小鼠免疫實驗_用電泳分離的抗原進行免疫
實驗材料任意品系小鼠6~8 周試劑、試劑盒冷的 0.1 mol L KClPBS抗原完全和不完全弗氏佐劑儀器、耗材組織研磨機22-G 注射針頭帶塞的 3 ml 注射器雙頭帶塞的連接器無菌剪刀剃須刀片解剖刀片木制涂棒實驗步驟1. 將含 10~50 μg 目的蛋白抗原的蛋白質混合物上樣于適當的 SDS 變性分離膠并電泳。2. 將膠浸泡在冷的 0.1 mol/L 的 KCl 中 5~15 min。蛋白質條帶會在透明凝膠的背景下出現白色沉淀。用解剖刀或剃須刀切下合適的條帶。3. 在組織研磨機中用最小量的 PBS 研磨凝膠條帶。確定連續加入 100 μl 直至研碎的凝膠條帶成為液體所需的最小體積。4. 用包含 10~25μl 抗原的凝膠懸液 200~400 μl 腹腔注射免疫小鼠。5. 3 周后用包含 10~25μl 抗原的凝膠懸液 200~400μl 腹腔注射強化免疫小鼠。6. 采血,測定抗體滴度,進行細胞融合試驗(見基本方案步驟 4~......閱讀全文
小鼠免疫實驗_-用電泳分離的抗原進行免疫
實驗材料任意品系小鼠6~8 周試劑、試劑盒冷的 0.1 mol L KClPBS抗原完全和不完全弗氏佐劑儀器、耗材組織研磨機22-G 注射針頭帶塞的 3 ml 注射器雙頭帶塞的連接器無菌剪刀剃須刀片解剖刀片木制涂棒實驗步驟1. 將含 10~50 μg 目的蛋白抗原的蛋白質混合物上樣于適當的 SDS
小鼠免疫實驗_-制備免疫脾細胞:用可溶性抗原致敏
實驗材料任意品系小鼠(6~8 周)試劑、試劑盒PBS完全和不完全弗氏佐劑抗原儀器、耗材22-G 注射針頭帶塞的 3 ml 注射器雙頭帶塞的連接器無菌剪刀剃須刀片解剖刀片木制涂棒實驗步驟1. 準備等體積 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐劑的乳化液(200~400 μl/鼠)。用雙頭帶塞
小鼠免疫實驗
實驗方法原理 實驗材料 任意品系小鼠(6~8 周)試劑、試劑盒 PBS完全和不完全弗氏佐劑抗原儀器、耗材 22-G 注射針頭帶塞的 3 ml 注射器雙頭帶塞的連接器無菌剪刀剃須刀片解剖刀片木制涂棒實驗步驟 1. 準備等體積 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐劑的乳化液(200~40
實驗小鼠肺部炎癥的局部免疫療法
實驗概要局部肺部疾病,如哮喘,慢性阻塞性肺病或肺癌的免疫療法的創新要求肺部目標細胞有一個完善的交付途徑。一個重要途徑是通過直接滴入到呼吸道而不是通過消化道。本試驗詳細的介紹了抗體獲得,重組細胞因子,抑制小分子和其他分子療法,以有效誘導和保護呼吸道的免疫反應。動物在可吸入麻醉下提供治療,將溶液滴入小鼠
實驗小鼠肺部炎癥的局部免疫療法
實驗概要局部肺部疾病,如哮喘,慢性阻塞性肺病或肺癌的免疫療法的創新要求肺部目標細胞有一個完善的交付途徑。一個重要途徑是通過直接滴入到呼吸道而不是通過消化道。本試驗詳細的介紹了抗體獲得,重組細胞因子,抑制小分子和其他分子療法,以有效誘導和保護呼吸道的免疫反應。動物在可吸入麻醉下提供治療,將溶液滴入小鼠
抗原與免疫血清的制備實驗
將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。
抗原與免疫血清的制備實驗
將抗原注射于動物體,可刺激動物的 B 淋巴細胞轉化為漿細胞而產生特異性抗體,待動物血清中累積大量抗體時,采集其血液,分離析出血清,此即含抗體的免疫血清,或稱抗血清。制備特異性強、效價高的免疫血清對于微生物的鑒定,傳染病的診斷與治療,抗原分析,免疫球蛋白的鑒定及其他蛋白質的鑒定與研究均有很大的用途。實
抗原和免疫血清的制備實驗
實驗材料 家兔試劑、試劑盒 普通培養基甲醛鹽水石灰酸鹽水生理鹽水儀器、耗材 標準比濁管離心機實驗步驟 1. 抗原的制備:標準菌株的選擇:所用的菌種傷寒桿菌H901和傷寒桿菌O901應具有典型形態菌落及生化反應。在生理鹽水中不發生自身凝集,與特異血清有高度凝集者可作為菌種。2. 菌液的制備(1)原液制
小鼠免疫程序
一、抗原的準備 1、收到抗原時,首先要了解抗原的種類、性質和濃度,以便采取不同的處理方法。 2、多肽抗原,一般分多肽―偶聯KLH和多肽―偶聯BSA(或GGG)或裸多肽三種。多肽―偶聯KLH一般用于免疫,而多肽―偶聯BSA或裸肽一般用于檢測,在免疫時注意區分使用。 3、分裝 (1)收到抗原后,應及時
小鼠肝炎病毒抗原(MHV-Ag)酶聯免疫分析(ELISA)
