從免疫血清純化抗體
1. 剪取一小條0.45 μm 的硝酸纖維膜,置于1.5ml eppendorf 管中,浸沒于1 ml,1 mg/ml 的抗原溶液中,5 min。2. 取出膜,置于濾紙上干燥。3. 將膜放置于裝有1 ml Buffer A 的eppendorf 管,輕輕震蕩混勻30 min。4. 移去Buffer A,用新鮮的Buffer A 洗一次,將膜浸沒于0.8-1 ml 相應的抗血清中,1-2 h,于混勻器上輕輕震蕩混勻。5. 移去血清,用PBS 洗膜,4 次,每次5 min。6. 洗脫抗體新配置100 mM 甘氨酸(pH 2.5)抗體洗脫液,將膜置于洗液中,手輕搖混勻2 min,迅速將洗液轉移至裝有100 μl 1 M Tris(pH 8.0)中和,使抗體復性。第1 次洗脫用400 μl 抗體洗脫液,第2,3 次用200 μl。7. 往洗脫下來的液體中加入100 μl Buffer A 以穩定抗體,并分裝成30 μl 每管,于-20℃......閱讀全文
蛋白純化服務
蛋白純化服務內容1、純化抗血清、免疫腹水、細胞上清得到抗體IgG或IgM純化方法免疫親和層析純化法Protein A/G親和層析法辛酸-硫酸銨沉淀法飽和硫酸銨沉淀法等2、純化重組蛋白粗品3、純化客戶天然蛋白粗品純化方法離子交換疏水分子排阻色譜法4、可用客戶提供的抗體制備免疫親和層析柱,使用免疫親和層
“純化”是什么
純化,即由多種物質的聚集體,通過物理、化學或生物方面的方法作用,變成一類或一種物質的過程。純化的方法:1、TLC 薄層制備色譜2、柱層析色譜3、HPLC高效液相色譜4、結晶
淺析的蛋白核酸分離純化儀的純化方式
蛋白核酸分離純化儀適用于分離和提純蛋白質、酶、多肽、激素、多糖、核酸類等物質。分子大小彼此相差25%的樣品,只要通過單一凝膠床就可以完全將它們分開。利用凝膠的分子篩特性,可對這些物質的溶液進行脫鹽、濃縮、去熱源和脫色。它是生物分子純化的理想選擇。它具有功能多、使用簡便、經濟等特點。小巧的設計限度地
純化DNA實驗_基因組DNA的快速純化
試劑、試劑盒尾部緩沖液蛋白酶 K儀器、耗材離心管玻璃棒實驗步驟第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L
DNA純化實驗——PCR清潔試劑盒純化法
實驗方法原理硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA,又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性,所以被分離開來。?實驗材料PCR產物試劑、試劑盒PCR清潔試劑盒儀器、耗材96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗步驟一
DNA提取純化新技術淺談——核酸電泳純化技術
核酸的提取和純化是法醫DNA物證檢驗的關鍵技術之一,目前實驗室最常用的方法包括核酸純化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系統,磁珠法由于操作簡便、快速,能夠提取到高純度的核酸DNA,并且可以自動化,因此成為目前法醫DNA實驗室核酸提取純化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN
純化RNA實驗——從培養的細胞中純化總RNA
實驗材料細胞試劑、試劑盒RNA 提取緩沖液變性液水飽和酚儀器、耗材培養皿Falcon 2063 管實驗步驟1. 取 1 個細胞已長滿的 100 ml 培養皿,吸出培養液,加 2 ml RNA 提取緩沖液,用橡膠刮棒刮下細胞。RNA 提取緩沖液:變性液,20 mlβ-巰基乙醇,0.144 ml2 mo
利用-Marligen-總-RNA-快速純化系統純化總-RNA-實驗
試劑、試劑盒 乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Rapid Total RNA System實驗步驟 一、材料1.緩沖液、溶液和試劑乙醇,70%和100%β-巰基乙醇2.特殊設備轉子-定子均化器或類似設備3.其他Marligen Rapid Total RNA
