淋巴細胞增殖實驗
淋巴細胞增殖法對于(1)免疫學的研究(2)淋巴細胞的T細胞,吞噬細胞等的功能研究。實驗方法原理淋巴細胞在體外經某種物質刺激,細胞代謝和形態相繼變化,在24——48h細胞內蛋白質和核酸的合成增加,產生一系列增殖的變化,如細胞變化、細胞漿擴大、出現空泡、核仁明顯、核染色質疏松等,由淋巴細胞轉變為淋巴母細胞。因此,這種淋巴細胞增殖又叫淋巴細胞轉化。據此可判斷出淋巴細胞對有關刺激的反應性與功能狀態。(1) 非抗原性刺激物:如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陸(PWM)、脂多糖(LPS),通稱促有絲分裂原。其中LPS刺激B細胞,PWM可刺激T和B細胞,PHA和ConA刺激T細胞增殖。(2) 抗原性刺激物:如結核菌素、葡萄球菌毒素、破傷風類毒素、鏈球菌激酶、腫瘤抗原、同種異型組織抗原等。實驗材料PBMC細胞懸液試劑、試劑盒RPMI-10完全培養基100ug ml的植物血凝素儀器、耗材96孔板圓底細胞培養板實驗步驟基 本 方......閱讀全文
淋巴細胞轉化實驗2
同位素摻入法淋轉試驗,較之形態學方法更為客觀、準確,重復性也好,但需一定設備條件。[實驗材料] 1.1640 培養液 2.ConA :根據ConA 的純度配制成最適濃度,一般為5-10μg/ml 。 3.脂溶形閃爍液: POPOP(1,4 雙(5-苯基惡唑基-2)苯
T淋巴細胞轉化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一
淋巴細胞轉化實驗1
[實驗原理] T淋巴細胞表面具有植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白(ConA)等非特異性有絲分裂原受體,在體內或體外遇到有絲分裂原刺激后,可轉化為淋巴母細胞,依其細胞轉化程度可測定T細胞的應答功能,稱為淋巴細胞轉化試驗。 淋巴母細胞的主要特點: (1)形態學改變:細胞體積明顯增大
T淋巴細胞轉化實驗
實驗方法原理T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一。?淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法和同位素法三種。
方案18.3-細胞增殖的密度限制實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞在無限制培養基中培養,生長至包和密度。用放射自顯影測定 3 H-胸腺嘧啶脫氧核苷標記細胞的百分比。 實驗材料 傳代用的細胞
關于免疫增殖病實驗診斷的簡介
免疫增殖病是機體免疫系統的免疫器官、免疫組織或免疫細胞異常增生所致機體免疫紊亂和障礙的一組疾病,包括多發性骨髓瘤、重鏈病、巨球蛋白血癥、輕鏈病等。這種失控的異常增生是一種免疫病理狀態。其重要的臨床表現之一為免疫球蛋白數量和功能的異常,免疫增殖病實驗診斷通過檢測這些異常的免疫球蛋白等幫助臨床診斷免
細胞增殖檢測:MTT實驗經驗總結
MTT分析法以活細胞代謝物還原劑3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑藍為基礎。MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,可作用于活細胞線粒體中的呼吸鏈,在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用
T、B淋巴細胞分離實驗
淋巴細胞主要分T淋巴細胞和B淋巴細胞兩大亞群,它們具有不同的特性和功能,用于(1)免疫學研究(2)淋巴細胞的鑒定。實驗方法原理淋巴細胞與用溴花二氨基異硫氫化物(簡稱AET)處理的綿羊紅細胞(SRBC)混合后,其中全部T淋巴細胞均能吸附AET-SRBC,形成牢固穩定而巨大的E-花環,較正常未處理的SR
混合淋巴細胞培養實驗
