滲透溶脹法制備細胞核實驗
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒Earle’s 平衡鹽溶液RSB儀器、耗材玻璃蓋玻片實驗步驟1. 懸浮培養出 HeLa 細胞,600 g 離心 5 分鐘收集細胞。2. 沉淀細胞用 5 倍體積 4℃ 預冷的 Earle’s 平衡鹽溶液重新懸浮。3. 重懸浮的細胞在 4℃,600 g 離心 5 分鐘,或者如步驟 1 所說加以延長。4. 用 10 倍體積的 RSB 重懸浮洗過的細胞沉淀,使離心管在冰上放置 10 分鐘。RSB:0.1 mol/L NaCl1.5 mmol/L MgCl20.01 mol/L Tris-HCl ( pH 7.4)5. 將一巴斯德吸管頭伸入細胞懸液 0.5~0.75 cm,通過虹吸作用取少量細胞涂到一載玻片上。6. 其上覆蓋一塊 22 mm2 的玻璃蓋玻片,在相差顯微鏡下檢查細胞。7. 將膨脹的細胞吸到預冷的玻璃 Dounce 勻漿器中。8. 快速向上抽出研杵 10~12 次,破碎細胞。9. 取......閱讀全文
有關超聲波細胞破碎的小知識
關于超聲波細胞破碎的內容。 細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。 但是由于細菌、酵母、真菌、植物細胞
有關超聲波細胞破碎的小知識
細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。 但是由于細菌、酵母、真菌、植物細胞壁的組成成分不同,且同類細胞結
肝亞細胞部分的制備——鈣沉淀法
實驗材料肝線粒體試劑、試劑盒氯化鈣氯化鉀Tris液蒸餾水儀器、耗材離心機離心管試管移液槍槍頭槍頭盒制冰機冰盒漩渦振蕩儀攪拌棒肝是代謝藥物的主要場所,而在代謝藥物中起關鍵作用的酶是位于線粒體的細胞色素P-450系統.常稱藥酶或混合功能氧化酶,或單加氧酶。一般說來,許多藥物經肝藥酶代謝后生成低毒或無毒分
組織和細胞RNA的制備——(異硫氰酸胍法)
[試劑主要]1.CSB緩沖液:42mM檸檬酸鈉;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸鈉);0.2 mM β-巰基乙醇。2.變性液:異硫氰酸胍(終濃度 4 M)25g、CSB緩沖液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助溶。4℃保存備用。3.2 M乙酸鈉:pH 4
感受態細胞的制備[電轉化法]
體外連接的DNA重組分子導入合適的受體細胞才能大量增殖。為了提高受體菌攝取外源DNA的能力,提高轉化效率以獲得更多的轉化子,人們摸索出了不同的方法處理細菌,使其處于感受態。目前主要采用電轉化法和CaCl2法將外源DNA導入受體細胞中,并需要相應地制備電轉化感受態細胞和CaCl2感受態細胞。實驗目的:
感受態細胞CaCl2制備法
原理:轉化(Transformation ):將外源DNA?分子引入受體細菌,使之獲得新的遺傳性狀。受體細菌一般是限制修飾系統缺陷的變異株,不含限制性內切酶和甲基化酶的突變體(R-,M-),可以容忍外源DNA 分子進入體內并穩定地遺傳給后代。受體細胞經過一些特殊方法,如電擊或CaCl2 、RbCl/
簡介正向滲透法脫鹽
“滲透”在海水淡化、脫鹽、水處理領域,又稱正滲透,是與反滲透互逆的一對方法。正滲透作為一種潛在的水純化和淡化新技術,世界上正對其進行著多角度、深層次的理論研究和實踐探索。國外1976年,有液-液體系的原始嘗試,國內1992年,發明過液-固體系的正向滲透(非加壓)吸附滲透法脫鹽(CN9211071
脫鹽方法正向滲透法
“滲透”在海水淡化、脫鹽、水處理領域,又稱正滲透,是與反滲透互逆的一對方法。正滲透作為一種潛在的水純化和淡化新技術,世界上正對其進行著多角度、深層次的理論研究和實踐探索。國外1976年,有液-液體系的原始嘗試,國內1992年,發明過液-固體系的正向滲透(非加壓)吸附滲透法脫鹽(CN92110710.
