RNA的提取和純化實驗
試劑、試劑盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇異丙醇苯酚-胍鹽單相溶液磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 離心機和轉頭移液器離心管錐形管平板勻漿器實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑氯仿焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液（用 DEPC 處理過的 H20 配制）異丙醇苯酚-胍鹽單相溶液（推薦 RNApure,GenHunterP501-P503)磷酸鹽緩沖液（PBS)2. 離心機和轉頭小離心機3. 專用設備50 ml 錐形管1.5 ml 小離心管1000ul(原文為 ml。—譯者改）移液器100~150 mm 平板P10 移液器Pdytron 勻漿器（用于從組織中提取 RNA)二、方法第一步：RNA 提取方法 1: 從組織培養物中提取 RNA1. 如果細胞貼在瓶壁或平板上，則倒掉培養基，將平板置于冰上。2. 如果細胞是懸浮的，旋轉離下細胞，并除去培養基。3. 用 10~20 ml 的冷磷酸鹽......閱讀全文
使用－Trizol－純化－RNA－實驗
實驗材料 磨細的組織試劑、試劑盒 Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑Trizol(Invitrogen)氯仿異丙醇乙醇，75%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水配制DEPC 處理過的水2. 細胞和組織50~100 mg 已磨細的組織二、方法1
使用－Trizol－純化－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 磨細的組織 試劑、試劑盒 Trizol 氯仿 異丙醇 乙醇
全血RNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶，然后用乙醇調節結合條件后，RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜， 再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂
全血RNA提取實驗
實驗材料 鮮血液試劑、試劑盒 抗凝劑紅細胞裂解液RLB去蛋白液RW1乙醇漂洗液RW儀器、耗材 制冰機離心機離心管移液槍移液管針頭注射器水浴鍋實驗步驟 一、在適合大小的RNase free離心管中加入1體積（
動物RNA提取實驗原理
RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分，也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制，已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究，首先要獲得該性狀基因，從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是至關
RNA提取實驗方法
總RNA（total RNA）和信使RNA(mRNA)的抽提（自己的總結）1、實驗目的提取人體細胞的總RNA和mRNA。?2、本實驗所需試劑1）、CNE-2細胞及培養細胞的一系列條件，2）、PBS緩沖液， TRIZOL試劑，3）、DEPC處理過的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管,4）、新的
全血RNA提取實驗
全血RNA的提取可用于：（1）研究RNA干擾機制等；（2）用作反轉錄模板；（3）分子生物學其他研究。實驗方法原理紅細胞裂解液選擇性裂解紅細胞,然后獨特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細胞和滅活細胞RNA酶，然后用乙醇調節結合條件后，RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜， 再通過一系列快
總RNA提取實驗步驟
一、細胞或組織破碎?1. ?微生物材料?（1）發酵3~4天（或對數生長期）的菌體，離心收集菌絲體（動植物材料無需此步處理）。?（2）用經DEPC處理的水洗菌絲體2~3次，并盡量除去殘存的水。?（3）加液氮充分研磨，使其成為粉末，以釋放RNA。?（4）研磨后的樣品轉移至12 ml 變性液的容器中勻漿。
mRNA的提取及純化實驗
磁珠法 親和柱層析法 親和柱層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 mRNA
mRNA的提取及純化實驗
實驗材料 mRNA試劑、試劑盒 mRNA分離試劑盒異丙醇NaAC儀器、耗材 儀器水浴離心機取液器分光光度計實驗步驟 一、生物素標記的Oligo（dT）探針與mRNA的煺火1. ?在DEPC處理過的1.5 ml Eppendof管中，加入0.2-1 mg 的總RNA和無RNase的水至終體積為0.5
動物RNA提取實驗——Trizol試劑提取法
實驗方法原理Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液，其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性，隨后加入氯仿，酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中，RNA則分布在上層的水相中，最后用異丙醇沉淀水相中的RNA，并用70
動物RNA提取實驗——SV總RNA試劑盒提取法
動物RNA提取可用于：（1）研究生物體基因調控機制；（2）分子克隆和基因表達以獲得該性狀基因；（3）可以對特定的基因表達進行定量的檢測，從分子水平精確的了解細胞生命活動的規律。實驗方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養
總RNA的提取和純化的操作規程
完整RNA 的提取和純化，是進行RNA 方面的研究工作，如Nothern雜交、mRNA 分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）
細胞質RNA提取實驗