DNA純化實驗——DNA凝膠回收試劑盒純化法
DNA純化可用于:(1)獲得高純度的DNA;(2)濃縮DNA;(3)測序、遺傳信息分析等分子生物學應用。實驗方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至 8 μg DNA(70 bp-10 Kb),回收率為 60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A 溶液)中溶解,其中的保護劑能防止線狀 D
利用-Marligen-總-RNA-快速純化系統純化總-RNA-實驗
由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可從各種樣品中提取 RNA,且產量和質量非常穩定。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材轉子-定子均化器或類似設備Marligen Rap
利用-Marligen-總-RNA-快速純化系統純化總-RNA-實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 β-巰基乙醇 儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Ra
生物分離純化系統
生物分離純化系統是一種用于水產學領域的分析儀器,于2018年12月5日啟用。 技術指標 系統泵:雙泵四泵頭,每個泵頭都有獨立除氣閥,每個泵后都有潤洗通路,潤洗泵的柱塞杠,延長泵的使用壽命;流速0.001-25ml/min(單泵);裝柱可以雙泵模式運行,達到0.1–50ml/min;壓力范圍0
抗體的純化實驗
抗體的純化 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用細菌胞壁蛋白的特性可以提供了一個快速、簡捷、特異、高效的抗體純化方法。這里細菌胞壁蛋白主要指蛋白 A 和蛋白 G,它們分別從
核酸純化的原理
核酸抽提與純化是分子生物學試驗的基礎,核酸純化方法是影響提取核酸質量高低的zui重要因素,也是下游分子生物學試驗成敗的關鍵。核酸純化的方法及原理如下:一、PC抽提法PC 抽提是去除蛋白質有效的手段,但超過了該飽和度,裂解體系中的蛋白質不會被一次去除,必須靠多次抽提,方可徹底去除。且每次抽提都會損失部
PCR-產物純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 TE 或去離子水 PCR 產物 儀器、耗材 離心機和轉子 PCR 濾 件
酶的純化方法
在食品加工過程中使用的酶究竟要達到怎樣的純度主要取決于這樣的考慮:一種酶制劑是否含有其他的酶或組分。一種食品級酶制劑必須符合食品法規,但不要求是純酶,它可以含有其他的雜酶,當然還含有各種非酶的組分。這些雜酶和非酶組分對于食品加工可能會帶來有益的或有害的作用。例如,用于澄清果汁的果膠酶往往是從霉菌粗提
分離純化的流程
粉碎:將樣品進行破碎,研磨提取:這與我們的篩分差不多,就是在破碎之后,提取符合顆粒大小要求的樣品,可以理解為取樣。分離:這就要看你們所作的什么實驗。大部分是分離樣品中的雜質。就相當于提純。鑒定:也就是分析了。分析樣品成分呀,化學性質什么的。
分離純化的流程
粉碎:將樣品進行破碎,研磨提取:這與我們的篩分差不多,就是在破碎之后,提取符合顆粒大小要求的樣品,可以理解為取樣。分離:這就要看你們所作的什么實驗。大部分是分離樣品中的雜質。就相當于提純。鑒定:也就是分析了。分析樣品成分呀,化學性質什么的。
蛋白純化的原則
蛋白純化要利用不同蛋白間內在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質的污染,而利用各蛋白質的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。?蛋白的純化大致分為粗
痘苗病毒純化實驗