脫鹽方法反滲透法
反滲透均是用機械壓力使水分子能夠透過一種特殊膜(RO膜),氟離子則不能透過而被去除。改革開放以后反滲透技術大量應用于生產純凈水,因此,在除氟中也被人們大量應用,這種除氟的方法既去掉水中影響人體健康的有毒有害的物質,同時也去除了對人體十分有益的礦物質和微量元素。對水質前處理要求高需集中建站由專業人員進
凝膠滲透色譜法簡介
凝膠過濾色譜法:以水為主體,具有不同PH值得多種緩沖溶液,所有溶劑使用前均要以微孔濾膜或5號砂芯漏斗過濾。除此之外,還需根據所分離的化合物性質向流動相中加入一些添加劑以改善保留和分離效果。如當使用親水性有機凝膠作為固定相時,為消除體積排阻色譜法中不希望存在的吸附作用與基體的疏水作用,通常在流動相
細胞破碎技術的基本概念及其基本方法2
(3)膠體磨膠體磨的基本原理是流體或半流體物料在離心力的作用下,強制通過高速相對運動的定齒與動齒之間,使物料受到強大的剪切力,磨擦力、高頻振動和高速旋渦等復雜力等作用,有效地被粉碎、乳化、均質、混合,從而達到精細超微的效果。定轉子間的高速相對運動是使膠體磨工作獲得物理微細度的主要條件,只有提高磨盤的
吸脹作用(imbibition)
親水凝膠吸附水分子,并使其膨脹的過程,為非生命的物理過程。植物組織中含有很多這類物質如纖維素、果膠物質、淀粉和蛋白質等,它們具有很強的親水性,在未被水飽和時,就潛伏著很強的吸水能力。最明顯的例子是風干種子,因為其內貯存著大量蛋白質或淀粉。蛋白質與水結合的趨勢大于淀粉,因此,豆類種子吸脹作用極為明顯。
溶氧—電流法檢測原理
溶氧——電流法檢測原理:應用的是氧氣電極法的原理。在測量開始時 氧氣溶解在培養基中,隨著細菌的生長和繁殖,這些溶解氧不斷被消耗。DOX系統通過檢測與溶解氧量成比例的電流值來計算所含菌落總數,大腸菌群值。
酸性聚離子液體溶脹誘導自組裝形成類蜂窩狀固體催化劑
Honeycomb-structured solid acid catalysts fabricated via the swelling-induced self-assembly of acidic poly(ionic liquid)s for highly efficient hydro
反滲透水處理設備的制備原理
反滲透水處理設備通常由原水預處理系統、反滲透純化系統、超純化后處理系統三部分組成。預處理的目的主要是使原水達到反滲透膜分離組件的進水要求,保證反滲透純化系統的穩定運行。反滲透膜系統是一次性去除原水中98%以上離子、有機物及100%微生物(理論上)最經濟高效的純化方法。超純化后處理系統通過多種集成
制備純水當選反滲透水處理設備
水是生命之源,如今為了獲得更多健康的純水資源,就會運用各種水處理設備,今天,就給大家介紹反滲透水處理設備,一種久耐用、性能良好的水處理設備. 旭升公司指出,反滲透水處理設備是由原水預處理系統、反滲透純化系統、超純化后處理系統三個部分組成的設備,能夠滿足不同用途的水質指標要求. 反滲透
水相法分離染色質
水相法分離染色質試劑、試劑盒:水相裂解緩沖液儀器、耗材:離心機實驗步驟:像聚胺法的第 1、2 步中講的那樣誘導懸浮或單層培養細胞的中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃,1000 g 離心 10 分鐘然后重懸浮,典型的制備量為 10 ml 新鮮培養基含 108?個細胞。3. 將濃的細胞懸液在冰上放置至少
紅細胞滲透脆性測定
? 紅細胞滲透脆性試驗(Erythrocyte osmotic醫學教育網 fragility test)? 靜脈血1毫升,立即測定。? 本試驗是用于測定紅細胞膜有無異常,通過紅細胞對系列低滲生理鹽水的抵抗能力即紅細胞脆性來反映。抵抗力的大小與紅細胞表面積與體積的比值(S/V)有關,比值小對低滲鹽