混合淋巴細胞培養(MLC)或稱混合淋巴細胞反應(MLR)以往為用于器官移植前的組織配型,以測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由于MLC中淋巴細胞接受同種異型抗原的刺激而發生活化、增殖,產生種類眾多的細胞因子,促進NK、LAK和CTL等殺傷細胞的分化,因此MLC又是免疫調節研究
T、B淋巴細胞分離實驗
實驗方法原理 淋巴細胞與用溴花二氨基異硫氫化物(簡稱AET)處理的綿羊紅細胞(SRBC)混合后,其中全部T淋巴細胞均能吸附AET—SRBC,形成牢固穩定而巨大的E—花環,較正常未處理的SRBC形成的E—花環百分比為高,而且形成快速,不易脫落,重復性好。再經淋巴細胞分層液分離時,AET—E花環易沉于管
混合淋巴細胞培養實驗
實驗方法原理 兩個無關個體功能正常的淋巴細胞在體外混合培養時,由于HLAⅡ類抗原不同,可相互刺激對方的T細胞發生增殖,此外雙向混合淋巴細胞培養(two way MLC);若將其中一方的淋巴細胞先用絲裂酶C處理或射線照射使之細胞中DNA失去復制能力,但仍能刺激另一方淋巴細胞發生轉化,稱為單向混
cck8細胞增殖實驗需要避光嗎
CCK-8是一種基于WST-8的檢測細胞增殖和細胞毒性的方法。WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。
肺炎支原體菌落觀察實驗_增殖培養
實驗步驟肺炎支原體在營養豐富的固體培養基上增殖多代后,在低倍鏡下觀察,其菌落呈"荷包蛋"樣,菌落中心部分長入培養基中,且較致密,周邊環繞扁平,透明的顆粒區。若用姬姆薩染色,中間著色深,四周較淺。
cck8細胞增殖實驗需要避光嗎
CCK-8是一種基于WST-8的檢測細胞增殖和細胞毒性的方法。WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。
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CCK-8是一種基于WST-8的檢測細胞增殖和細胞毒性的方法。WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。
細胞增殖生長方面實驗_細胞計數法
實驗方法原理細胞計數法:細胞計數法是測定細胞絕對增長數值常用最簡便的方法。一般過程為接種21 孔/24 孔板細胞(如用培養瓶時則21 瓶)。分7 組,每組3 孔(或瓶),培養一周,期間逐日檢測一組,計數。把7天中的細胞數值繪成圖,即為細胞生長曲線。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶儀器、耗材培養瓶恒溫
細菌增殖曲線的測定實驗——比濁法
實驗方法原理將少量細菌接種到一定體積的、適合的新鮮培養基中,在適宜的條件下進行培養,定時測定培養液中的菌量,以菌量的對數作縱坐標,生長時間作橫坐標,繪制的曲線叫生長曲線。它反映了單細胞微生物在一定環境條件下于液體培養時所表現出的群體生長規律。依據其生長速率的不同,一般可把生長曲線分為延緩期、對數期、
關于免疫增殖病實驗診斷的實驗室檢查介紹
1.多發性骨髓瘤 (1)免疫學檢查:①免疫球蛋白測定:相應的單克隆IgG、IgA、lgM、IgD、IgE升高;②血、尿輕鏈測定:相應輕鏈κ或λ升高,κ/λ比值異常;③血清蛋白電泳:出現狹窄濃集的異常區帶,其區帶寬度同Alb帶大致相等或者較其狹窄,即M蛋白帶;④免疫固定電泳:免疫固定電泳不同泳道
淋巴細胞的分離和激化實驗
實驗概要本實驗從全血中收集富含白細胞的血漿,然后通過Ficoll-Hypaque離心,沉淀細胞懸于含不同細胞分裂劑的培養基中,刺激細胞生長。主要試劑1. PBS(Dulbecco): ?? 0.10g/L 無水CaCl2 ?? 0.20g/L KCl ?? 0.20g/L KHPO4 ?? 0.10
淋巴細胞的分離和激化實驗
實驗試劑1. PBS(Dulbecco):?? 0.10g/L 無水CaCl2?? 0.20g/L KCl?? 0.20g/L KHPO4?? 0.10g/L MgCl2.6H2O?? 8.00g/L NaCl?? 2.16g/L NaH2PO4.7H2O?? 調pH至7.42. 生長培養基:??
