目前實時定量PCR作為一個極有效的實驗方法,已被廣泛地應用于分子生物學研究的各個領域。
實時熒光定量PCR 技術的主要應用:
DNA或RNA 的絕對定量分析:包括病原微生物或病毒含量的檢測,轉基因動植物轉基因拷貝數的檢測,RNAi 基因失活率的檢測等。
基因表達差異分析:例如比較經過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學處理等 ),特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA 芯片或差顯結果的確證。
QPCR的英文
全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統,簡稱QPCR。
在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。