一、從土壤中分離放線菌
1、制作高氏一號培養基,趁熱注入培養皿中,凝成平板,等待使用。
2、稱取土壤10克,放入裝有100毫升無菌水的錐形瓶中,并加入10%酚10滴,以抑制細菌生長。振蕩10分鐘,制成10-1菌懸液。按照連續稀釋分離法,進一步制成10-3菌懸液。
3、用移液管吸取0.1毫升10-3菌懸液,注入平板培養基上,用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻涂抹在整個培養基上。然后將培養皿倒置于25-30℃溫箱中,培養7-10天,培養基上會出現微生物菌落。如果菌落的硬度較大,干燥致密,且與基質緊密結合,不易被針挑起,這就是放線菌菌落。
4、挑取放線菌菌落,接種于斜面培養基上。
二、從土壤中分離霉菌
1、制作豆芽汗葡萄糖培養基,并添加80%乳酸數滴,以抑制細菌生長。將培養皿中,凝成平板,待用。
2、稱取10克土壤,按上述分離放線菌的方法制成10-4或10-5的菌懸液。
3、取0.1毫升菌懸液注入培養皿內培養基上,用玻璃刮刀涂抹均勻。然后將培養皿倒置于25-30℃溫箱內培養3-4天。培養基上會出現微生物菌落。霉菌菌落常長成絨狀、棉絮狀或蜘蛛網狀,可根據這一特征尋找霉菌菌落。
4、挑取培養皿內的霉菌菌落接種于斜面培養基上。
三、從飲水中分離大腸桿菌
1、制作伊紅美藍培養基,趁熱注入培養皿中,凝成平板,待用。
2、用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水,按1:10稀釋。
3、取0.1毫升稀釋液接種于伊紅美藍培養基上。用平板劃線分離法進行分離。
4、將劃線后的培養皿倒置37℃溫箱中培養18-24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落,菌落中心呈暗藍黑色,發金屬光澤。
5、將菌落接種于斜面培養基上(由營養瓊脂培養基制成)。
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