大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定（一）
大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定 許 川1/舒為群1,/張 亮1/曹 佳2/周 新3(1.第三軍醫大學軍事預防醫學院環境衛生學教研室, 重慶 400038； 2. 第三軍醫大學軍事預防醫學院軍事毒理學教研室，重慶 400038；3. 第三軍醫大學西南醫院燒傷科， 重慶 400038) Culture and Identification of Granulosa Cells from Rat Ovary XU Chuan1, SHU Wei-qun1,, ZHANG Liang1, CAO Jia2, ZHOU Xin3(1. Department of Environmental Hygiene, School of Military Preventive Medicine, Third Military Medical University, Chongqing 400038; 2.......閱讀全文
卵巢顆粒細胞瘤的診斷方式介紹
卵巢顆粒細胞瘤是臨床特征明顯的腫瘤。患者附件發現包塊伴有明顯的雌激素刺激引起的內分泌紊亂癥狀，診斷多不困難。對于臨床癥狀不典型的患者，則要根據其年齡腫瘤大小、質地、輔助檢查等綜合材料加以分析、鑒別后，得出較準確的診斷。尚有少數患者，需術中冰凍病理檢查得以確診。 在腫瘤標記方面，血漿抑制素抗
卵巢顆粒細胞瘤的病因及病理
病因到目前為止，顆粒細胞瘤的發病原因尚不清楚。但研究發現97%的顆粒細胞瘤在FOXL2中存在一類完全相同的基因缺陷（DNA復制錯誤），但這類突變不會遺傳給后代。很多研究推定此為顆粒細胞瘤的病因。病理對成人型顆粒細胞瘤中，腫瘤多數為單側性，雙側性占5%至10%，直徑平均為12cm；呈囊性、實性或兩者兼
細胞技術專題：大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗－一
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養可以：（1）應用于血腦屏障的研究；（2）腦血管疾病的病理生理及分子生物學研究；（3）新藥篩選；（4）腦微血管內皮細胞生理生化及藥理學研究。實驗方法酶消化法 實驗方法原理丁香園站友參考文獻采用以大腦皮質為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養,，成功地摸索出大鼠
原代培養與傳代培養知識
原代培養:即第一次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義： ●培養物一經接種到培養器皿（瓶）中就不在分割，任其生長繁殖； ●原代培養中的“代”并非細胞的“代”數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞； ●原代培養過程
原代細胞的培養與建系2
（四）骨髓、羊水、胸/腹水細胞取材取上述標本時，除嚴格無菌，注意抗凝外，還要盡快分離培養，一般無需其他處理，離心后，用無鈣、鎂PBS洗兩次，再用培養液洗一次后即可培養，不宜低溫存放。具體操作詳見后面有關章節。（五）動物組織取材1、鼠胚組織取材首先用引頸或氣管窒息致死法處死孕期合適的動物，然后將其整個
原代細胞的培養與建系2
(二)原代細胞的維持???1、貼壁細胞（包括半貼壁細胞的換液）???貼壁細胞長成網狀或基本單層時，由于營養缺乏，代謝產物增多，pH變酸，不適宜細胞生長，此時細胞還未長成單層，未達到飽和密度，仍需繼續培養，因此，需采取換液方式來更新營養成分以滿足細胞繼續生長繁殖的需要。其換液方法比較簡單，即棄去舊液，
原代細胞的培養與建系3
下面為美國標準細胞庫或細胞銀行（ATCC）入庫細胞的基本要求：???（1）培養簡歷?組織來源日期、物種、組織來源、性別、年齡、供體正常或異常健康狀態，細胞已傳代數等。???（2）凍存液?培養基和保護劑名稱。???（3）細胞活力?凍融前后細胞接種存活率和生長特性(生長繁殖曲線，分裂指數等)。???（4
原代細胞的培養與建系1
細胞的來源多樣，培養方法也各不相同，凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20代以上的細胞可確立為細胞系。若有條件能開展單細胞克隆、純化，經大量擴增
原代細胞的培養與建系3
（二）消化分離法組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易
原代細胞的培養與建系4
4.軟瓊脂克隆分離法???本法僅適用于懸浮培養的類淋巴細胞或惡性程度高的貼壁細胞，而正常貼壁細胞在軟瓊脂中不能形成克隆。???（1）將對數生長期的細胞制成單個細胞懸液(貼壁細胞用0.25%胰蛋白酶消化使之分散成單個細胞)作活細胞計數。調整細胞濃度至1×106細胞/L，然后根據實驗要求再作梯倍稀釋。通
原代細胞的培養與建系1
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??原代細胞的培養與建系???細胞的來源多樣，培養方法也各不相同，凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20
原代細胞的培養與建系5
三、原代細胞的培養方法原代細胞的培養也叫初代培養 是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養，是建立細胞系的第一步，是一項基本技術。原代細胞因剛從組織中分離開，生物學特性未發生很大變化，仍保留原來的遺傳特性，也最接近和反映體內生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。原代細胞往往有多種細胞
原代細胞的培養與建系4
（2） 膠原酶（Collagenase）消化法 ? 膠原酶是一種從細菌中提取出來的酶，對膠原有很強的消化作用。適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織，它對細胞間質有較好的消化作用，對細胞本身影響不大，可使細胞與膠原成分脫離而不受傷害。該酶分離效果好，即使有鈣、鎂離子存在仍有活性，故可用