紅細胞滲透脆性實驗
實驗方法原理本試驗是測定紅細胞對不同濃度低滲鹽水溶液的抵抗力,這種抵抗力與紅細胞表面積和體積的比值有密切關系.表面積大而體積小者對低滲鹽水抵抗力較大(脆性減低)反之,則抵抗力較小(脆性增加),球形細胞表面積深/體積比值減小,脆性增加.試劑、試劑盒NaCL溶液雙蒸水儀器、耗材容量瓶試管實驗步驟一、實驗
紅細胞滲透脆性試驗
紅細胞滲透脆性試驗red cellosmotic fragility test參考范圍:開始溶血 O.40%一0.44% (NaCl液)完全溶血 O.32%一O.36% (NaCl液)臨床評價:1.紅細胞膜,有人稱為鬼影(ghost),是一種由磷脂、非酰化的膽固醇和糖蛋白等組成膜脂質和主體、膜蛋白質
紅細胞滲透脆性試驗
紅細胞滲透脆性試驗red cellosmotic fragility test參考范圍:開始溶血 O.40%一0.44% (NaCl液)完全溶血 O.32%一O.36% (NaCl液)臨床評價:1.紅細胞膜,有人稱為鬼影(ghost),是一種由磷脂、非酰化的膽固醇和糖蛋白等組成膜脂質和主體、膜蛋白質
紅細胞滲透脆性實驗
實驗方法原理 本試驗是測定紅細胞對不同濃度低滲鹽水溶液的抵抗力,這種抵抗力與紅細胞表面積和體積的比值有密切關系.表面積大而體積小者對低滲鹽水抵抗力較大(脆性減低)反之,則抵抗力較小(脆性增加),球形細胞表面積深/體積比值減小,脆性增加.試劑、試劑盒 NaCL溶液雙蒸水儀器、耗材 容量瓶試管實驗步驟
細胞破碎的方法
機械法 主要通過機械切力的作用使組織細胞破碎的方法,常用的器械有組織搗碎機、勻漿器、研缽和研磨、壓榨器等。1.?組織搗碎機 將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至zui慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。一般用于動物組織、植物肉質種子、柔嫩的葉芽等,轉速可高達1
單位重力沉降法純化四膜蟲細胞核實驗
單位重力沉降法純化四膜蟲細胞核 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞核 試劑、試劑盒 PMSF 儀器、耗材 培養基
單位重力沉降法純化四膜蟲細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞核 試劑、試劑盒 PMSF 儀器、耗材
單位重力沉降法純化四膜蟲細胞核實驗
實驗材料細胞核試劑、試劑盒PMSF儀器、耗材培養基有機玻璃容器實驗步驟1. 準備細胞核。2. 準備修訂培養基,當在冷的條件下強力混合培養基時,在所有修訂培養基中加入終濃度為 1 mmol/L 的 PMSF。3. 用 H2O 按 1:1 稀釋 2% 修訂培養基 7.5 ml。4. 將帶有夾子的柔性管連
反滲透法的相關介紹
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反滲透法脫鹽的介紹
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關于正向滲透法的介紹
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染色體分離實驗—水相法分離染色質
實驗材料細胞試劑、試劑盒水相裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟1. 像聚胺法的第 1、2 步中講的那樣誘導懸浮或單層培養細胞的中期阻遏狀態。2. 細胞在 4℃,1000 g 離心 10 分鐘然后重懸浮,典型的制備量為 10 ml 新鮮培養基含 108?個細胞。3. 將濃的細胞懸液在冰上放置至少 30