用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記懸浮培養的HeLa細胞
實驗材料細胞試劑、試劑盒磷酸儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 培養細胞至對數期，600 g 離心 5 分鐘。2. 棄上清，用無磷酸培養基懸浮細胞。3. 培養細胞 3~4 小時以耗盡它們的磷酸儲備。4. 再次離心，棄上清，用無磷酸培養基懸浮，加 32P 磷酸鹽至 20 μCi/ml 培養液，培養 16 小時。5. 提取并分析 RNA。......閱讀全文
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記懸浮培養的HeLa細胞
實驗材料細胞試劑、試劑盒磷酸儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 培養細胞至對數期，600 g 離心 5 分鐘。2. 棄上清，用無磷酸培養基懸浮細胞。3. 培養細胞 3~4 小時以耗盡它們的磷酸儲備。4. 再次離心，棄上清，用無磷酸培養基懸浮，加?32P 磷酸鹽至 20 μCi/ml 培養液，培養 1
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記單層培養細胞
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒FCS磷酸鹽儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基，加入新鮮的無磷酸培養基，培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基，并加?32P 磷酸鹽至 2
用[32P]磷酸標記細胞實驗
標記單層培養細胞標記懸浮培養的HeLa細胞實驗材料HeLa 細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒FCS ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
用[32P]磷酸標記細胞實驗
實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 FCS磷酸鹽儀器、耗材 無磷酸培養基實驗步驟 1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基，加入新鮮的無磷酸培養基，培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基，并加 32P 磷酸
用[32P]磷酸標記細胞實驗
標記單層培養細胞 標記懸浮培養的HeLa細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 HeLa 細胞
標記裂解培養細胞實驗
基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞）基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞）SDS煮沸法裂解細胞實驗方法原理實驗材料待標記的培養細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒37℃標記培養液 ? ? ?
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗材料 懸浮細胞試劑、試劑盒 多聚-L-賴氨酸儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 1. ?細胞在冰浴中冷卻，然后用臺式離心機于4℃以800 g 離心5 min，吸去培養液并以4℃PBS重懸細胞。?2. ?離心吸去PBS，以1~2 ml 2%PFA固定液，或2%PFA固定液/0.1% Triton X
懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
實驗方法原理免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒多聚
32－P－標記裂解培養細胞實驗
基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞） 基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞） SDS煮沸法裂解細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
32－P－標記裂解培養細胞實驗
實驗方法原理 實驗材料 待標記的培養細胞試劑、試劑盒 37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS) ／磷酸鹽平衡鹽水(PBS)溫和裂解緩沖液／RIPA 裂解緩沖液儀器、耗材 樹脂玻璃擋板(1 in 厚)取液器吸頭樹脂玻璃盒37℃微量離心管一次性
氨基酸代謝標記實驗_基本方案－對懸浮培養細胞
實驗方法原理在含有放射性標記氨基酸的培養基中，短期培養細胞（800 Ci／mmol)／[35S]標記蛋白質水解產物試劑、試劑盒PBS(冷凍)37℃ 脈沖標記培養基儀器、耗材配有液體同位素垃圾閥門的真空吸氣器實驗步驟1. 室溫融化 [35S] 標記甲硫氨酸，并用預熱的（37℃）脈沖標記培養基制備 0.
32P標記裂解培養細胞—溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞）
本實驗介紹了用?32P 標記和裂解培養細胞，以用于蛋白質免疫沉淀分析。這種方法適用以?32P 標記任何細胞成分，可用于各種貼壁或不貼壁培養的昆蟲、鳥類和哺乳類細胞。實驗材料待標記的培養細胞試劑、試劑盒37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS)
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
實驗材料?培養細胞試劑、試劑盒?DMEMHClTBSTris儀器、耗材?微量離心管Plexiglas盒吸頭細胞刮子冷凍離心機實驗步驟 1.? 培養待標記的細胞至適當的生長期。?對于貼壁細胞：?2a.? 吸去培養液，用37℃的含血清不加標記物的標記培養液洗盡殘存的含磷酸鹽培養液，吸盡該培養液。?3a.
