物測定法(通則1213)測定,應符合規定,測得的結果應為標示值的90%~110%。
凝血酶的效價測定
纖維蛋白原溶液的制備 取纖維蛋白原約30mg,精密稱定,用0.9% 氯化鈉溶液1.5ml溶解,加凝血酶0.1ml(約3單位),快速搖勻,室溫放置約1小時至完全凝固,取出凝固物,用水洗至洗出液加硝酸銀試液不產生渾濁,在105℃干燥3小時,稱取重量,計算纖維蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.
凝血酶的效價測定
效價測定纖維蛋白原溶液的制備取纖維蛋白原,加0.9%氯化鈉溶液適量溶解,用0.05 mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液調節pH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化鈉溶液稀釋成含0.1%凝固物的溶液,備用。標準品溶液的制備取凝血酶標準品,加0.9%氯化鈉溶液溶解并分別定量稀釋制
抑肽酶的效價測定方法
底物溶液取N-苯甲酰-L精氨酸乙酯鹽酸鹽171.3mg,加水溶解并稀釋至25ml。臨用新制。胰蛋白酶溶液取胰蛋白酶對照品適量,精密稱定,加鹽酸滴定液(0.01mol/L)溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.8單位(每1ml中約含1mg)的溶液,臨用新制并置冰浴中。胰蛋白酶稀釋液精密量取胰蛋白酶溶液1
尿激酶的效價測定介紹
1、酶活力 (1)試劑 牛纖維蛋白原溶液取牛纖維蛋白原,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝結蛋白的溶液。 牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0單位的溶液。 牛纖維蛋白溶酶原溶液 取牛纖維蛋白溶酶原,加三羥
臨床化學檢查方法介紹IgG抗A效價測定
IgG抗A-效價測定介紹: IgG抗A-效價測定是檢查孕婦血清中有無IgG性質的抗A抗體并滴定其效價,評估ABO-HDN發生的可能性。IgG抗A-效價測定正常值: IgG抗A效價
抗生素效價生物測定
實驗方法原理?管碟法是擴散法中的一種,是將已知濃度的標準抗生素溶液與未知濃度的樣品溶液分別加到一種標準的不銹鋼小管(即牛津小杯)中,在含有敏感試驗菌的瓊脂表面進行擴散滲透。比較兩者對被試菌的抑制作用,測量出抑菌圈的大小,以計算抗生素的濃度。在一定的濃度范圍內,抗生素的濃度與抑菌圈直徑在雙周半對數表上
胰激肽原酶的效價測定方法
酶活力照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液取本品適量,精密稱定,加純度項下的磷酸鹽緩沖液(pH7.0)適量使溶解并定量稀釋制成每1ml中約含10單位的溶液。標準品溶液取胰激肽原酶標準品,按標示單位,加上述磷酸鹽緩沖液(pH7.0)適量使溶解并定量稀釋制成每1m中含10單位的溶液。底物
垂體后葉粉的效價測定方法
升壓素照升壓素生物測定法(通則1205)測定,即得。縮宮素照縮宮素生物測定法(通則1210)測定,并將測得結果與升壓素效價進行比較,即得。