直鏈淀粉樹脂親和層析純化麥芽糖結合融合蛋白實驗
親和層析方法幾乎可以將麥芽糖結合融合蛋白純化成單組分。麥芽糖結合蛋自（MBP) 是一個由大腸桿菌 malE 基因編碼的周質蛋白，是細菌麥芽糖轉運系統的成員之一。MBP 能結合微摩爾水平的麥芽糖和麥芽糊精，因此可用交聯了麥芽糖的瓊脂糖進行純化。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料表達 BMP 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒細胞裂解緩沖液細胞洗滌緩沖液柱洗脫緩沖液柱洗滌緩沖液MgCl2PMSFSDS 凝膠加樣緩沖液Tris-ClDNase溶菌酶RNase凝血酶、腸激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材Beckman Ti60 轉頭或相當的轉頭Sorvall GSA 轉頭或相當的轉頭Sorvall SS-34 轉頭或相當的轉頭直鏈淀粉瓊脂糖沸水浴超聲儀器—次性 Nalgene 濾器實驗步驟材料緩沖液和溶液貯存液、緩沖液和試劑的成分參見附錄1。貯存液稀釋......閱讀全文
直鏈淀粉樹脂親和層析純化麥芽糖結合融合蛋白實驗
實驗材料 表達 BMP 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液細胞洗滌緩沖液柱洗脫緩沖液柱洗滌緩沖液MgCl2PMSFSDS 凝膠加樣緩沖液Tris-ClDNase溶菌酶RNase凝血酶、腸激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材 Beckman Ti60 轉頭或相當的轉頭
直鏈淀粉樹脂親和層析純化麥芽糖結合融合蛋白實驗
親和層析方法幾乎可以將麥芽糖結合融合蛋白純化成單組分。麥芽糖結合蛋自（MBP) 是一個由大腸桿菌 malE 基因編碼的周質蛋白，是細菌麥芽糖轉運系統的成員之一。MBP 能結合微摩爾水平的麥芽糖和麥芽糊精，因此可用交聯了麥芽糖的瓊脂糖進行純化。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J
直鏈淀粉樹脂親和層析純化麥芽糖結合融合蛋白
? ? ? ? ? ? 實驗材料 表達 BMP 融合蛋白的大腸桿菌細胞 試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液 細胞洗滌緩沖液 柱洗
谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞 試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇 谷胱甘肽洗脫緩沖液 磷酸
谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗
實驗材料 表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇谷胱甘肽洗脫緩沖液磷酸緩沖鈉鹽溶液TritonX-100DNase溶菌酶RNase凝血酶、腸激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材 SorvallSS-34 轉頭或相當的轉頭谷胱甘肽-瓊脂糖樹脂皮下注射針頭實驗步驟
谷胱甘肽瓊脂糖親和層析純化融合蛋白實驗
pGEX 載體表達的外源蛋白與谷胱甘肽 S 轉移酶融合，因此可以通過谷胱甘肽-瓊脂糖親和層析進行純化。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料表達 GST 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒二硫蘇糖醇谷胱甘肽洗脫緩沖液磷酸緩沖鈉鹽溶液Tri
序列特異性DNA結合蛋白的親和層析純化實驗
DNA親和介質的制備 DNA偶聯于溴化氰活化的瓊脂糖上 用制備性凝膠電泳純化寡核苷酸 DNA親和層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
序列特異性DNA結合蛋白的親和層析純化實驗