由于RNA的種類來源很多，因而提取制備方法各異，一般有苯酚法，去污劑法和鹽酸胍法，其中苯酚法實驗室最常用。組織勻漿后用苯酚處理離心，RNA即溶于上層被酚飽和的水相中，向水相加冷乙醇后， RNA即以白色絮狀沉淀析出。此法較好除去DNA和蛋白質，且獲得生物活性的RNA。實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS細
植物總RNA的提取實驗
研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰
RNA提取實驗方法流程
總RNA（total RNA）和信使RNA(mRNA)的抽提（自己的總結）1、實驗目的提取人體細胞的總RNA和mRNA。?2、本實驗所需試劑1）、CNE-2細胞及培養細胞的一系列條件，2）、PBS緩沖液， TRIZOL試劑，3）、DEPC處理過的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管,4）、新的
細胞質RNA提取實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 PBS細胞裂解液SDS蛋白酶K酚氯仿異戊醇無水乙醇儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 1. ?對于單層培奍細胞（1）每10 cm 培養皿培養的細胞，用冰冷PBS洗滌3次。（2）每次1 ml 然后用小體積PBS刮下細胞，轉移至冰浴的離心管中。（3）300 g 離心5 min
總RNA提取實驗——CsCl法
實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞?1. ?室溫下用PBS冼滌細胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. ?在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液，并使之遍布整個平皿。3. ?用橡皮細胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的
細胞質RNA提取實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試劑、試劑盒
植物總RNA的提取實驗
實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClN
病毒RNA提取實驗方法
實驗概要本實驗旨在掌握病毒RNA提取的實驗方法，包括用異硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA、TRIzol LS提取病毒RNA及Trizol法提禽流感病毒RNA。實驗步驟1. 用異硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA1) 取200ul樣品數 陰性對照 陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管； 2) 加600u
RNA提取實驗方法流程
1、實驗目的提取人體細胞的總RNA和mRNA。 2、本實驗所需試劑 1）、 CNE-2細胞及培養細胞的一系列條件， 2）、PBS緩沖液， TRIZOL試劑， 3）、DEPC處理過的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管, 4）、新的氯仿、異丙醇和乙醇， 5）、mRNA分離
病毒RNA提取實驗方法
1，用異硫氰酸胍提取提病毒的詳細步驟，可參考（我提過N次做定量PCR都沒問題）：1.取 200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍，然后加入對照和樣品，再加200ul氯仿，顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時，另取
總RNA提取實驗——氯化鋰提取法
實驗方法原理用高濃度尿素變性蛋白并抑制RNA 酶，用氯化鋰選擇沉淀RNA ，其特別適合于從大量樣品中提取少量組織RNA ，具有快速簡潔的長處，但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高，小RNA 片斷丟失的缺陷。實驗材料微生物動物細胞植物組織試劑、試劑盒氯化鋰尿素Tris-HCLEDTASDS儀器、
從富含多糖的植物組織中提取和純化－RNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硫氰酸胍能溶解細胞并使蛋白變性. 當用于抽提緩沖液時，可產生無 RNase 的環境□組織抽提后，以中等轉速離心勻漿液，以除去小溶性多搪。用苯酚：氯仿將上清液抽提出，RNA 位于水相，DNA 和蛋白質位于苯酚相和兩相交界面
從富含多糖的植物組織中提取和純化－RNA
實驗方法原理 硫氰酸胍能溶解細胞并使蛋白變性. 當用于抽提緩沖液時，可產生無 RNase 的環境□組織抽提后，以中等轉速離心勻漿液，以除去小溶性多搪。用苯酚：氯仿將上清液抽提出，RNA 位于水相，DNA 和蛋白質位于苯酚相和兩相交界面。用乙酸鉀將位于水相的多糖選擇件的沉淀出來，然后用氯化鋰選
RNA提取心得（組織RNA提取和培養細胞的RNA提取）
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后
總RNA提取實驗——試劑盒快速提取法
總RNA提取可以：（1）獲得高純度、高質量的總RNA；（2）可以滿足生物學下游實驗Northern Blot、核酸酶保護實驗、RT-PCR、qRT-PCR 和陣列分析所需。實驗方法原理一些公司推出的總RNA 提取試劑盒，可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RN
植物總RNA的提取實驗技術
一、實驗目的 通過本實驗學習從植物組織中提取RNA的方法 二、實驗原理 RNA是一類極易降解的分子，要得到完整的 ?RNA，必須最大限度地抑制提取過程中內源性及外源性核糖核酸酶對RNA的降解。高濃度強變性劑異硫氰酸胍，可溶解蛋白質，破壞細胞結構，使核蛋白與核酸分離，失活RNA酶，所以RNA從細胞中釋
病毒RNA提取實驗方法（protocol）
1，用異硫氰酸胍提取提禽流感病毒的詳細步驟，可參考（我提過N次做定量PCR都沒問題）：1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍，然后加入對照和樣品，再加200ul氯仿，顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時，