酸性磷酸酶的顯示實驗
實驗方法原理 Gomori硝酸鉛改良法是根據:以磷酸酯為底物,其被磷酸酶水解后釋放出磷酸基,在pH5左右和鉛鹽結合成磷酸鉛鹽,但磷酸鉛無色,須經硫化銨作用使其變成棕黃色至棕黑色的硫化鉛沉淀。實驗材料 427細胞試劑、試劑盒 丙酮乙醇Gomori硝酸鉛作用液甲基綠硫化銨儀器、耗材 溫箱冰箱顯微鏡乳頭吸管實驗步驟 1. 將培養的427細胞在冷丙酮或95%乙醇中固定15~30分鐘。2. 待片干燥。3. 移入已預熱(37℃)的作用液中孵育2小時。4. 蒸餾水洗。5. 移入2%醋酸酸化1分鐘,蒸餾水快速漂洗。6. 移入1%硫化銨1分鐘,自來水漂洗數次。7. 必要時用甲基綠復染。8. 酸性磷酸酶活性結構呈棕黃色至棕黑色。對照:在處理過程中,在作用液中不加入甘油磷酸鈉而加入蒸餾水,則呈陰性。......閱讀全文
酸性磷酸酶的顯示方法(Comori法)
一、實驗目的1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。2. 觀察酸性磷酸酶在細胞內的分布狀況。二、實驗原理酸性磷酸酶能分解磷酸脂而釋放出磷酸基,在PH5.0 的環境中,磷酸基能與鉛鹽反應形成磷酸鉛。但因其是無色的,所以再經過與硫化銨作用,形成棕黑色的硫化鉛沉淀,由此就能顯示酸性璃酸酶在細胞內的存在
臨床化學檢查方法介紹酸性磷酸酶
酸性磷酸酶介紹: 酸性磷酸酶主要分布于前列腺、肝、脾、乳汁、紅細胞、血小板及骨骼等。以前列腺含量最為豐富。酸性磷酸酶正常值: 血清2.2-10.5U/L。酸性磷酸酶臨床意義: 增高:前列腺癌,特別是有轉移時,血清酸性磷酸酶可明顯增高。變形性骨髓炎、原發性骨腫瘤、甲狀腺功能亢進、白血病、乳腺癌、
血清酸性磷酸酶的臨床意義
ACP測定主要用于前列腺癌的輔助診斷。 (1) 前列腺癌:尤其是轉移癌ACP明顯升高。PAP對前列腺癌的診斷較ACP敏感,二者對晚期前列腺的診斷、療效觀察及預后監測價值更大。 (2) 血液病:粒細胞白血病、高雪病、尼曼匹克病、原發性血小板減少性紫癜、溶血性貧血等ACP活性亦增高。 (3)
酸性磷酸酶的顯示方法實驗步驟
實驗試劑1. 10%中性福爾馬林(pH6.8~7.1)甲醛 10ml 蒸餾水 90ml 醋酸鈉 2g2. 酸性磷酸酶作用液蒸餾水 90ml 0.2mol/L醋酸緩沖液(pH4.6) 12ml 5%硝酸鉛 2ml3. 2%β—甘油磷酸鈉 4ml先將蒸餾水和醋酸緩沖液混合,隨后分成大致相等的兩份,一份中
簡述酸性磷酸酶的基本性質
誘導并分泌酸性磷酸酶是植物應對低磷環境的重要適應性反應之一。酸性磷酸酶可以從不同的有機磷底物上水解磷酸基團,供植物吸收利用。大多數的植物酸性磷酸酶沒有明顯的底物特異性,可以水解的底物包括 RNA、DNA、3-磷酸甘油酸、磷酸己糖等。體外實驗中,從擬南芥、番茄中純化的酸性磷酸酶的酶活力都受到了緩沖
生化檢測項目血酸性磷酸酶染色介紹
酸性磷酸酶染色介紹: 大部分血細胞內均存在酸性磷酸酶活性,胞質內的酸性磷酸酶在酸性條件下,經水解,再與硝酸鉛、硫酸胺作用,可生成棕黃色或棕黃色的硫酸鉛沉淀。酸性磷酸酶染色正常值: 陽性:粒細胞、T淋細胞、漿細胞、巨核細胞、血小板、幼紅細胞和單核-巨噬系統細胞。酸性磷酸酶染色臨床意義: 酸性磷酸
酸性磷酸酶染色的原理與結果判斷
(1)原理:血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下,將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解,釋放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI與六偶氮付品紅偶聯,形成不溶性紅色沉淀,定位于胞質內,如果血細胞的胞質呈紅色為陽性反應,無紅色為陰性反應。 抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制備2份基質液,一份再加入適量L-酒石
關于血清酸性磷酸酶的注意事項
(1) 血清和肝素抗凝血漿結果相似,草酸鹽抗凝血漿結果偏低。 (2) 血清要及時分離,標本不能溶血,否則測定結果偏高。 (3) 標本在較高溫度和堿性環境中極不穩定,如不能及時測定應將血清冰凍或酸化后置冰箱保存,可穩定1周。血清酸化方法:1ml血清加50μl 5mol/L醋酸鹽緩沖液,可
關于血清酸性磷酸酶的臨床意義
