關于活性氧分子熒光探針標記法的應用介紹
眾所周知，氧氣是生命運動過程中不可缺少的一種氣體,而細胞使用氧氣時會產生副產品，以高能氧氣分子形式存在的廢棄物質即為自由基。自由基會對人體組織和細胞結構造成損害，我們把這種損害稱為氧化應激，人體在利用氧氣過程中會加重自身的壓力。活性氧(ROS)是含有氧的化學活性分子，ROS是需氧細胞在代謝過程中產生的一系列活性氧簇（ReactiveOxygenSpecie），包括：O2·-、H2O2及HO2-·以及-OH等。 目前研究發現ROS可雙向調控某些腫瘤細胞的凋亡和增殖，并發現了自由基與細胞信號轉導之間的內在關聯。例如DNA損傷，以前的研究表明癌細胞要比正常的細胞積累著更多的ROS，而且癌細胞中水平增高的ROS一直被認為一件不好的事情，促進細胞中DNA損傷、遺傳不穩定性和藥物抗性。 目前細胞內ROS含量水平通常采用化學發光法、紫外-可見吸收分光光度法、熒光光度法、電子自旋探針以及選擇性電極法等。目前較為普通的方式......閱讀全文
關于熒光Ⅹ射線分析的應用介紹
現代X射線熒光光譜分析儀由以下幾部分組成：X射線發生器（X射線管、高壓電源及穩定穩流裝置）、分光檢測系統（分析晶體、準直器與檢測器）、記數記錄系統（脈沖輻射分析器、定標計、計時器、積分器、記錄器）。不同元素具有波長不同的特征X射線譜，而各譜線的熒光強度又與元素的濃度呈一定關系，測定待測元素特征X
關于酶標記法的基本信息介紹
酶標記法：酶與抗體交聯，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為：將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（一）
如何免除活細胞標記中的清洗（washout）步驟？SNAP-tag等標記方法為活細胞顯微成像帶來了革命性的變化，也因此被Nature雜志評為2004年最熱門的科研技術之一。但是傳統的SNAP-tag標記仍然有很大的缺陷。將帶有熒光探針的底物BG加入細胞后需要多次清洗細胞，才能將未結合的BG去除從而消
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（二）
圖5.EGFR在細胞中轉運的實時記錄。（a）示意圖，用于解釋如何利用FAPL探針來實時追蹤EGFR相關的細胞膜轉運過程。（b）COS7細胞中表達的EGFR用DRBG-488標記（綠色），溶酶體用lysosometracker（紅色）標記。（c）對表達SNAP-EGFR–CFP的MDCK細胞進行共聚焦
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（四）
熒光顯微鏡在研究活細胞中蛋白質分子的定位、相互作用及動力學等生命活動中起著不可或缺的作用。將熒光蛋白如綠色熒光蛋白和目的蛋白融合表達，然后利用熒光蛋白發出的特異性熒光來觀察和追蹤目的蛋白分子在科學研究中得到了廣泛的應用。但是熒光蛋白具有量子產量低、成熟速度受限、光譜容易受到環境因素影響及容易形成聚集
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（五）
SNAP-tag技術在STED超高分辨率顯微成像中的應用近十年中，顯微成像技術得到了飛躍的發展，填補光學顯微鏡（~200 nm）到電子顯微鏡（~0.1 nm）分辨率缺口，打破光學衍射極限的超高分辨率顯微鏡也越來越趨于成熟化。其中，德國馬普研究所的Stefan Hell教授憑借其研發的受激發射
活細胞熒光成像的新型標記法及其在STED中的應用（三）
細胞骨架如微管、微絲等一直是生命科學研究的重點。近期Johnsson等科學家將SiR直接標記于與微管和微絲分別特異性結合的小分子docetaxel和jasplakinolide，即形成SiR-tubulin和SiR-actin，實現了在不對細胞或組織進行任何轉染或基因組修飾的條件下直接進行活細胞成像
RNA探針技術的應用介紹
這類RNA探針主要用于研究目的，而不是用于檢測。例如，在篩選逆轉錄病毒人類免疫缺陷病毒（HIV）的基因組DNA克隆時，因無DNA探針可利用，就利用HIV的全套標記mRNA作為探針，成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉錄分析（nuclear run on transcrip－tion
改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基，再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯，在標記前先用2，4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后，再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。 (1) 取HRP 5mg溶
免疫電鏡膠體金標記法（簡稱金標法）
1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)（1）超薄切片厚50～70nm左右，載于200～300網孔的鎳網上；（2）滴1%的H2O2液1滴于蠟板上，將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h；（3）雙蒸水洗3次，每次10分鐘。第1、2次洗法如（2），浮于液面上，第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗，水流
實時熒光定量－PCR－所用熒光探針及功能介紹
應用于實時定量 PCR 檢測體系中的熒光探針主要有兩種:一種是 TaqMan 探針,一種是分子信標探針。Tyagi 和 Krammer(1996)首次建立了分子信標探針,在同一寡核苷酸探針的5'端標記熒光素、3'端標記淬滅劑(DABCYL)分子信標探針能形成發夾結構,探針的嚕撲環(L
關于熒光抗體技術的應用相關介紹
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體，可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光
關于無機元素的熒光分析應用介紹
在紫外線照射下能直接發射熒光的化學元素并不很多，所以對一些元素進行熒光分析時大部分采用間接測定法，這就是用有機試劑與被測定的元素組成絡合物。這些絡合物在紫外線照射下能發射出不同波長的熒光素，然后由熒光強度測定出該元素的含量。由于有機熒光試劑的品種繁多，用熒光分析可測定的元素有六十多種 。
關于綠色熒光蛋白的應用介紹
