胰島素剌激的胰島素受體自磷酸化實驗
本實驗中,我們將考察胰島素受體的胰島素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗體(antiphosphotyrosine antiboty) 來檢測磷酸化的受體,后者可用 SDS-PAGE 來分離。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒純化的鼠肝細胞質膜部分純化的胰島素受體純化的胰島素受體豬胰島素ATP一抗二抗自磷酸化緩沖液起始溶液SDS-PAGE 樣品緩沖液蛋白質印跡轉移液封閉緩沖液Tris-HClNaClTween-20儀器、耗材蛋白質凝膠電泳裝置Whatman 3 MM 濾紙硝酸纖維素膜電泳轉移槽ECLTM免疫印跡檢測試劑盒實驗步驟材料與設備純化的鼠肝細胞質膜(見本單元實驗 1)部分純化的胰島素受體,得自 WGA-瓊脂糖柱層析(見實驗本單元 3)純化的胰島素受體,得自胰島素瓊脂糖柱層析(見實驗本單元 4)豬胰島素〔17,5pmol/L(0.1 mg/ml),溶于 0.001mol/LHCl〕(如 Si......閱讀全文
胰島素剌激的胰島素受體自磷酸化實驗
胰島素剌激的胰島素受體自磷酸化實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 純化的鼠肝細胞質膜 部分純化的胰島素受體
胰島素剌激的胰島素受體自磷酸化實驗
本實驗中,我們將考察胰島素受體的胰島素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗體(antiphosphotyrosine antiboty) 來檢測磷酸化的受體,后者可用 SDS-PAGE 來分離。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒純化的鼠肝細胞質膜部分純化的胰島素受體純化
胰島素剌激的胰島素受體自磷酸化實驗
本實驗中,我們將考察胰島素受體的胰島素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗體(antiphosphotyrosine antiboty) 來檢測磷酸化的受體,后者可用 SDS-PAGE 來分離。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒純化的鼠肝細胞質膜部分純化的胰島素受體純化
胰島素受體對胰島素親和性的測定實驗
材料[125I]胰島素(受體級)(DuPontNENNEX196)豬胰島素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)試劑結合緩沖液(冷配體置換實驗用)(配方,見 試劑的配制? PP.234~240)操作程序1)于
胰島素受體與[125I]胰島素的交聯實驗
胰島素受體與[125I]胰島素的交聯實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 試劑、試劑盒 純化的鼠肝
胰島素受體與[125I]胰島素的交聯實驗
胰島素受體與[125I]胰島素的交聯實驗標簽: 胰島素受體 [125I]胰島素 蛋白質純化與鑒定實驗指南 第四單元 實驗 5本實驗介紹關于胰島素受體與[125I]胰島素的交聯過程。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。胰島素受體與[125I]胰島素的交聯實驗實驗方法原理 試劑、試劑盒
胰島素受體對胰島素親和性的測定實驗
本實驗介紹胰島素受體對胰島素親和性的測定方法。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒牛血淸白蛋白豬胰島素[125I]胰島素(受體級)結合緩沖液實驗步驟材料[125I]胰島素(受體級)(DuPontNENNEX196)豬胰島素(如,Sigma Chemical Co,I350
胰島素受體與[125I]胰島素的交聯實驗
試劑、試劑盒純化的鼠肝細胞質膜部分純化的胰島素受體純化的胰島素受體[125I] 胰島素豬胰島素雙琥珀酰亞胺酰辛二酸二甲亞砜NH4Cl甘油SDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材蛋白質凝膠電泳裝置干膠器實驗步驟材料與設備純化的鼠肝細胞質膜(見本單元實驗 1)部分純化的胰島素受體,得自 WGA-瓊脂糖柱層
胰島素受體對胰島素親和性的測定實驗
試劑、試劑盒 牛血淸白蛋白豬胰島素[125I]胰島素(受體級)結合緩沖液實驗步驟 材料[125I]胰島素(受體級)(DuPontNENNEX196)豬胰島素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)試劑結合緩沖液(冷配體置換實驗用)(配方,見“試劑的配制”,P
胰島素受體糖基化的分析實驗
胰島素受體糖基化的分析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 純化的胰島素受體 內切糖苷酶 F 內切糖苦酶 H
胰島素受體的溶解及活性測定實驗
試劑、試劑盒 純化的鼠肝質膜牛血清白蛋白 [125I] 胰島素豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B 溶液 C 結合緩沖液儀器、耗材 Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管實驗步驟 材料與設備純化的鼠肝質膜(得自實驗 1)Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125
膜上胰島素受體數量的測定實驗
胰島素可高親和性地與其受體結合(KD~109mol/L),這一能力使我們能估測出甚至是相當粗制的制備物中的胰島素受體數。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒結合緩沖液[125I] 胰島素 (受體級)牛血清白蛋白豬胰島素實驗步驟材料牛血清白蛋白(BSA,1%)豬胰島素〔17
膜上胰島素受體數量的測定實驗
試劑、試劑盒 結合緩沖液 [125I] 胰島素 (受體級) 牛血清白蛋白豬胰島素實驗步驟 材料牛血清白蛋白(BSA,1%)豬胰島素〔17.5/umol/L(0.1 mg/ml) 于 0.001mol/LHC1 中〕(如 Sigma Chemical Co.13505)[125I] 胰島素 (受體級)
胰島素受體的溶解及活性測定實驗