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
溫和去污裂解法 SDS煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 培養細胞 試劑、試劑盒
培養細胞標記和裂解物的制備實驗
溫和去污裂解法 SDS煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 培養細胞 試劑、試劑盒
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
32P標記裂解培養細胞—－溫和去垢劑裂解法（對非貼壁）
實驗材料待標記的培養細胞試劑、試劑盒37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS) ／磷酸鹽平衡鹽水(PBS)溫和裂解緩沖液／RIPA 裂解緩沖液儀器、耗材樹脂玻璃擋板(1 in 厚)取液器吸頭樹脂玻璃盒37℃微量離心管一次性吸管橡皮細胞刮子So
免疫學技術:懸浮細胞的免疫熒光標記實驗
免疫熒光標記技術（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗方法基本方案實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒
32－P－標記裂解培養細胞實驗——SDS煮沸法裂解細胞
實驗材料待標記的培養細胞固相化金黃色葡萄球菌（可選）試劑、試劑盒37℃標記培養液1 Ci／ml H3(32)PO4(溶于 HCl)冰冷 Tris 平衡鹽水(TBS) ／磷酸鹽平衡鹽水(PBS)SDS裂解緩沖液RIPA 校正液免疫沉淀洗液儀器、耗材橡皮細胞刮子Sorvall 冷凍離心機(或其他)樹脂玻
用[α32P]－3脫氧腺苷5三磷酸或[α32P]雙脫氧ATP末端標記...
用[α-32P] 3'脫氧腺苷5'-三磷酸或[α-32P]雙脫氧ATP末端標記雙鏈DNA的3'突出端實驗材料?限制性內切核酸酶小牛胸腺末端轉移酶模板 DNA試劑、試劑盒?乙酸銨乙醇酚氯仿末端轉移酶緩沖液儀器、耗材?Sephadex G-50 離心柱實驗步驟 一、材料1. 緩沖
請教Hela細胞培養用什么培養基最好
Hela細胞是人宮頸癌細胞株，也是大家認為比較好養的細胞株的一種。我一般都是用10％1640，0.25％胰酶消化，時間大概是3——5分鐘，這些你都可以自己摸索，在鏡下觀察或者用滴管吹大一下，做幾次就知道了。細胞長得比較快，大概2天就可以傳一次代，我一般都是一傳三，最多3天傳一次。細胞長滿了就可以傳了
靶細胞殺傷實驗：AnnexiV標記法
正常細胞的磷酯酰絲氨（phosphatidylserine，PS）位于細胞膜內表面，細胞凋亡時翻轉露于膜外側，可與annexinV高親合力結合。研究發現PS外翻為細胞凋亡的早期事件，先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的釋放。將效應細胞與靶細胞充分共育后，用PE結合的效應細胞特異性單克隆抗體（如CD
單個神經細胞標記實驗
實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982)，在該文獻中也可找到更詳細的技術指導（也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑
單個神經細胞標記實驗
用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982)，在該文獻中也可找到更詳細的技術指導（也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦試劑、試劑盒利多卡因Karnovsky 型固定液甲酚紫儀器、耗材微
單個神經細胞標記實驗
用辣根過氧化物酶對單個Purkmje細胞進行細胞內標記實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982)，在該文獻中也可找到更詳細的
特殊細胞培養實驗_懸浮培養法
實驗方法原理懸浮培養是使貼附性細胞呈懸浮狀態生長。如所培養的細胞本身屬懸浮生長類型，則無須做任何處理，在傳代時先做離心處理去除舊培養液，添加新培養液即可。但在培養貼附型細胞時，因其有貼附性，必須進行干擾使細胞不能貼附，才能形成懸浮狀態生長的細胞。實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶攪拌器實驗步驟1. ?用大
?－免疫組織化學法實驗——懸浮細胞的免疫熒光標記
實驗材料細胞生長于含培養液的15 mL Falcon管中試劑、試劑盒PBSPFA固定液儀器、耗材多聚L-賴氨酸包被的載玻片實驗步驟1) 細胞在冰浴中冷卻，然后用臺式離心機在4℃以800 g離心5 min (用于淋巴細胞）。吸去培養液并以4℃的PBS重懸細胞。離心機轉速依細胞類型進行調整，但必須低轉速
體細胞融合實驗——懸浮培養細胞的融合
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG1000儀器、耗材離心管實驗步驟1. 從無血清培養基中沉淀雜交前體細胞。2. 倒盡上清。3. 用手指彈撥管底或雙手搓轉離心管，使細胞重新懸浮。4. 加入 1 ml PEG1000，待 2 分鐘。5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培養基稀釋 PEG。于室溫，20
懸浮培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理以三種不同細胞濃度進行系列細胞培養，每天計數細胞直至平臺期。實驗步驟材料無菌懸浮細胞培養培養液，l00 mlD-PBSA(細胞計數用）24 孔板非無菌裝培養板的塑料盒CO2?溫箱或 5% C02?以充盈塑料盒操作步驟1. 如單層培養那樣（見方案 21.8 ) 將生長液中的細胞懸液以不同濃
懸浮培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理以三種不同細胞濃度進行系列細胞培養，每天計數細胞直至平臺期。實驗步驟 材料 無菌 懸浮細胞培養 培養液，l00 ml D-PBSA(細胞計數用） 24 孔板 非無菌 裝培養板的塑料盒 CO2 溫箱或 5% C02 以充盈塑料盒 操作步驟 1. 如單層培養那樣（見方案 21.8