小鼠肝炎病毒抗原(MHV?Ag)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于檢測小鼠血清,血漿中肝炎病毒抗原(MHV?Ag)水平。實驗原理:??本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫法(ELISA)測定標本中小鼠肝炎病毒抗原(MHV?Ag)。用純化的小鼠肝炎病
小鼠弓形蟲循環抗原(TCA)酶聯免疫分析
小鼠弓形蟲循環抗原(TCA)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中弓形蟲循環抗原(TCA)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠弓形蟲循環抗原(TCA)水平。用純化的小鼠弓形蟲循環抗原(TCA)
免疫學實驗阿米巴原蟲抗原介紹
阿米巴原蟲抗原介紹: 指檢測人體腸道中的溶組織內阿米巴致病后血液中的原蟲抗原。 阿米巴原蟲抗原正常值: 酶聯免疫吸附試驗、間接免疫熒光法、直接免疫熒光法:陰性。 阿米巴原蟲抗原臨床意義: 阿米巴病最可靠的診斷依據是:糞便直接涂片顯微鏡檢查有溶組織內阿米巴原蟲(滋養體
通過細胞計數對疾病模型小鼠進行免疫監測
通過細胞計數對疾病模型小鼠進行免疫監測??摘要生物樣本往往是非單一細胞的混合物,如原代分離的細胞樣本和許多培養的細胞樣本都是由不同種類或不同功能的細胞組成。而對于樣本中不同細胞亞群的區分和定量恰恰是很多研究中的關鍵一環。這些混合在一起的不同細胞通常是使用流式細胞儀和熒光標記的細胞類型特異性抗體來進行
免疫沉淀實驗——免疫沉淀放射性標記抗原
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SDS儀器、耗材離心機實驗步驟1. ?按基本方案進行,但以下說明的操作步驟已經修改:(2b)按所需選用步驟4b所提供的其中之一備擇物(①,②,③)預澄清放射性抗原溶液。(4b)加入1 μl 抗原特異性抗血清,或3 μg 抗原特異性單抗,或抗質特異性雜交瘤培養上 清(克隆化細
方案1-用-FLAG抗原表位標記蛋白質進行蛋白質免疫共沉淀
實驗材料抗 FLAGM2 單克隆抗體293 T 細胞試劑、試劑盒抗 FLAGM2 瓊脂糖親和凝膠甘氨酸辣根過氧化物酶IEF緩沖液裂解緩沖液NaCl磷酸鹽緩沖液聚乙烯亞胺RF10培養基RPMI 1640 培養基4 X SDS-PAGE 加樣緩沖液疊氮化鈉胰島素儀器、耗材大型離心機配有檢測 GFP 濾片
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
材料二甲苯 酒精(100%,95%) EDTA抗原修復工作液(pH8.0,稀釋50倍使用) 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4(稀釋10倍使用) DAB顯色液(臨用前配制:試劑盒A、B、C各50ul,于1ml水中混勻)。方法1.? 石蠟切片置60℃烘箱中烘烤過夜 2.?
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
免疫學實驗抗原皮內試驗介紹
抗原皮內試驗介紹: 本試驗主要用于對塵、螨、花粉等抗原過敏者的血清學治療指導有幫助。 皮內試驗是最常用的皮膚試驗。應用范圍也很廣,幾乎各類抗原及各型反應都可用皮內試驗進行測定,只是不同類型的反應觀察結果的時間和判定結果的標準有所不同。 抗原皮內試驗正常值: 陰性。
免疫學實驗白細胞抗原(HLA)介紹
白細胞抗原(HLA)介紹: 人類白細胞抗原(HLA)是一群存在于細胞表面的糖蛋白分子,曾認為引起器官移植排斥反應的主要抗原。 檢測HLA有助于對某些疾病的診斷、分型、推測預后,可采用血清法測定A、B、C位點抗原,以混合淋巴細胞培養法測定D、 DR抗原。 白細胞抗原(HLA)正常
抗原和抗體濃度的優化免疫斑點實驗
對于一個給定的抗原,最佳的抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力,以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。最優抗原和抗體濃度可通過免疫印跡實驗中使用不同濃度的抗原和抗體作用確定。另外,更快和更簡單的方法是進行斑點印跡實驗。以下是使用超敏感信號底物進行的斑點印跡的操作方法:1、 用TBS和P
半抗原性免疫原怎么樣進行制備?