淋巴細胞的分離和激化實驗
實驗試劑1. PBS(Dulbecco):?? 0.10g/L 無水CaCl2?? 0.20g/L KCl?? 0.20g/L KHPO4?? 0.10g/L MgCl2.6H2O?? 8.00g/L NaCl?? 2.16g/L NaH2PO4.7H2O?? 調pH至7.42. 生長培養基:??
EB病毒誘導淋巴細胞實驗步驟
實驗步驟:1、EB病毒液的制備復蘇B95.8細胞株,使用培養基為10% FCS RPMI-1640逐步添加培養基至細胞長至對數生長期細胞計數,調節細胞數量為1×10^6個/ml在CO2培養箱中繼續續培養10天,中間不換液至第10天收集培養上清,1800rpm,4℃離心15分鐘0.22μm濾器過濾,1
淋巴細胞轉化試驗的實驗解釋
形態學方法:轉化率=(60.1±7.6)%T淋巴細胞在體外經植物血凝素激活后,可轉化為淋巴母細胞,根據淋巴細胞的轉化情況,可反應機體的細胞免疫水平。淋巴細胞轉化率降低表示細胞免疫水平低下,可見于運動失調性毛細血管擴張癥、惡性腫瘤、何杰金病、淋巴瘤、淋巴肉芽腫、重癥真菌感染、重癥結核、瘤型麻風等。此外
劃痕實驗為什么不是細胞增殖而是細胞遷移
細胞劃痕法是測定了腫瘤細胞的運動特性的方法之一。其借鑒體外細胞致傷愈合實驗模型,在體外培養的單層細胞上,劃痕致傷,然后加入藥物觀察其抑制腫瘤細胞遷移的能力。
EB病毒轉化成淋巴細胞實驗
實驗概要本實驗介紹了EB病毒轉化為淋巴細胞的方法。實驗材料1. 感染性EB病毒通常取自絹猴細胞系B95-8的限制培養基。該細胞系源于EB病毒感染的絹猴外周淋巴細胞,產生高滴度感染病毒。2. 全血實驗步驟1. 混合10ml全血和10ml RPMI 1640 生長培養基生長培養基 RPMI 1640 8
細胞增殖檢測
細胞增殖檢測:3H同位素滲入法實例 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源的、具有遷移能力的免疫細胞。體外培養的細胞分化能力并為完全喪
細胞增殖檢測
細胞增殖檢測:3H同位素滲入法實例 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源的、具有遷移能力的免疫細胞。體外培養的細胞分化能力并為完全喪
實驗過程中遇到的不增殖細胞有哪些?
在生物醫學實驗中,常常會用到大量的細胞進行實驗,而往往通過各種渠道得來的細胞數量都有限,無法滿足實驗過程中所需要的細胞數量,所以為了使實驗更順利的進行,科研人員往往需要前期對所需的細胞進行擴充培養,以便在后期的實驗中,可以不間斷使用。通常的細胞實驗中,很多科研人員都會根據實驗方案選擇常見的細胞,包括
做完edu細胞增殖實驗的細胞,還能做WB嗎
實驗目的是什么~檢測做完實驗的該細胞蛋白量?可以啊~反正WB也是要裂解細胞取上清蛋白制樣的~只要你目的蛋白沒降解就行~
CCK8較MTT法—測定細胞增殖/毒性實驗
CCK-8較MTT法測定細胞增殖/毒性實驗,步驟更簡便,靈敏度更高,重復性更好第一?? 從基礎操作方面對比CCK-8 方法MTT方法1還原后的甲臢物為水溶性,不需要溶解還原后的甲臢物位非水溶性的,需要有機溶劑溶解2實驗重復性好實驗重復性差3操作簡便操作繁瑣第二 從細胞培養方面對比細胞培養CCK-8方