背 景:金標試紙條應用于免疫學檢驗,使許多原來操作復雜、耗時長、要求特殊儀器、結果重現性差的免疫定性項目變得快速簡便,可為實驗室節約大量的人力物力,也為病人及時診療提供便利。但是,為方便病人,一般實驗室金標試紙條測定的項目與生化項目使用同一份標本,金標試紙條本身含有復雜的化學成分,當它作外源性物質浸入血清后難免會有部分物質溶人血清,那么這些物質會不會對生化項目的測定帶來干擾呢?為此筆者對臨床實驗室常用的5種免疫試紙條對常用的25項生化測試項目的影響進行了實驗觀察,如下:
材 料:芬蘭Konelab60全自動生化分析儀。試劑:3V公司生產生化試劑,愛康公司分裝CEA、AFP、丙肝抗體、梅毒抗體、乙肝表面抗原金標免疫試紙條。
標本來源:50例正常體檢者,30例住院病人,按標準采血分離血清。
方 法:
1、每份血清分6份,其中1份直接進行常規生化項目檢測,包括K、Na、CI、Ca、P、Mg、TP、ALB、TBIL、DBIL、BUN 、CRE、UA、TG、CHo、GLU、ALP、GGT、ALT、AST、CK、CK-MB、LDH、a-HBDH、AMY,其它5份分別浸入5種金標免疫試紙條,10 min后取出試紙條并進行相同生化項目的檢測。
2、取2O份BUN 測定正常血清和1O份BUN測定異常血清,混合制成濃度為5.4,9.2,16.7mmol/L的血清,分別浸入AFP和CEA 試紙條并計時,分別于1,3,5,7,1Omin時吸出血清做生化項目檢測。
結 果:
1、比較5種試紙條浸入血清前后各生化指標變化情況,發現BUN 測定值在浸入AFP或CEA 試紙條后發生明顯改變,無論高值、正常標本均提高2倍以上,但無明顯相關規律,經t檢驗,P<0.01,有顯著性差異,而其余各項目浸入5種試紙條前后測定值比較P>0.05,均無顯著性差異。
2、在AFP、CEA試紙條浸入血清不同時間測得BUN結果,測定結果的影響自1 min時已開始引起顯著性變化,并隨時間延長影響增大,5 min后基本穩定。
結果與討論:
常用金標試紙條中CEA 和AFP對BUN 的測定有明顯干擾,在正常測試時間1 min內引起測試結果有顯著性改變(P<0.01),且隨著時間的延長干擾加重。5 min后趨于穩定,且均達兩倍以上。這說明這兩種試紙條在浸入血清后有干擾BUN 測定物質溶入了血清,既可能是一種能代替BUN參加反應的物質也可能是測定BUN反應的促進劑,具體干擾機制尚不清楚.由于各標本血清BUN含量不一致,各試紙條中這種干擾物質的含量也不盡相同,還由于標本的黏稠度不同引起的擴散速度差異等因素,使這種物質對BUN測定的干擾沒有明顯規律可循。而實際工作中金標試紙條的使用,為了不易報錯結果和減少污染等因素,一般測試報完結果后紙條就留在血清中,這樣再取標本做BUN測定,勢必得到錯誤結果。而金標試紙條正常使用時自浸入血清檢驗地帶網至出現清晰結果至少需1 min,有些弱陽性標本還需更長時間,這樣,只要金標試紙條測試與生化項目測試用同一標本,無論報告結果后是否取出試紙條,都已產生了嚴重干擾。因此,正確的使用方法是,單獨分離血清測試CEA 和AFP。測試后的血清不能用來測定BUN,若用同一標本則需保證先取標本測試BUN.隨著科學的發展,還會有越來越多的金標試紙條投入臨床免疫試驗中,我們在使用時一定要注意它們對其他項目的干擾,設計出科學合理的工作程序予以避免,才能充分發揮金標試紙條的簡便、快速、準確的優勢.