一、目的與要求:
1、明確測定各類色素的原理與方法。
2、通過此實驗掌握紙層析定性法與提純色素的定量法。
二、原理:
聚酰胺是具有二極性的化合物,水溶性酸性染料在酸性條件下被聚酰胺吸附,而在堿性條件下解吸附,再用紙色譜法或薄層色譜法進行分離后與標準比較定性、定量。
三、試劑:
1、聚酰胺粉(尼龍6)
2、硫酸1:1 0
3、甲醇—甲酸溶液:6:4
4、甲醇
5、20%檸檬酸溶液
6、10%鎢酸鈉溶液
7、石油醚:沸程60-90℃
8、海砂:先用l:10鹽酸煮沸15min,用水洗中性,再用5%氫氧化鈉溶液煮沸15min,再于105℃干燥,貯于具玻璃塞的瓶中,備用。
9、乙醇-氨溶液:取1毫升氨水,加70%乙醇至100毫升。
10、50% 乙醇溶液
11、硅膠G。
12、PH6的水:用20%檸檬酸調節至PH 6。
13、鹽酸: 1:10
14、5%氫氧鈉溶液
15、碎瓷片:處理方法同海砂
16、展開劑
a、正丁醇-無水乙醇-1%氨水(6:2:3):供紙色譜用。
b、正丁醇-吡啶-1%氨水(6:3:4):供紙色譜用。
c、甲乙酮-丙酮-水(7:3:3):供紙色譜用。
d、甲醇-乙二胺-氨水(10:3:2):供薄層色譜用。
e、甲醇-氨水-乙醇(5:1:10):供薄層色譜用。
f、2.5%檸檬酸鈉-氨水-乙醇(8:1:2)供薄層色譜用。
17、色素標準溶液{以下商品作為標準以100%計。
胭脂紅:純度60%;莧菜紅:純度60%;檸檬黃:純度60%;靛藍:純度40%;日落黃:純度60%,亮藍;純度60%。
精密稱取上述色素各0.100克,用PH6的水溶解,移入100毫升容量瓶中并稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于1毫克商品色素。靛藍溶液需在暗處保存。
18、色素標準使用液:用時吸取色素標準溶液各5.0毫升,分別置于50毫升容量瓶中,加PH6的水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于0.1毫克商品色素。
四、儀器:
1、分光光度計
2、微量注射器或色素吸管
3、展開槽,25 X 6 x 4cm
4、層析缸
5、濾紙、中速濾紙,紙色譜用
6、薄層板:5 X 20em
7、電吹風機
8、水泵
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