流式細胞儀檢測技術實驗
流式細胞儀（flow cytometer）是一種能夠探測和計數以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置，由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質為熒光標記物，因此，用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀，是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應用工具。流式細胞儀實驗方法原理流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。第一，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。實驗材料淋巴細胞外周血的白細胞試劑、試劑盒FACS緩沖液PBS疊氮鈉溶液儀器緩沖液FACS清潔液FACS洗凈液儀器、耗材流式細胞儀實驗步驟一、 細胞和試劑的準備1. 細胞樣品：來源淋巴細胞或外周血的白細胞。2. 熒光標記單克隆抗體：常用的有FITC（fluorescein -isothiocyanate）和PE（phycoerythrin）標記的單克隆抗體。3. ......閱讀全文
流式細胞儀檢測技術實驗
流式細胞儀（flow cytometer）是一種能夠探測和計數以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置，由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質為熒光標記物，因此，用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀，是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應用工具。流式細胞儀實驗方法原理流式細胞儀
流式細胞儀檢測技術實驗
流式細胞儀檢測技術可應用于：（1）分離和鑒定細胞群及亞群；（2）分析腫瘤細胞的DNA、RNA含量；（3）分析細胞內抗原物質。實驗方法原理流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。第一，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。實驗
流式細胞儀檢測技術實驗
流式細胞儀檢測技術可應用于：（1）分離和鑒定細胞群及亞群；（2）分析腫瘤細胞的DNA、RNA含量；（3）分析細胞內抗原物質。實驗方法原理流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。第一，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。實驗
流式細胞儀檢測技術實驗
實驗方法原理?? ?流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。*，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。實驗材料?? ?淋巴細胞外周血的白細胞試劑、試劑盒?? ?FACS緩沖液PBS疊氮鈉溶液儀器緩沖液FACS清潔液FACS洗
流式細胞儀檢測技術的實驗
實驗方法原理?? ?流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。*，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。實驗材料?? ?淋巴細胞外周血的白細胞試劑、試劑盒?? ?FACS緩沖液PBS疊氮鈉溶液儀器緩沖液FACS清潔液FACS洗
流式細胞儀檢測技術
實驗方法原理 流式細胞儀的使用一般分為三個步驟。第一，是儀器前階段，包括試劑的準備，細胞制備、細胞的熒光染色；第二，是流式細胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結果分析階段。實驗材料 淋巴細胞外周血的白細胞試劑、試劑盒 FACS緩沖液PBS疊氮鈉溶液儀器緩沖液FACS清潔液FACS洗凈液儀器、耗材
細胞凋亡檢測流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法?1）PI單染色法?方法一?1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。?2．3ml PBS洗一次。?3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。?4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。?5．400目的篩網過濾
細胞凋亡檢測：流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術?一、固定細胞的染色方法?1?）?PI?單染色法?方法一1．?收集細胞（?1?～?5?）×?106?個，?500?～?1000r/min?離心?5min?，棄去培養液。2．?3ml PBS?洗一次。3．?離心去?PBS?，加入冰預冷的?70?％的乙醇固定，?4?℃，?1h
細胞凋亡檢測流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法?1）PI單染色法?方法一?1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。?2．3ml PBS洗一次。?3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。?4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。?5．400目的篩網過濾
細胞凋亡檢測：流式細胞儀檢測技術
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術一、固定細胞的染色方法1）PI單染色法方法一1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。2．3ml PBS洗一次。3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。5．40
免疫組化專題：流式細胞儀檢測技術實驗（二）
⑤主機設定：一般是已設定好的適合測定淋巴細胞的條件，包括探測器的電壓。探測器的電壓是調空光電倍增管所能檢測熒光密度的范圍。⑥選擇檢測的波長和表達方式（plot）：如果用一種熒光抗體，一般選直方圖（histogram）；如果用兩種熒光抗體，常選點狀二維圖（dot plot）或輪廓線圖（contour