由于熒光蛋白能穩定在后代遺傳，并且能根據啟動子特異性地表達，在需要定量或其他實驗中慢慢取代了傳統的化學染料。更多地，熒光蛋白被改造成了不同的新工具，既提供了解決問題的新思路，也可能帶來更多有價值的新問題。 熒光顯微鏡：GFP和它的衍生物的可用性已經徹底重新定義熒光顯微鏡，以及它被用來在細胞生物
熒光定量PCR檢測試劑盒簡述熒光探針法的應用
熒光定量PCR檢測試劑盒簡述熒光探針法的應用熒光定量PCR檢測試劑盒的原理在于PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;P
關于活性炭過濾設備的應用范圍介紹
活性炭過濾器有效去除的雜質范圍非常廣泛。可去除由酚、石油類引起的異臭；由鐵、錳、腐殖酸或有機污染物等形成的色度濁度；部分去除COD、BOD及氯化物、芳香族化合物（苯、酚）等有機物；去除水中的重金屬離子、余氯、合成洗滌劑；去除和殺滅水中的細菌病毒及放射性致癌物質。提高出水的品質、提高設備運行可靠穩
量子點作為熒光離子探針應用的研究進展
1. 引言量子點是一種準零維納米晶粒，因其三個維度均受到量子限域，從而表現出一些獨特的光學性能，如激發波長范圍寬、發射波長范圍窄且對稱、量子產率高、熒光壽命長、光學性能穩定等優點。量子點作為熒光離子探針在離子以及小分子檢測領域引起了許多研究人員的關注并且取得了不錯的進展。離子和無機小分子與量子點之間
搖核酸的熒光探針
DNA和RNA?搖核酸的熒光探針 用于共聚焦激光掃描顯微鏡的主要有Acridine Orange(吖啶橙，AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶，PI)。兩種染料既可標記DNA又可標記RNA，如為獲得單獨的DNA或RNA分布，染色前可用RNA酶或DNA酶處理細胞。PI不能進入完整的細胞膜
熒光探針的分類檢測
常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質的定量分析外，在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術以及DNA測序上都有著廣泛的應用。 檢測熒光探針的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置（CCD）熒光成像（包括用于微區分析的激光共聚
熒光探針技術的概念
受到激發光激發后，從激發態單重態回到基態，在紫外-可見-近紅外區有特征發光，稱之為熒光。熒光性質（激發和發射波長、強度、壽命、偏振等）可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子，被稱為熒光探針。熒光探針分類很多，可以根據材料屬性分為有機和無機探針，可以根據探針尺寸分為
“DNA探針”的分類及介紹
DNA探針分為兩類:同位素標記的探針和非同位素標記的探針。同位素標記的探針通常有很高的放射比活性,雜交的靈敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物處置困難,需要特殊的儀器和設備,不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展,如酶促標記法(如生物素、地高辛標記法)和化學標記法(如熒光生物素
熒光探針有毒嗎
有毒的。在紫外-可見-近紅外區有特征熒光，并且其熒光性質可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。
同位素標記的探針和非同位素標記的探針的特點和應用
同位素標記的探針通常有很高的放射比活性，雜交的靈敏度高，但使用期限短，且有放射性危害，污染物處置困難，需要特殊的儀器和設備，不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展，如酶促標記法（如生物素、地高辛標記法）和化學標記法（如熒光生物素、酶標記法）。非同位素標記的探針保存時間較長、避免了同位素
自旋標記法的方法介紹
自旋標記 （spin label）， 很多物質的分子不表現電子自旋共振（ESR），但對這些分子，人工地使之與自由基（free radical）結合從而得以用ESR法來研究，獲得獨特的ESR信息，這就是自旋標記法。
關于探針標記方法的介紹
①缺口平移標記法。利用的是DNA聚合酶I能修復DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´；端核苷酸，同時在3´；端修復加入被標記核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對較低、比活性相對較高、標記均勻，多用于大分
關于基因探針的來源介紹
DNA探針根據其來源有3種：一種來自基因組中有關的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA，再通過逆轉錄得到的探針，稱為cDNA探針（cDNA probe）。與基因組探針不同的是，cDNA探針不含有內含子序列。此外，還可在體外人工合成堿基數不
關于基因探針的標記介紹
為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交,有必要對探針加以標記,以便在結合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發展了一些用非同位素如生物素-親合素系統、地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。最常
關于基因探針的標記介紹
為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交，有必要對探針加以標記，以便在結合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發展了一些用非同位素如生物素-親合素系統 、地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別
熒光原位雜交探針和熒光探針有什么區別 熒光原位雜交技術問世于70年代后期，其曾多用于染色體異常的研究，近年來隨著FISH所應用的探針鐘類的不斷增多，特別是全Cosmid探針及染色體原位抑制雜交技術的出現，使FISH技術不僅在細胞遺傳學方面，而且還廣泛應用于腫瘤學研究，如基因診斷基因定位等 。原
關于熒光原位雜交技術的應用介紹
該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。 FISH最初用于中期染色體。從正在分化的細胞核中制備的這種染色體是高度凝縮的,每條染色體都具有可識別的形態,它們染色后將顯現出特征性的著絲粒位置