原代細胞分離與培養方法介紹
前言 凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養，是建立細胞系的第一步，是一項基本技術。 原代細胞最接近和最能反映體內生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
原代細胞培養優點與用途？
一、優點 (1) 細胞剛離開機體，生物學性狀與原體內細胞比較接近，相比之下，細胞系的一個缺點是它們往往與原始的組織有不一樣的遺傳和表型，而原代細胞保持了細胞在體內的許多重要標志和功能。 (2) 細胞的初代培養也是建立各種細胞株（系）的必經階段。 二、原代細胞培養的臨床應用： (1) 細胞
小腦顆粒細胞的培養
實驗方法原理將 4~8 只新生鼠的小腦切成小立方塊，放入 HBSS，在 37°C 條件下用胰蛋白酶消化 15 min。將細胞接種于涂有 L-多聚賴氨酸的培養皿或培養瓶。實驗材料DMEMHBSSL-多聚賴氨酸阿糖胞苷0.025% 胰蛋白酶硅酮儀器、耗材P e tr i培養皿解剖刀解剖剪解剖鑷Paste
小腦顆粒細胞的培養
實驗方法原理將 4~8 只新生鼠的小腦切成小立方塊，放入 HBSS，在 37°C 條件下用胰蛋白酶消化 15 min。將細胞接種于涂有 L-多聚賴氨酸的培養皿或培養瓶。實驗材料DMEM ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
正常大鼠原代主動脈平滑肌細胞培養
一、實驗試劑?1、培養基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S4、染色液
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以大腦皮質為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養，成功地摸索出大鼠腦微血管內皮細胞分離和原代培養的方法，并獲得純度較高的
大鼠肝星狀細胞原代培養實驗_胰酶消化法
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以大腦皮質為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養，成功地摸索出大鼠腦微血管內皮細胞分離和原代培養的方法，并獲得純度較高的
細胞傳代培養與原代培養的區別
原代培養：即第一次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義： 1、培養物一經接種到培養器皿（瓶）中就不再分割，任其生長繁殖； 2、原代培養中的“代”并非細胞的“代”數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞； 3、原代培養過程中不分割
簡述卵巢顆粒細胞瘤的臨床表現
由于腫瘤細胞可以分泌雌激素，若腫瘤發生在青春期前兒童，多數表現為性早熟。此類性早熟為腫瘤刺激所引起，又稱假性性早熟，臨床可出現乳房增大、陰阜發育、陰毛腋毛生長、內外生殖器等異常發育，甚至出現無排卵性月經。有的還出現身高、骨齡過度超前發育。若腫瘤發生于生育期婦女，由于腫瘤分泌的雌激素引起子宮內膜增
關于卵巢顆粒細胞瘤的檢查方式介紹
1.實驗室檢查 內分泌激素測定：可以通過檢測患者血中雌激素、孕激素、睪酮、促性腺激素及尿中雌激素水平協助臨床分析及診斷。絕經后婦女受激素水平影響，陰道細胞學涂片檢查結果可顯示，該檢查簡單、易行，但對診斷可以起到極大的幫助作用。 2.影像學檢查 MRI、CT、B超等檢查方法一般都可以明確判斷
關于卵巢顆粒細胞瘤的鑒別診斷介紹
1.顆粒細胞瘤與小細胞癌、未分化癌 小細胞癌、未分化癌的瘤細胞分化差，細胞形態與顆粒細胞瘤細胞有時很相似，尤其在呈彌漫性或類似濾泡樣排列時經驗不豐富的病理醫師會做出錯誤的診斷。但顆粒細胞瘤與后兩者在臨床癥狀體征、術中探查諸方面均有較明顯的不同。 2.顆粒細胞瘤與其他類型性索間質腫瘤 最常見
細胞培養的原代培養的一般流程
原代培養是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養，也稱初代培養。嚴格地說即從體內取出組織接種培養到第一次傳代階段，但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。一般持續1一4周。此期細胞呈活躍的移動，可見細胞分裂，但不旺盛。原代培養細胞與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大
胚胎小鼠紋狀體神經干細胞分離培養鑒定_原代傳代培養
實驗材料孕13d的昆明種二級小鼠試劑、試劑盒胎牛血清青霉素鏈霉素胰酶阻斷劑葡萄糖臺盼藍蔗糖酚紅磷酸氫二鉀磷酸氫二鈉FITC 偶聯熒光抗小鼠二抗氯化鈉氯化鉀碘酒乙醇儀器、耗材解剖剪虹膜剪眼科剪離心機自動雙重純水蒸餾器微孔濾膜濾器培養箱體視顯微鏡無菌超凈工作臺培養瓶96孔細胞培養板24孔細胞培養板6 孔
原代細胞的培養
原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。[1] 最常用的原代細胞的培養有組織塊培養和分散細胞培養
淺談原代細胞培養的那些事（一）
一、何謂原代培養？原代培養是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養，即組織直接從機體獲取后，通過組織塊長出單層細胞，或者用酶消化或機械方法將組織分散成單個細胞開始培養，在*傳代前的培養可認為是原代培養。原代培養的過程指動物的組織或器官從機體取出后，經機械法或各種酶類（常用胰蛋白酶）和螯合劑（常用
厭氧菌的分離、培養及鑒定（一）
一 摘要： 1．1 實驗內容： 厭氧菌的分離、培養及鑒定； 1．2 目的： 1 掌握厭氧菌的分離、培養及活菌計數的一般方法。 了解厭氧菌菌鑒定的一般方法。 2 復習并鞏固平時所學的微生物知識與技能。 3 培養獨立思考、設計和動手實驗的能力。 二 介紹： 厭氧微生物在自然界分布廣泛，種類繁多，其生理作