實驗方法原理 實驗材料 兩種帶有結合位點的合成寡核苷酸各440μg試劑、試劑盒 TE緩沖液 pH 7.810×T4噬菌體多核苷酸激酶緩沖液20 mmol L ATP (鈉鹽） pH 7.0150 m Ci mL [γ-32P] ATP (6000 Ci mmol)10 U μL T4噬菌體多
序列特異性DNA結合蛋白親和層析純化實驗_DNA親和層析法
實驗材料制備性的DNA親和層析樹脂試劑、試劑盒緩沖液Z或其他柱緩沖液（如緩沖液Ze或TM)配制時含不同的KCl濃度（從緩沖液 Z 0.1 mol L KCl 至緩沖液 Z 1 mol L KCl對緩沖液Z 0. 1 mol L KCl透析的部分純化的蛋白質組分非特異性的競爭DNA柱再生緩沖液柱儲存緩
金屬螯合親和層析實驗——MCAC純化帶組氨酸尾可溶融合蛋白
經遺傳工程改造的使其氨基端或羧基端帶上6個連續的組氨酸殘基的重組蛋白，可用一種通過共價偶連的次氨基三乙酸（NTA）使鎳離子固相化的層析介質加以提純，是為金屬螯合親和層析。實驗材料蛋白質試劑、試劑盒IPTGNiSO4蛋白酶抑制劑MCAC-EDTATriton儀器、耗材層析柱轉子實驗步驟1. ?接種含以
序列特異性DNA結合蛋白親和層析純化實驗DNA親和介質制備
實驗材料兩種帶有結合位點的合成寡核苷酸各440μg試劑、試劑盒TE緩沖液 pH 7.810×T4噬菌體多核苷酸激酶緩沖液20 mmol L ATP (鈉鹽） pH 7.0150 m Ci mL [γ-32P] ATP (6000 Ci mmol)10 U μL T4噬菌體多核苷酸激酶（New Eng
GST融合蛋白的親和純化實驗
實驗方法原理 瓊脂糖顆粒和誘餌蛋白復合體在洗滌時并不會損失而且所有反應都含有等量的誘餌蛋白。為了證明在洗滌期間沒有任何材料損失，應使用 1/10 的 GST 融合體加樣做平行 SDS-PAGE 凝膠電泳并染色以便更確切地比較 GST 融合體蛋白帶。另外，融合蛋白的降解可能導致誘餌蛋白的量減少
GST融合蛋白的親和純化實驗
GST 共結合純化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 瓊脂糖顆粒和誘餌蛋白復合體在洗滌時并不會損失而且所有反應都含有等量的誘餌蛋白。為了證明在洗滌期間沒有任何材料損失，應使用
GST融合蛋白的親和純化實驗
實驗方法原理瓊脂糖顆粒和誘餌蛋白復合體在洗滌時并不會損失而且所有反應都含有等量的誘餌蛋白。為了證明在洗滌期間沒有任何材料損失，應使用 1/10 的 GST 融合體加樣做平行 SDS-PAGE 凝膠電泳并染色以便更確切地比較 GST 融合體蛋白帶。另外，融合蛋白的降解可能導致誘餌蛋白的量減少，尤其是當
核酸親和層析法純化蛋白質實驗
步驟一 偶聯寡核苷酸到溴化氰活化的 Sepharose 4B 步驟二 核酸親和層析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4
核酸親和層析法純化蛋白質實驗
實驗方法原理 DNA 偶聯至溴化氰活化的 Sepharcse 4B 是通過它們本身的堿基實現的。從理論上講，該方法也許干擾最佳結合序列的接近路徑，但是這樣一個簡單的方法一直被廣泛地成功應用。偶聯效率的定量檢測可經 A260 值測定評估，或者更精確地從偶聯介質上水解核酸和進行磷酸鹽測定。實
直鏈淀粉測定高粱籽粒直鏈淀粉含量
高粱直鏈淀粉的含量關系到流變學上的差異,并維持著高粱食品(例如:麥片粥、烤餅、面包和Risra)的特征。稻米直鏈淀粉的含量是一個很重要的參數，需要進行直鏈淀粉測定, 它用以選擇具有良好的烹調和食用品質的水稻栽培品種。水稻中直鏈淀粉的含量幅度占精米的10~30%以上。根據糊化特征可將水稻分為低、中和高
核酸親和層析法純化蛋白質實驗2
核酸親和層析實驗材料樣品蛋白質試劑、試劑盒平衡緩沖液（Tris-HClKClEDTA）非特異 DNA實驗步驟在上樣品液到核酸親和柱之前，建議首先采用其他的純化方法，如硫酸銨沉淀、離子交換或凝膠過濾層析等富集目的蛋白。這樣可以除去絕大多數的污染物，并減少非特異結合。親和層析柱一般來講是短而粗的，例如長
核酸親和層析法純化蛋白質實驗1
核酸親和柱的應用極大地促進了核酸結合調節蛋白特性的研究，這些蛋白質涉及基因表達、染色體修復和復制、基因重組等的調控。核酸結合蛋白可以結合單鏈 DNA、雙鏈 DNA 或 RNA。DNA 結合蛋白結合 DNA 可以是序列特異的，也可以是非特異的。此外，含有特異寡核苷酸的親和樹脂能用于某些酶的分離，這些酶
