雙向電泳操作步驟——雙向電泳操作步驟
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒ddH2O溴酚藍指示劑礦物油丙烯酰胺乙醇MilliQ 水飽和正丁醇SDS瓊脂糖儀器、耗材樣品水化盤冰箱厚濾紙搖床電泳槽電泳儀鑷子二向電泳制冷儀手套實驗步驟一、樣品制備。1. 稱重后將樣品加入Dounch勻漿器。每100 mg 組織加入1.5——2.0 ml SDS/或尿素/溶解緩沖液，用B號研棒沖擊50次，然后以A號研棒沖擊50次。2. 放置幾分鐘后，取一小份樣品于200 μl 離心管100 000 g 離心2 h 以上或在200 000 g 以上離心1 h。保留上清（蛋白樣品）。加樣于第1向凝膠上。二、第一向等電聚焦。1.&nbs......閱讀全文
雙向電泳操作步驟——雙向電泳操作步驟
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒ddH2O溴酚藍指示劑
雙向電泳操作步驟
水化上樣( 被動上樣)1. 從冰箱中取出 IPG 膠條，室溫放置 10min。2. 沿水化盤槽的邊緣從左向右線性加入樣品，槽兩端各 1cm 左右不加樣，中間的樣品液一定要連貫。注意：不要產生氣泡，否則會影響膠條中蛋白質的分布。3. 用鑷子輕輕撕去 IPG 膠條上的保護層。注意：堿性端較脆弱，應小心操
雙向電泳操作步驟
實驗材料 細胞樣品試劑、試劑盒 ddH2O溴酚藍指示劑礦物油丙烯酰胺乙醇MilliQ 水飽和正丁醇SDS瓊脂糖儀器、耗材 樣品水化盤冰箱厚濾紙搖床電泳槽電泳儀鑷子二向電泳制冷儀手套實驗步驟 1. ?樣品制備。2. ?第一向等電聚焦。3. ?第二向SDS電泳。4. ?凝膠的染色。5. ?凝膠掃描和分析
雙向電泳操作步驟
一、等電聚焦 1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。 3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖
雙向電泳操作步驟
雙向電泳操作步驟 第一向凝膠 第二向凝膠 組織來源的蛋白質樣品的溶解和制備 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 雙向電泳（two-dimensiona
雙向電泳完整操作步驟
（一）第一向等電聚焦1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100ml樣
雙向電泳完整操作步驟
（一）第一向等電聚焦1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100ml樣
雙向電泳的操作步驟
第一向等電聚焦⒈ 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含IPG buffer）一小管（1ml/管），置室溫溶解。⒉ 在小管中加入0.01g DTT， 0.5% 對應膠條pH范圍的IPG buffer，充分混勻。⒊ 從小管中取出400微升水化上樣緩沖液，加入100微升樣品（
雙向電泳的操作步驟
第一向等電聚焦⒈ 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含IPG buffer）一小管（1ml/管），置室溫溶解。⒉ 在小管中加入0.01g DTT， 0.5% 對應膠條pH范圍的IPG buffer，充分混勻。⒊ 從小管中取出400微升水化上樣緩沖液，加入100微升樣品（
雙向電泳完整的操作步驟
（一）第一向等電聚焦?1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。?2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。?3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100
雙向電泳完整的操作步驟
（一）第一向等電聚焦1.從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT,不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管）,置室溫溶解.2.在小管中加入0.01g DTT,Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混勻.3.從小管中取出400ml水化上樣緩沖液,加入100ml樣品,充分
雙向電泳原理及操作步驟
實驗概要本文介紹了雙向電泳原理及操作步驟（第一向等電聚焦和第二向SDS-PAGE電泳）。實驗原理二維聚丙烯酰胺凝膠電泳技術結合了等電聚焦技術（根據蛋白質等電點進行分離）以及SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳技術（根據蛋白質的大小進行分離）。這兩項技術結合形成的二維電泳是分離分析蛋白質最有效的一種電泳手段。通
雙向電泳操作步驟——第二向凝膠
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒丙烯酰胺TEMED磷酸過硫酸銨溴酚藍NaOH儀器、耗材電泳儀墊片凝膠板尼龍篩子實驗步驟1. ?用墊片組裝凝膠平板。夾層每邊的墊片之上用夾子固定，并置于凝膠支架上。注意玻璃平板和墊片的平齊，收緊夾子以保證密封圈不發生泄漏。調整平板的水平和垂直，在平板間將放上凝膠識別標簽，使之
雙向電泳操作步驟及相關溶液配置
A． 實驗過程一 實驗原理：? ? 2-DE的第一向電泳等電聚焦是基于等電點不同而將蛋白粗步分離,第二向SDS-PAGE是基于蛋白質分子量不同,而將一向分離后的蛋白進一步分離.這樣就可以得到蛋白質等電點和分子量的信息.二 實驗步驟：1. 樣品的溶解? ? 取純化后的晶體蛋白3.0mg,加入300ul
雙向電泳（twodimensional－electrophoresis）完整操作步驟
（一）第一向等電聚焦從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100ml樣品，充
雙向電泳操作步驟——第一向凝膠
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒丙烯酰胺TEMED磷酸過硫酸銨溴酚藍NaOH儀器、耗材電泳儀離心機實驗步驟1. ?在干凈的1.5 mm 內徑的凝膠柱管上作好標記以指示應灌制凝膠柱的髙度。用橡皮筋將凝膠柱管捆綁成束，在一水平面上垂直豎起管束，從其頂部向下推壓，使各柱管的底部平齊。2. ?用三、四層Paraf
雙向電泳(twodimensional－electrophoresis)操作步驟及相關溶液
實驗相關試劑配制1.Bradford 工作液95%乙醇 25ml 先用乙醇溶解考馬斯亮蘭G250,溶解完后再加磷85%磷酸 52ml 酸，最后超純水定容至500ml.過濾后置于棕色瓶考馬斯亮蘭G250 0.035g 外加油皮紙保存（Bradford不穩定，一周內有效）2.裂解液尿素 8M硫脲 2MC
?－電化學分析儀器－?－正文－雙向電泳操作步驟
一、等電聚焦 1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。 3. 從小管中取出400ml水化上
雙向電泳操作步驟——組織來源的蛋白質樣品的溶解和制備
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SDS尿素儀器、耗材離心管轉子實驗步驟1. ?稱重后將樣品加入Dounch勻漿器。每100 mg 組織加入1.5~2.0 ml SDS/或尿素/溶解緩沖液，用B號研棒沖擊50次，然后以A號研棒沖擊50次。2. ?放置幾分鐘后，取一小份樣品于200 ul 離心管100 000
雙向電泳操作步驟（第一向等電聚焦和第二向SDSPAGE...
