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  • 組織病理實驗_石蠟切片法

    實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱H.E.對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便于全面觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。實驗材料小鼠試劑、試劑盒中性福爾馬林固定液酒精二甲苯石蠟蜂蠟蘇木精染液伊紅酒精溶液鹽酸酒精溶液甘油蛋白粘片劑中性樹膠卡諾固定液儀器、耗材切片機恒溫箱蠟杯酒精燈解剖剪培養皿鑷子單面刀片包埋盒染色缸蓋玻片載玻片玻片盤顯微鏡溫度計水浴鍋實驗步驟一、材料準備:1. 中性甲醛固定液:甲醛(37%-40%,市售,本所購買即為此濃度)100 mL磷酸氫二鈉 6.5 g磷酸二氫鉀(鈉)4 g雙蒸水 900 mL2. 1%鹽酸乙醇液:鹽酸 1份70%酒精 100份3. 甘油蛋白貼片劑:蛋白 50 ......閱讀全文

    組織病理實驗_石蠟切片法

    實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱H.E.對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法適用范圍廣泛,對組織細胞的各種成分都可著色,便于全面觀察組織構造,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存。實驗

    病理制片技術——組織石蠟切片

    組織經石蠟包埋后制成的蠟塊,用切片機制成切片的過程為石蠟切片法。石蠟切片法現使用的切片機有平推式切片機、輪轉式切片機兩種。一、平推式切片機石蠟切片法1.切片前的準備:清洗過的載物片(或免清洗的),毛筆,鉛筆,小竹片,水槽,霧化器,攤片器,切片刀,刀架。2.切片制作步驟:刀架的粗削部放在頭端,在切片機

    組織病理實驗_冰凍切片

    組織病理實驗廣泛應用于生物學、解剖學、病理學、腫瘤學、法醫學、臨床診斷學等實驗方法原理冰凍切片是指將組織在冷凍狀態下直接用切片機切片。它實際上是以水為包埋劑,將組織進行冰凍至堅硬后切片的。在冰凍切片前組織不經過任何化學藥品處理或加熱過程,大大縮短了制片時間。同時,由于此法不需要經過脫水、透明和浸蠟等

    普通組織石蠟包埋切片步驟

      1、取材:新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風櫥內用手術刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對應的標簽放于脫水盒內。  2、脫水:將脫水盒放進吊籃里于脫水機內依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min

    植物組織石蠟切片的制作

    一、實驗目的 1.熟練掌握石蠟切片的方法。 2.掌握永久制片的制作過程,為研究植物的內部結構奠定基礎。 3.學會植物內部結構的比較研究方法。 二、實驗器具與 試劑1.器具 石蠟切片機、烘箱、顯微鏡、染色缸、小培養皿、鑷子、毛筆、吸水紙、紗布、載玻片、蓋玻

    組織石蠟包埋和切片技術

    包埋劑embedding?agent?  在制作切片或超薄切片時,由于組織是柔軟的,或局部的軟硬不均,這樣制作厚薄均勻的切片是困難的。所以有必要用一定物質浸透組織內部,整個組織一樣硬化,以利于切成薄片,這種物質叫做包埋劑。一股用光學顯微鏡觀察的切片,用石蠟、火棉膠、炭蠟、明膠等作包埋劑;電子顯微鏡則

    組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片

    二者應該都是可以的,具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,OCT包埋劑等等),石蠟片的制作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容

    石蠟切片與冰凍切片

    一、組織和細胞標本類型:(一) 組織標本類:1、 石蠟切片:組織形態保存好2、 冰凍切片:抗原性保存好(二)細胞標本類:1、組織印片 2、細胞培養片(細胞爬片) 3、細胞涂片二、組織取材1、腦組織和神經組織應采用灌注固定后,再進行后固定。2、組織取材注意事項:(1)標本新鮮:組織要求離體后30min

    石蠟切片免疫組織化學染色

    主要試劑染色缸;染色架;保濕盒;晾片盤;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘;2.?????脫蠟和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(