ACP測定主要用于前列腺癌的輔助診斷。 (1) 前列腺癌:尤其是轉移癌ACP明顯升高。PAP對前列腺癌的診斷較ACP敏感,二者對晚期前列腺的診斷、療效觀察及預后監測價值更大。 (2) 血液病:粒細胞白血病、高雪病、尼曼匹克病、原發性血小板減少性紫癜、溶血性貧血等ACP活性亦增高。 (3)
簡述酸性磷酸酶染色的臨床意義
酸性磷酸酶染色能幫助鑒別戈謝細胞(呈陽性反應)及尼曼-皮克細胞(呈陰性反應);紅血病及紅白血病時幼紅細胞呈核旁單側陽性反應;多發性骨髓瘤細胞、急性單核細胞性白血病、惡性組織細胞增生癥細胞、多毛細胞白血病、T淋巴細胞性白血病等均呈強陽性反應。
臨床化學檢查方法介紹酸性磷酸酶染色
酸性磷酸酶染色介紹: 大部分血細胞內均存在酸性磷酸酶活性,胞質內的酸性磷酸酶在酸性條件下,經水解,再與硝酸鉛、硫酸胺作用,可生成棕黃色或棕黃色的硫酸鉛沉淀。酸性磷酸酶染色正常值: 陽性:粒細胞、T淋細胞、漿細胞、巨核細胞、血小板、幼紅細胞和單核-巨噬系統細胞。酸性磷酸酶染色臨床意義: 酸性磷酸
酸性磷酸酶染色的原理與結果判斷
(1)原理:血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下,將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解,釋放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI與六偶氮付品紅偶聯,形成不溶性紅色沉淀,定位于胞質內,如果血細胞的胞質呈紅色為陽性反應,無紅色為陰性反應。 抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制備2份基質液,一份再加入適量L-酒石
比色法測定酸性磷酸酶生理變異
男、女性血中ACP含量無差異,新生兒ACP活性與成人相似,出生后1個月中血清酶活性甚高,然后隨年齡的增長而逐漸下降,青春期又可出現一活性峰值,至20歲降至成人水平。
臨床化學檢查方法介紹血清酸性磷酸酶介紹
血清酸性磷酸酶介紹:???????? 酸性磷酸酶(ACP)是一組最適pH低于7的磷酸酶,在pH5時活性最強,能水解各種正磷酸單酯。ACP存在于多種組織和體液中,如前列腺、肝、脾、腎、紅細胞、血漿、乳汁、唾液等,健康男性血清中ACP約1/3-1/2來源于前列腺。ACP測定主要是比色法。血清酸性磷酸酶正
關于酸性磷酸酶染色的注意事項介紹
酸性磷酸酶染色,必要時加做L-酒石酸抑制試驗,即為酸性磷酸酶染色被酒石酸抑制;反之則不被酒石酸抑制,產生不溶性紅色沉淀,定位于胞質內。這對鑒別診斷多毛細胞白血病有重要意義(L-酒石酸抑制試驗仍呈陽性),而多發性骨髓瘤細胞,急性單核細胞性白血病細胞、惡性組織細胞增生癥細胞均可被L-酒石酸所抑制,陽
精漿酸性磷酸酶測定(ACP)參考值
80~1000U/ml(速率法);>200U/1次射精 (β-硝基酚法)。
臨床化學檢查方法介紹精子酸性磷酸酶介紹
精子酸性磷酸酶介紹: 精子酸性磷酸酶活性升高與細胞受損的程度呈正相關。精子酸性磷酸酶正常值: 4-20單位。精子酸性磷酸酶臨床意義: 異常結果:精子酸性磷酸酶增高,可導致前列腺炎。各種因素引起的炎癥會使精子酸性磷酸酶降低。 需要檢查的人群:患有前列腺炎和各種炎癥的患者,或者不育患者。精子酸性
酸性磷酸酶染色的原理及臨床意義
酸性磷酸酶染色的原理與臨床意義: (1)原理:血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下,將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解,釋放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI與六偶氮付品紅偶聯,形成不溶性紅色沉淀,定位于胞質內,如果血細胞的胞質呈紅色為陽性反應,無紅色為陰性反應。抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制備2
細胞增殖的檢驗方法:酸性磷酸酶法
酸性磷酸酶法1.96孔細胞培養板中培養細胞,去培養液。用0.01mol/L PBS洗滌1次(如為懸浮細胞則用離心洗滌)。2.去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3.37℃,孵育1~4h。4.加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。5.在多孔酶標儀上405nm處測光吸收度,將細胞培養板其中不含細