雙向電泳操作步驟（第一向等電聚焦和第二向SDS-PAGE電泳）（一）第一向等電聚焦1.從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。2.在小管中加入0.01g DTT，Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。3.
噪音計操作步驟及操作步驟
噪音計-操作步驟 1、打開噪音計攜帶箱，取出噪音計，套上傳感器。 2、將噪音計置于A狀態，檢測電池，然后校準噪音計。 3、對照常見的環境聲級大小表，調節儀器的測量量程。 4、測量：可以用快（測量聲壓級變化較大的環境的瞬時值）、慢（測量聲壓級變化不大的環境中的平均值）、脈沖（測量脈沖聲源）
雙向電泳
蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心. 雙向電泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分離約1 000個E.coli蛋白，并表明蛋白質譜不是穩定的，而是隨環境而變化. 雙向電泳原理簡明，第一向進行等電聚焦，蛋白質沿pH梯度分離，至各自的等電點；隨后，再沿垂直的方向進行分子量
雙向電泳
實驗概要本實驗介紹了雙向電泳技術，先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到二維分布的蛋白質圖。實驗原理雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上
ELISA操作步驟
酶聯免疫吸附實驗材料，試劑，溶液1．酶標板，100μltip頭，1ml Ep管，濕盒2．包被稀釋液（0.05mol/L碳酸鈉-碳酸氫鈉buffer,pH 9.6）碳酸鈉0.15g,碳酸氫鈉0.29g,疊氮鈉0.02g,加雙蒸水至100ml,調至pH 9.63. 封閉液(5%小牛血清/PBS溶液)小牛
xrd操作步驟
樣品準備：樣品在實驗前應磨成平滑去氧化的表面，并用酒精清洗，若用樣品是粉末，均勻平鋪粘在膠布上。設備的操作步驟如下：1.開實驗室電源，包括實驗室總電源，三相電源，儀器電源及冷卻循環水電源等。2.打開控制軟件：打開計算機，打開桌面的“XG Operation” , 進入“XG control RINT
xrd操作步驟
樣品準備：樣品在實驗前應磨成平滑去氧化的表面，并用酒精清洗，若用樣品是粉末，均勻平鋪粘在膠布上。設備的操作步驟如下：1.開實驗室電源，包括實驗室總電源，三相電源，儀器電源及冷卻循環水電源等。2.打開控制軟件：打開計算機，打開桌面的“XG Operation” , 進入“XG control RINT
xrd操作步驟
樣品準備：樣品在實驗前應磨成平滑去氧化的表面，并用酒精清洗，若用樣品是粉末，均勻平鋪粘在膠布上。設備的操作步驟如下：1.開實驗室電源，包括實驗室總電源，三相電源，儀器電源及冷卻循環水電源等。2.打開控制軟件：打開計算機，打開桌面的“XG Operation” , 進入“XG control RINT
xrd操作步驟
樣品準備：樣品在實驗前應磨成平滑去氧化的表面，并用酒精清洗，若用樣品是粉末，均勻平鋪粘在膠布上。設備的操作步驟如下：1.開實驗室電源，包括實驗室總電源，三相電源，儀器電源及冷卻循環水電源等。2.打開控制軟件：打開計算機，打開桌面的“XG Operation” , 進入“XG control RINT
雙向電泳實驗
ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電
雙向電泳實驗
試劑、試劑盒 尿素去污劑儀器、耗材 聚丙烯酰胺凝膠實驗步驟 一、第一向1. 等電聚焦凝膠的準備雙向電泳通常用聚丙烯酰胺凝膠作介質，但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非離子或兩性離子去污劑。為了增加樣品的可溶性，可加 0.5% CHAPS。在第一向電泳中，最重要的是用載體兩性電解