    普通組織石蠟包埋切片的注意事項

      1、固定劑應有足夠的量,一般為組織塊體積的10∽15倍。  2、根據組織的不同和實驗目的的不同,選取不同的固定劑。  3、固定時間依材料大小、固定劑種類而異,可從1小時到幾時小時,有時中間需要更新固定劑。某些固定劑對組織的硬化作用較強,作用時間應嚴加控制,不能過長。  4、取材切面要平整,厚度不

    石蠟切片免疫組化實驗

    即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法免疫組化可應用于:(1)確定組織細胞內抗原 (多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究;(2)診斷異常細胞,指導治療。實驗方法原理根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后,加入

    石蠟切片免疫組化實驗

    即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法 鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法 卵白素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC)法 鏈霉親和素—生物素—過氧化物酶復合物(SABC)法 ? ? ? ? ? ?

    石蠟切片免疫組化實驗

    實驗方法原理 根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后,加入底物顯色。實驗材料 石蠟切試劑、試劑盒 PBS檸檬酸鹽緩沖液蒸餾水增強劑酶標抗鼠 兔聚合物蘇木素酒精二甲苯樹膠鹽酸二氨基聯苯胺儀器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架顯微鏡膠頭

    石蠟切片法在切片步驟后為什么二甲苯無法溶掉石蠟

    你在粘片后,直接將玻片放入二甲苯里面了么,如果是這樣的話,你看看玻片上面是否還存在多余的水分,如果有,我建議你在粘片后,先將之烘干,等水分完全干去,再將玻片投入二甲苯里,

    石蠟切片如何檢測線粒體功能需要多少石蠟切片

    線粒體有關的腦組織染色問題(線粒體,腦組織,石蠟切片,認知功能,心理)] 本人心理專業,研究認知功能方面,無奈需要生理的指標,因此對動物認知相關的腦區進行取材,主要想測線粒體功能和形態方面的指標。可是本人對這方面一竅不通,急需大家伙幫忙。我現在把組織分為兩組進行處理,一部分-80冷藏了,好像是做分子

    石蠟切片組織有橫向裂紋是怎么回事

      組織的形態不是很清晰,可能沒有固定好。  建議:  1、取材要快,離體5分鐘內修整好組織塊,放入固定液,越快越好,減少組織自溶;  2、組織固定時體積要小,不大于5mm;  3、固定液充分,固定液與組織的體積比10-20:1。  石蠟切片(paraffin section)組織學常規制片技術中最

    石蠟組織切片的保存方法和注意事項

    許多實驗室研究人員習慣將組織蠟塊切片后長期保存在室溫條件下,而切片后的組織在室溫下長期保存抗原易損失。一些研究發現,切片在室溫下保存3個月以上,免疫組化染色結果會出現減弱,甚至陰性。因此,有學者進行了新、舊切片保存時間對照實驗。選擇11種不同組織蠟塊每例連續切10片,共110片,常溫空氣中放置1個月

    石蠟切片的制作

    以石蠟制作的切片,可以制成極薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蠟切片不但可以達到這個要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。這一點是冰凍切片和火棉膠切片難以獲得的結果。另外,石蠟切片還便于制作大批的或是連續的切片。而且以石蠟包埋的組織塊便于長期保存。所以石蠟切片是目前各種切片制作方法中

    石蠟切片技術簡介

    石蠟切片(paraffin section)組織學常規制片技術中最為廣泛應用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細胞組織的形態結構,也是病理學和法醫學等學科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態變化的主要方法,而且也已相當廣泛地用于其他許多學科領域的研究中。

    石蠟切片的制作

    以石蠟制作的切片,可以制成極薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蠟切片不但可以達到這個要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。這一點是冰凍切片和火棉膠切片難以獲得的結果。另外,石蠟切片還便于制作大批的或是連續的切片。而且以石蠟包埋的組織塊便于長期保存。所以石蠟切片是目前各種切片制作方法中