免疫組化專題：流式細胞儀檢測技術實驗（一）
標簽： 流式 細胞儀流式細胞儀（flow cytometer）是一種能夠探測和計數以單細胞液體流形式穿過激光束的細胞檢測裝置，由于在檢測中使用的細胞標志示蹤物質為熒光標記物，因此，用來分離、鑒定細胞的流式細胞儀有被稱為熒光激活細胞分類儀，是分離和鑒定細胞群及亞群的一種強而有力的應用工具。實驗方法
實驗時間_流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
流式細胞儀檢測細胞凋亡可以：鑒定細胞凋亡形態；可以準確的進行凋亡細胞的計數；可以進行特異的定性分析和定量分析。實驗原理細胞凋亡時，在細胞、亞細胞和分子水平上會發生的特征性改變，這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性。通過流式細胞儀檢測這
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞
細胞凋亡：流式細胞儀檢測實驗
實驗方法原理 實驗材料 要分析的細胞在FACS緩沖液中試劑、試劑盒 FACS緩沖液冰冷的100%乙醇（如果細胞是抗體標記的則用70%乙醇）1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙錠（PI)的PBS儀器、耗材 流式細胞儀實驗步驟 1)凋亡刺激后，從培養液中沉淀所要分析的細胞，同樣沉淀一
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
流式細胞儀檢測細胞凋亡可以： 鑒定細胞凋亡形態； 可以準確的進行凋亡細胞的計數； 可以進行特異的定性分析和定量分析。 實驗原理 細胞凋亡時，在細胞、亞細胞和分子水平上會發生的特征性改變，這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征
細胞凋亡：流式細胞儀檢測實驗
用次GoZG1 DNA峰值計算細胞凋亡 用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞 通過TUNEL組織切面中的凋亡細胞的原位雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：?1. ?細胞核的改變?由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變zui具特征性，主要包括以下幾個方面：1. 細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗protocol
40年來，流式細胞術一直由多色流式主導。 盡管Fulwyler發明的初代儀器基于庫爾特體積，但熒光在短短幾年內成為流式細胞儀主導技術。 從20世紀80年代初到現在，技術開發人員一直致力于構建能夠測量更多熒光參數（我們通常將其稱為“顏色”）的儀器。 最開始，G?hde在1968年首次發表關于熒光
流式細胞儀檢測技術操作方法
一、 細胞和試劑的準備 1. 細胞樣品：來源淋巴細胞或外周血的白細胞。 2. 熒光標記單克隆抗體：常用的有FITC（fluorescein -isothiocyanate）和PE（phycoerythrin）標記的單克隆抗體。 3. 封閉抗體：抗Fc受體抗體 4. FACS緩沖液： 1
細胞調亡的流式細胞儀檢測技術
一、固定細胞的染色方法1）PI單染色法方法一1．收集細胞（1～5）×106個，500～1000r/min離心5min，棄去培養液。2．3ml PBS洗一次。3．離心去PBS，加入冰預冷的70％的乙醇固定，4℃，1h。4．離心棄去固定液，3ml PBS重懸5min。5．400目的篩網過濾1次，500～
流式細胞儀技術
利用各種顯微鏡進行形態學觀察通常只能對細胞凋亡進行定性而不能定量。利用熒光素或者免疫組織化學方法標記凋亡細胞，則可以通過在顯微鏡下分別計數凋亡細胞數和總細胞數，計算兩者的比值而進行半定量研究。數100～200個總細胞，既費時又費力；顯微鏡下視野的不同還會造成結果的變異。流式細胞儀（flow cyto
流式細胞儀技術
測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光，經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點，當每個細胞經過焦點時，發出一束散射光/或熒光,經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器，光檢測器把散射光定量轉化成電信號，經數字轉換器進行數字化后而成整數，以調出顯示和進行分析。一、樣品的制備細
流式細胞儀實驗安全
生物學操作技術最重要的就是安全問題，在操作流程中有諸多環節存在各種安全隱患，需要謹慎操作。 （1）電安全問題：偏振板，激光供電等都是高電壓，需要特別小心。儀器內部只能由廠家人員及相關工作人員才可操作，實驗人員不得冒險操作。 （2）激光安全問題：流式細胞術的激光有相應的cover保護，不得打開
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗PI單染色法
一、基本原理其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生改變
流式細胞儀在實驗室主要用于哪些檢測
流式可以檢測的樣本很多： 細胞表面的蛋白，通過熒光抗體直接標記 細胞內部的蛋白，細胞固定，通透后再用熒光抗體識別 細胞內部的DNA含量，細胞固定，通透后加DNA染料 細胞內部鈣離子濃度，直接加鈣離子濃度熒光染料染色 細胞內部線粒體膜電位，比如JC-1，羅丹明染料 使用微球陣列，可以同
流式細胞儀檢測細胞凋亡（雙染色法）實驗步驟
一、基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞，而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色，且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗——PI單染色法
實驗方法原理主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變，包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等進行檢測。實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSPI蒸餾水乙醇儀器、耗材棕色瓶400目篩網流式細胞儀實驗步驟一、收集細胞收集細胞｛數目約（1~ 5）x106個/mL｝