細胞增殖的檢驗方法——酸性磷酸酶法
1、96孔細胞培養板中培養細胞,去培養液。用0.01mol/L PBS洗滌1次(如為懸浮細胞則用離心洗滌)。2、去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3、37℃,孵育1~4h。4、加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。5、在多孔酶標儀上405nm處測光吸收度,將細胞培養板其中不含細胞,同樣處理
關于酸性磷酸酶的介紹和臨床意義
酸性磷酸酶主要分布于前列腺、肝、脾、乳汁、紅細胞、血小板及骨骼等。以前列腺含量最為豐富。酸性磷酸酶(acid phosphatase EC3.1.3.2)是一種在酸性條件下催化磷酸單酯水解生成無機磷酸的水解酶。人血清酸性磷酸酶的最適pH為5~6,最適作用溫度37℃。 臨床意義 前列腺癌,特別
比色法測定酸性磷酸酶參考值
成人總酶活性為0~9U/L, 前列腺酸性磷酸酶為0~3U/L(連續監測法)。
比色法測定酸性磷酸酶(ACP)的方法
1.方法(1)麝香草酚酞比色法:該方法目前已少用。(2)連續監測法:α-磷酸萘胺在酸性條件下被ACP水解為α-萘酚和磷酸,α-萘酚再和固紅TR鹽反應生成穩定的重氮化合物。通過測定在405nm吸光度的變化速率來計算ACP的活性。前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制,血清加入酒石酸后可測得非前列腺酸性磷酸酶活
比色法測定酸性磷酸酶(ACP)的方法
1.方法 (1)麝香草酚酞比色法:該方法目前已少用。 (2)連續監測法:α-磷酸萘胺在酸性條件下被ACP水解為α-萘酚和磷酸,α-萘酚再和固紅TR鹽反應生成穩定的重氮化合物。通過測定在405nm吸光度的變化速率來計算ACP的活性。 前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制,血清加入酒石酸后可測得非前
抗酒石酸酸性磷酸酶染色臨床意義
【臨床意義】 酸性磷酶(ACP)與細胞許多生理功能和病理變化有關。用聚丙酰胺凝膠電泳證明,血細胞的ACP,由7種同工酶組成(ACP、0、1、2、3、3b、4、5、)。在某些血液病時,同功酶的出現與疾病特點和占優勢的細胞類型有關。1970年發現毛細胞胞漿里含有一種能對抗酒石酸抑制作用的ACP,經證明
生化檢測項目血清酸性磷酸酶同工酶介紹
血清酸性磷酸酶同工酶介紹: 酸性磷酸酶(ACP)有20種同工酶,臨床測定的同工酶大致為兩大類,一為前列腺酸性磷酸酶(PAP),是體內活性最高的一種酸性磷酸酶同工酶,另一類為非前列腺酸性磷酸酶。測定前列腺酸性磷酸酶的方法較多,有化學法、放免法、免疫沉淀法、對流免疫電泳和電泳法等,非前列腺酸性磷酸酶一
血清酸性磷酸酶同工酶的注意事項
(1) 比色法: ① 基質液中不應含游離酚,如空白管顯紅色,則說明磷酸苯二鈉已分解,應重新配制。 ② 鐵氰化鉀應避光保存,顯藍色則失效。加入后應迅速混勻,以充分顯色。 ③ 溶血及黃疸血清應做自身對照管,以清除誤差。 (2) 連續監測法: ① 應空腹采血。高脂飲食可使小腸合成ALP增高,
比色法測定酸性磷酸酶的臨床意義
臨床血清ACP測定主要用于前列腺癌的輔助診斷及療效觀察指標。前列腺癌,特別是有轉移時,血清ACP可明顯升高,前列腺酸性磷酸酶更有意義。溶血性疾病、變形性骨炎、急性尿潴留及近期作過直腸檢查者,此酶亦可輕度增高。由于血清ACP酶活性極不穩定,活性測定的應用漸趨稀少。
比色法測定酸性磷酸酶的臨床意義
臨床血清ACP測定主要用于前列腺癌的輔助診斷及療效觀察指標。前列腺癌,特別是有轉移時,血清ACP可明顯升高,前列腺酸性磷酸酶更有意義。 溶血性疾病、變形性骨炎、急性尿潴留及近期作過直腸檢查者,此酶亦可輕度增高。 由于血清ACP酶活性極不穩定,活性測定的應用漸趨稀少。
精液酸性磷酸酶的注意事項及檢查過程
注意事項 1、紅細胞中酸性磷酸酶活性約比血清中高100倍,故標本不可溶血。甲醛可抑制紅細胞中的酸性磷酸酶活性,但前列腺酸性磷酸酶不受影響,故可加 37%~40%甲醛處理(在緩沖-基質混合液中處理)后若酸性磷酸酶仍很高,表示這種酸性磷酸酶可能來自前列腺(甲醛配法:取市售37%~40%甲醛 50m