在大腸桿菌中，當外源蛋白高水平表達的時候，極易形成包涵體，為蛋白純化等下游工作帶來很大的麻煩。下面是一些可以參考的有助于提高目的蛋白可溶性表達的實驗方案：1.降低蛋白合成的速度。可以通過以下方法實現： a.降低培養溫度 b.使用弱啟動子 c.使用低拷貝數的質粒表達載體 d.降低誘導物的濃度2.改變培養基。 a.培養基中加入可以幫助蛋白折疊的因子 b.加入緩沖液保持pH穩定 c.加入1%的葡萄糖，抑制lac啟動子 d.加入山梨糖醇等可以穩定蛋白天然結構的因子 e.加入乙醇， thiols and disulfides等3.與分子伴侶或折疊酶共表達。常用的分子伴侶有： GroES-GroEL DnaK-DnaJ-GrpE ClpB常用的折疊酶有： peptidyl prolyl cis/trans isomerases (PPI's) disulfide oxidoreductase (DsbA) and disulfide isomerase (DsbC) protein disulfide isomerase (PDI)4.分泌表達。使目的蛋白分泌到周質空間。周質空間的氧化性的環境有利于二硫鍵的形成，而胞內則是還原性的。周質空間有折疊酶DsbA和DsbC的存在，幫助蛋白正確折疊。周質空間很少有蛋白酶存在，不會被水解。可以使對細胞有毒性的蛋白大量存在。5.使用特定的菌株。 AD494, which has a mutation in thioredoxin reductase (trxB). Origami，a double mutant in thioredoxin reductase (trxB) and glutathione reductase (gor).6.與可溶性partner融合表達。7.表達目的蛋白的一個片段。> 70 kDa的蛋白在大腸桿菌中是很難表達的。8.體外去折疊，重新折疊。
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中國科學院院士施一公團隊解析了BAX線狀/環狀聚合物所共享的基本重復單元結構，解答了“死神”BAX究竟是如何讓細胞走上死亡命運的不歸路。6月27日，相關研究成果發表在《科學》。BAX多邊形結構。課題組......
澳大利亞沃爾特和伊麗莎霍爾醫學研究所團隊在對抗帕金森病的斗爭中取得重大突破：他們成功解開了一個長達數十年的謎團，確定了人類PINK1蛋白與線粒體結合的具體結構，為開發治療帕金森病的新藥開辟了新道路。這......
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過去幾年里，單細胞蛋白質組學技術取得了長足發展，單細胞蛋白質組學逐漸走向成熟，后續有望廣泛應用于腫瘤異質性分析、免疫學研究、發育生物學、神經科學以及精準醫學等領域。然而，從技術發展成熟到實際場景應用分......
記者20日從西湖大學獲悉，該校未來產業研究中心、生命科學學院、西湖實驗室盧培龍課題組首次實現跨膜熒光激活蛋白的從頭設計，這也是首個通過人工設計得到的、能夠精確結合特定小分子的跨膜蛋白。相關研究成果當天......
水稻是重要的主食來源。真菌Magnaportheoryzae引起的稻瘟病是水稻的嚴重病害。有研究發現，抗病受體NLR類蛋白在植物免疫調控中發揮重要作用，并在分子抗病育種中得到廣泛使用。而NLRs介導的......
新加坡國立大學Morinaka,BrandonI.團隊報道了具有獨特的結構褶皺，并催化環烷形成和β-羥基化的融合自由基SAM和αKG-HExxH結構域蛋白。相關研究成果發表在2024年9月18日出版的......
美國斯坦福大學StevenM.Banik研究團隊發現通過蛋白運輸耦合的靶向蛋白重定位。相關論文于2024年9月18日在線發表在《自然》雜志上。研究人員識別了一組具有強效配體的轉運蛋白，這些配體適合于納......
南京醫科大學生殖醫學與子代健康全國重點實驗室鄭科教授和郭雪江教授與南京醫科大學基礎醫學院神經生物學系林明焰副教授及中南大學譚躍球教授等團隊合作，在Science期刊發表了題為：TheLandscape......