胰島素受體的溶解及活性測定實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 純化的鼠肝質膜 牛血清白蛋白 [125I]
胰島素受體的溶解及活性測定實驗
試劑、試劑盒純化的鼠肝質膜牛血清白蛋白[125I] 胰島素豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C結合緩沖液儀器、耗材Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管實驗步驟材料與設備純化的鼠肝質膜(得自實驗 1)Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰島素
膜上胰島素受體數量的測定實驗
膜上胰島素受體數量的測定實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 結合緩沖液 [125I] 胰島素 (受體級)
胰島素受體糖基化的分析實驗
本實驗介紹關于胰島素受體糖基化的分析。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒純化的胰島素受體內切糖苷酶 F內切糖苦酶 H神經氨酸酶甘油蛋白酶抑制劑儲液內切糖苷酶 F 緩沖液內切糖苷酶 H 緩沖液神經氨酸酶緩沖液SDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材凝膠電泳裝置X-射線膠片和
胰島素受體底物的概念
胰島素受體底物(insulin receptor substrate,IRSs)是一種能夠被激活的胰島受體酪氨酸激酶的底物, 其上具有十幾個酪氨酸殘基可被磷酸化,磷酸化的IRSs能夠結合并激活下游效應物。
胰島素受體的功能介紹
已知有三種胰島素受體酪氨酸激酶作用的底物(IRSs)。第一種是胰島素受體底物1(IRS1),是一種蛋白質,其上有多個(至少8個)可被受體激酶磷酸化的位點,磷酸化后可同多種效應物結合,包括:PI(3)K、Syp(一種磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一種連接蛋白)、GRB2(growthfactor rec
胰島素的受體是什么
胰島素的受體是胰島素受體: 一個四聚體,由兩個α亞基和兩個β亞基通過二硫鍵連接。兩個α亞基位于細胞 質膜的外側,其上有胰島素的結合位點;兩個β亞基是跨膜蛋白,起信號轉導作用。無胰島素結 合時,受體的酪氨酸蛋白激酶沒有活性。當胰島素與受體的α亞基結合并改變了β亞基的構型 后,酪氨酸蛋白激酶才被激活
胰島素受體底物的定義
胰島素受體底物(insulin receptor substrate,IRS),參與胰島素及其他細胞因子信號轉導的磷酸化蛋白。IRS在被胰島素受體磷酸化以后,如同一塊“磁鐵”與那些具有SH2結構域的蛋白結合,根據所結合蛋白的具體結構產生不同的效應,如激活SH2蛋白的酶活性、改變蛋白質構型并同另外的蛋
胰島素受體底物的主要種類
已知有三種胰島素受體酪氨酸激酶作用的底物(IRS)。第一種是胰島素受體底物1(IRS1)。這是一種蛋白質,其上有多個(至少8個)可被受體激酶磷酸化的位點,磷酸化后可同多種效應物結合,包括PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、Syp(一種磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一種連接蛋白)、GRB2(growthf
胰島素受體底物的功能介紹
胰島素受體底物(insulin receptor substrate,IRSs)是一種能夠被激活的胰島受體酪氨酸激酶的底物, 其上具有十幾個酪氨酸殘基可被磷酸化,磷 酸化的IRSs能夠結合并激活下游效應物。
關于胰島素受體底物的簡介
胰島素受體底物(insulin receptor substrate,IRS) 是指能夠被激活的胰島素受體酪氨酸激酶作用的底物, 其上具有十幾個酪氨酸殘基,可被磷酸化,磷酸化的IRS能夠結合并激活下游效應物。 IRS在被胰島素受體磷酸化以后,如同一塊“磁鐵”與那些具有SH2結構域的蛋白結合,根
關于胰島素受體的作用介紹
當胰島素與受體的α亞基結合并改變了β亞基的構型后,酪氨酸蛋白激酶才被激活,激活后可催化兩個反應∶ ①使四聚體復合物中β亞基特異位點的酪氨酸殘基磷酸化,這種過程稱為自我磷酸化(autophosphorylation); ②將胰島素受體底物(insulinreceptor substrate,I
免疫學實驗抗胰島素受體抗體介紹
抗胰島素受體抗體介紹: 抗胰島素受體抗體(IRA)是Flier等于1975年在研究合并黑色棘皮癥的胰島素抵抗綜合征病人時發現的。此抗體可與存在于機體細胞膜上的胰島素受體結合,而表現為對胰島素的親和性降低。檢測IRA時常用傳代人淋巴細胞IM-9(胞質膜上受體豐富,細胞易于獲得)或人胎盤制備胰島素受體
胰島素受體底物種類介紹
第一種是胰島素受體底物1(IRS1),是一種蛋白質,其上有多個(至少8個)可被受體激酶磷酸化的位點,磷酸化后可同多種效應物結合,包括:PI(3)K、Syp(一種磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一種連接蛋白)、GRB2(growthfactor receptor-bound protein2,一種通過SH
關于胰島素受體底物的種類介紹
已知有三種胰島素受體酪氨酸激酶作用的底物(IRS)。 第一種是胰島素受體底物1(IRS1)。這是一種蛋白質,其上有多個(至少8個)可被受體激酶磷酸化的位點,磷酸化后可同多種效應物結合,包括PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、Syp(一種磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一種連接蛋白)、GRB2(gro
胰島素受體底物的結構功能特點
胰島素受體底物(insulin receptor substrate,IRS) 是指能夠被激活的胰島素受體酪氨酸激酶作用的底物, 其上具有十幾個酪氨酸殘基,可被磷酸化,磷酸化的IRS能夠結合并激活下游效應物。
胰島素測定實驗
實驗材料 胰島素標準品125 I-胰島素試劑、試劑盒 抗血清第二抗體PBS正常兔血清儀器、耗材 計數儀試管加樣器離心機實驗步驟 一、材料及試劑?1. ?胰島素標準品(不同濃度的)?2、125 I-胰島素?3、抗血清?4、第二抗體?5、分析試劑 ?為0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常