    石蠟切片免疫組化實驗3

    卵白素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC)法實驗材料蠟塊切片試劑、試劑盒多聚甲醛蒸餾水蔗糖過氧化氫甲醇PBS酒精KPBS牛血清白蛋白疊氮納一抗二抗儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯實驗步驟1. ?4%多聚甲醛常規灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中過夜。蠟塊制作。切片,貼片。0.01 M KPBS清洗5

    石蠟切片免疫組化實驗步驟

    脫蠟和水化1. 將切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min,二甲苯Ⅱ(10 min)。2. 再次浸入無水乙醇Ⅰ(5 min)-無水乙醇Ⅱ(5 min)-95%酒精(5 min)-80%酒精(5 min)-70%酒精(5 min),然后去離子水沖洗2次,每次2 min。 抗原修復?(可選)3. 將組織切片放入

    石蠟切片免疫組化實驗4

    實驗方法原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一種顯示組織和細胞中抗原分布的簡便而敏感的免疫組化染色方法,是眾多免疫組織化學方法的一種。SABC法:一抗+ 生物素標記二抗+ 滴加試劑SABC(鏈霉卵白素+ 辣根酶標記生物素)+ 辣根酶底物顯色。目前常用的親和素從

    石蠟切片免疫組化實驗2

    鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法實驗方法原理SP(streptavidin-perosidase)法,即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法。SP法是最常使用的方法。試劑、試劑盒二甲苯酒精PBS雙氧水枸櫞酸緩沖液羊血清工作液辣根過氧化物酶鏈霉素卵白素蘇木素DAB儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯玻璃缸

    石蠟切片制作(蘇木精伊紅對染法)

    石蠟切片制作可以用于:(1)保持細胞間的正常的相互關系,能較好和較長時間地保留細胞的原貌。(2)是光學顯微鏡的主要制片方法。實驗方法原理石蠟切片是最基本的切片技術,冰凍切片和超薄切片等都是在石蠟切片基礎上發展起來的。蘇木素與伊紅對比染色法(簡稱 H.E. 對染法)是組織切片最常用的染色方法。這種方法

    石蠟切片和冰凍切片的比較

    (1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時不需抗原修復這一步。缺點是細

    石蠟切片與冷凍切片的區別

    1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,而有的一抗只能做冰凍切片,關鍵取決于所要檢測的抗原穩定性,有的抗原不穩定,經過組 織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等一系列的做石蠟切片的步驟,所檢測的抗原易被破壞,這時只能用冰凍切片來做,檢測這類抗原的一抗只能做冰凍切片, 而那些穩

    石蠟切片、冰凍切片及振動切片的區別

    一、石蠟切片??? 把修好的蠟塊裝在旋轉切片機上,即可進行切片(section)。切片必須保持切片刀銳利,切片厚度通常為5~7um,也可根據染色需要切成不同厚度,一般不旋轉式切片機超過10um。切好的蠟帶,放人40℃左右的溫水中將蠟片展平。良好的切片應無刀痕、裂痕,切片厚度均一平整。切片如有上述

    植物組織化學顯微鏡標本片制作方法_石蠟切片法

    實驗方法原理石蠟切片技術是顯微技術上最重要最常用的一種方法。其優點在于①應用范圍廣,幾乎適用于所有的植物材料;②能將材料切成厚薄均一的切片,較清楚地顯現細胞、組織的細微結構;③能切成連續蠟帶,可觀察細胞和組織的動態發生及層次變化過程;④切片可以長期保存,便于以后觀察比較。缺點是:操作程序比較復雜,需

    海水魚卵石蠟切片組織破碎的原因

    本人覺得是脫水這個環節有問題,事先應當做一個預備試驗,看怎樣的酒精梯度比較合適。有時候脫水過度會造成組織脆弱,切片的時候就容易破碎。這里有個參考值,但是建議摟主最好作些修改:小老鼠內臟脫水程序:固定液30分鐘85%酒精30分鐘95%酒精30分鐘100%酒精30分鐘100%酒精30分鐘二甲苯15分鐘二

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