直鏈淀粉含量儀介紹何謂直鏈淀粉和支鏈淀粉
直鏈淀粉與支鏈淀粉都是植物中重要的組成成分，然而有很多朋友都分不清什么是直鏈淀粉 ，什么是支鏈淀粉，雖然它們讀音相差不大，但是它們卻相差很大，無論是在結構上，還是在植物中所占據的分量，都具有一定的差異性。直鏈淀粉的含量，我們可以通過直鏈淀粉含量儀進行測定。下面內容通過直鏈淀粉含量儀對直鏈淀粉與支鏈淀
GST融合蛋白純化方法
Abstract:?Many people have vented out frustration over insoluble GST-fused proteins. This is a protocol for enzymatically active soluble GST-fused pro
硫氧還原蛋白融合蛋白的表達和純化實驗
實驗材料 融合蛋白試劑、試劑盒 氨芐青霉素甘油色氨酸儀器、耗材 電泳儀培養箱搖床試管實驗步驟 1. ?將編碼目的序列的DNA片段克隆于pTRXFUS或hpTRXFUS質粒上的trxA基因3‘末端，構建符合讀框的融合基因，或者于pALtrxA-781的單一Rsr 2位點上插入短肽編碼序列。2. ?用含
硫氧還原蛋白融合蛋白的表達和純化實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒
硫氧還原蛋白融合蛋白的表達和純化實驗
實驗材料融合蛋白試劑、試劑盒氨芐青霉素甘油色氨酸儀器、耗材電泳儀培養箱搖床試管實驗步驟1. ?將編碼目的序列的DNA片段克隆于pTRXFUS或hpTRXFUS質粒上的trxA基因3‘末端，構建符合讀框的融合基因，或者于pALtrxA-781的單一Rsr 2位點上插入短肽編碼序列。2. ?用含有重組硫
重組蛋白表達的幾種常用標簽介紹
?重組蛋白表達技術現已經廣泛應用于生物學各個具體領域。特別是體內功能研究和蛋白質的大規模生產都需要應用重組蛋白表達載體。本文將簡要介紹幾個常用載體標簽及其功能和優點。一. GST標簽GST(谷胱甘肽巰基轉移酶) 標簽蛋白本身是一個在解毒過程中起到重要作用的轉移酶，它的天然大小為26KD。將它應用在原
直鏈淀粉分析儀分析高粱直鏈淀粉含量
高粱是常見的雜糧之一，在中國農業種植面積還是比較廣泛的。在以往的檢測研究結果中可以發現，210個非蠟質高粱栽培品種的直鏈淀粉含量占淀粉量的21%或28%不等。現在世界種質資源庫收集的高粱的直鏈淀粉的含量范圍尚未確定,試圖開發和應用一種自動方法以測定世界種質資源庫收集的高粱中表觀直鏈淀粉含量的變化
直鏈淀粉含量儀可降低直鏈淀粉測定成本
現在世界上的農作物，按種植面積排序是：小麥、水稻、玉米、土豆。每一種農作物所含淀粉，都有兩種分子結構：一種是直鏈的，像“一”字形，黏性小；一種是支鏈的，像“人”字形，黏性大。像紡織、造紙等行業需要黏性大的支鏈淀粉，而在人體吸收營養物質的農副產品中就需要少量的直鏈淀粉，那么就要把支鏈淀粉和直鏈淀粉分離
凝集素親和層析法純化蛋白質實驗
凝集素是能可逆性結合碳水化合物的蛋白質。因為絕大多數凝集素至少每個分子有兩個碳水化合物結合部位，所以它們可以沉淀糖蛋白和凝集細胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的親和配基，具有單糖的糖蛋白可用溫和的蛋白質冼脫條件分離。雖然凝集素親和層折沒有很高的選擇性，但是無疑它已成為蛋白質純化的一種常用方法。它通常作為
凝集素親和層析法純化蛋白質實驗
刀豆素 A 親和柱純化蛋白質 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如，刀豆素 A（Con A）與糖蛋白含有的葡萄糖
凝集素親和層析法純化蛋白質實驗
實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如，刀豆素 A（Con A）與糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖結合，而麥芽凝集素只與具 N-乙酰葡糖胺的蛋白質結合。胞膜糖蛋白常與麥芽凝集素結合，而可溶性糖蛋白卻通常用 Con A 或扁豆凝集素親和柱純化。由于在許多情