實驗方法原理 對于很多研究,部分純化的病毒就足夠了(進行到本實驗步驟 14), 如果是純化 MVA 病毒,則不能用胰酶消化,也不能用 CEF 細胞或 BHK-21 細胞代替 HeLa 細胞。實驗材料 痘苗病毒儲液HeLa S3 細胞(懸浮培養)試劑、試劑盒 胰酶Tris ? Cl蔗糖儀器、耗材 旋轉
蛋白純化的原理
蛋白質分離純化常用方法有: 1、沉淀, 2、電泳:蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的,在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。4、層析: a.離子交換層析,利用蛋白質的兩性游離蛋白質的分離純化在生物
抗體的純化實驗
實驗方法原理 利用細菌胞壁蛋白的特性可以提供了一個快速、簡捷、特異、高效的抗體純化方法。這里細菌胞壁蛋白主要指蛋白 A 和蛋白 G,它們分別從金黃色化膿性葡萄球菌和 G 組鏈球菌分離純化。它們能特異結合到免疫球蛋白的 Fe 部分。由于它們對不同的免疫球蛋白有不同的親和力,所以應根據免疫球蛋白
核酸純化的原理
核酸抽提與純化是分子生物學試驗的基礎,核酸純化方法是影響提取核酸質量高低的重要因素,也是下游分子生物學試驗成敗的關鍵。核酸純化的方法及原理如下:一、PC抽提法PC 抽提是去除蛋白質有效的手段,但超過了該飽和度,裂解體系中的蛋白質不會被一次去除,必須靠多次抽提,方可徹底去除。且每次抽提都會損失部分核酸
質粒DNA的純化
聚乙二醇沉淀法質粒DNA氯化銫-溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA(一)聚乙二醇沉淀法提取質粒DNA1)將核酸溶液所得]轉入15mlCorex 管中,再加3ml 用冰預冷的5mol/L LiCl溶液,充分混勻,用合適轉頭于4℃下以10 000轉/分離心10分鐘。LiCl可沉淀高分子RNA。2)將上
水質純化方法簡介
無機和分析化學實驗中,根據任務及要求的不同,對水的純度要求也不同,純水分為“純水”和“超純水”。我們一般在購買純水機的過程中,常常會混淆這兩個概念,造成用戶選型困難,無故增加物資供應成本。要分清純水的類別,必須要弄清純水是怎樣產生的-即純水的制備過程。本篇文章將詳細為您介紹了離子交換法、活性碳吸附法
蛋白質純化
蛋白質的分離純化在生物化學研究應用中使用廣泛,是一項重要的操作技術。 一個典型的真核細胞可以包含數以千計的不同蛋白質,一些含量十分豐富,一些僅含有幾個拷貝。為了研究某一個蛋白質,必須首先將該蛋白質從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化出來。
細胞分離純化技術
實驗方法原理 常用來分離人外周血單個核細胞(PBMC)的分層液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分層液。Ficoll是蔗糖的多聚體,呈中性,水性高,平均分子量為400000,當密度為1.2 g/ml仍未超出正常生理性
純化柱工作原理
??? 純化柱內裝陰陽離子交換樹脂,在離子交換反應中,水中的陽離子(如Na+)被轉移到樹脂上去了,而離子交換樹脂上的一個可交換的H+轉入水中。Na+從水中轉移到樹脂上的過程是離子的置換過程。而樹脂上的H+交換到水中的過程稱游離過程。因此,由于置換和游離過程的結果,使得Na+與H+互換位置,這一變化,
水質純化方法簡介
水質純化方法簡介離子交換法? ??離子交換法是以圓球形樹脂(離子交換樹脂)過濾原水,水中的離子會與固定在樹脂上的離子交換。常見的兩種離子交換方法分別是硬水軟化和去離子法。硬水軟化主要是用在反滲透(RO)處理之前,先將水質硬度降低的一種前處理程序。軟化機里面的球狀樹脂,以兩個鈉離子交換一個鈣離子或鎂離
DNA純化的方法
DNA純化首先利用瓊膠電泳將不同分子量的DNA片段分開,將某一特定分子量區域的瓊膠切下,利用DNA extraction kit將DNA從瓊膠中溶出并濃縮.實驗材料( 6X gel-loading dye:15% Ficoll 400, 0.25% bromophenol blue,0.25% xy