半抗原指只具有抗原性而無免疫原性的物質。 多見于分子量小于4000的有機物質。半抗原與載體相結合具有免疫原性。(一)載體1.多肽聚合物:常用多聚賴氨酸。2.蛋白質:以牛血白蛋白最常見。3.大分子聚合物和某些顆粒。(二)半抗原與載體的連接方法1.物理方法:通過電荷和微孔吸附半抗原。2.化學方法:通過功
免疫細胞:抗原遞呈細胞
1.抗原遞呈細胞的概念 在機體的免疫應答過程中,能攝取、加工、處理抗原并將抗原信息提呈給T淋巴細胞的輔佐細胞,稱為 抗原提呈細胞(APC)。 2.抗原遞呈細胞的種類 抗原提呈細胞分專職性遞呈細胞和非專職性遞呈細胞兩類。單核/巨噬細胞、樹突狀細胞(DC)和B淋巴細胞等能表達MHC Ⅱ類分子的
免疫印跡與免疫檢測實驗——第二抗體歐聯物進行免疫檢測
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒封閉緩沖液TTBS緩沖液第一抗體TBS緩沖液儀器、耗材手套搖床實驗步驟1. ?將膜放入可熱密封的塑料袋,加5 ml 封閉液,密封塑料袋,在旋轉搖床或擺動平臺中搖動30~60 min。?2. ?用封閉液稀釋第一抗體(取決于抗體和檢測系統,以1:10~1:100 000稀釋)。
免疫學實驗輪狀病毒抗原的檢測介紹
輪狀病毒抗原的檢測介紹: 輪狀病毒(rotavirus,RV)是嬰幼兒秋冬腹瀉的主要病原菌,常導致水電解質酸堿平衡紊亂,嚴重危害患兒身心健康甚至危及生命。因此,臨床越來越重視腹瀉患者糞便中病原的檢測。 輪狀病毒抗原的檢測是人類輪狀病毒感染的特異診斷。輪狀病毒抗原的檢測正常值: 輪狀病毒抗原檢測
免疫學實驗瘧原蟲抗體和抗原介紹
瘧原蟲抗體和抗原介紹: 指檢測瘧原蟲感染后血液中的抗原和抗體。瘧原蟲抗體和抗原正常值: 間接免疫熒光法:小于1:20。 酶聯免疫吸附試驗、放射免疫法:陰性。瘧原蟲抗體和抗原臨床意義: 異常結果:本檢測用于瘧疾的診斷。 人感染發生原蟲血癥后1周就可檢出免疫抗體,且在短期內達到高峰,一段時間后
免疫熒光技術直接法測抗原實驗步驟
直接法測抗原⑴基本原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01m
免疫學實驗甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)介紹
甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)介紹: 甲型肝炎病毒抗原是一種能夠引發甲型肝炎病毒抗體產生的物質,檢測出甲型肝炎病毒抗原可證實甲型肝炎病毒在體內的存在。 甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)正常值: 陰性。 甲型肝炎病毒抗原(HAVAg)臨床意義: 異常結果: 本檢查主要用于甲型肝炎的輔助診
小鼠腦片免疫組織化學(ABC法)實驗——免疫組化法
實驗方法原理通過特異的抗原抗體反應標記上可見的顯示物系統來檢查細胞及組織上原位抗原或抗體成分的方法。在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其性質定位,還可以利用細胞分光光度計、圖像分析儀、共聚焦顯微鏡等進行細胞原位半定量測定。免疫組織化學的顯著特點是特異性強。實驗材料冷凍切片試劑、試劑盒一抗;二
免疫沉淀實驗——抗Ig血清免疫沉淀放射性標記抗原
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SDS儀器、耗材離心機搖床實驗步驟1. ?按基本方案進行,但以下說明的操作步驟已經修改:?(2a)按每毫升加入2 μl 正常血清的量對放射性標記抗原進行預澄清處理,加入適量的抗血清,于4℃放置12~18 h, 111 000 g 離心10 min,保留上清。?(4a)加入1