質粒DNA高頻轉化大腸桿菌實驗——高頻法

感受態細胞

質粒DNA抗生素

Ep管水浴鍋LB平板

1、取新制備的一管感受態細胞。
 

2、取0．03 ml感受態細胞轉和4 ng質粒DNA混勻，置冰浴30min
 

3、將 Ep管置于42 ℃水浴中熱沖擊2分鐘，立即置于冰上1分鐘。
 

4、在 Ep管中加70 ul LB培養基混勻，37 ℃培養30min
 

5、涂在含適當濃度抗生素的LB平板上。
 

6、37 ℃培養過夜，長出的菌斑既為陽性克隆。