評估UPLC／UV分析中的交叉污染

一、目的

為證實ACQUITY UPLC? I-Class系統對于多種樣品(包括極高濃度的樣品)均具有低交叉污染性能。

二、背景

當需要在同一次色譜分離中同時定量高濃度及低濃度的組分時所面臨的最大的挑戰是需解決樣品殘留問題。通常，為觀察低含量的與主要分析物相關的雜質，必須注射高濃度的樣品。為對分析物中的雜質進行精確分析，必須解決好分析物的樣品殘留問題，以使得不會因為低估存在于樣品中的雜質的量，從而影響雜質計算值。在進行雜質分析時，樣品濃度需達很高，且解決途徑可能頗具挑戰性。應注意稀釋液、流動相、以及清洗溶劑的組分，以使樣品殘留量較低。系統設計在解決樣品殘留問題上也具有重要作用。通常，樣品導入分析系統的方式越簡單，則越容易解決樣品殘留問題，特別是當采用注射方法導入多種疏水性及極性差異較大的化合物時。

ACQUITY UPLC I-Class系統可以輕松解決頗具挑戰性的某些相關化合物分析時的交叉污染問題。

三、解決方案

ACQUITY UPLC I-Class系統在設計上可實現低交叉污染，因而在用于分析多種相關化合物時具有極佳性能。Sample Manager的流通針式進樣(FTN)設計可帶來優化的高精度注射，并獲得極佳的樣品回收率。在等度運行期間使用梯度溶液清洗針頭的內部，且在色譜運行期間清洗針頭外部。

這樣就很好地解決了樣品殘留問題，并且不會使總注射循環時間增加。為證實使用ACQUITY UPLC I-Class系統可很容易解決樣品殘留問題，選擇性質差異較大的三種不同化合物。氯已定較粘稠，且通常非常難以完全自進樣器去除。鄰苯二甲酸二辛酯是疏水性極強的一種化合物，且需要高濃度的乙腈來使它從色譜柱上洗脫。咖啡因是親水性物質，且通常不難以從進樣器上去除，因而使其成為極佳的探針化合物，用以確定沒有樣品仍殘留于該系統中。按UV響應為1.5 AU ± 0.1 AU的濃度注射各化合物，并測定在隨后的空白注射中的樣品殘留量。如圖1所示，對所有這些化合物，均未檢測到可測得的樣品殘留量。為確定每種化合物的樣品殘留量，制備高濃度的樣品(20x至40x濃縮)，并注射至ACQUITY UPLC I-Class FTN。測定每種化合物在首次空白注射中的樣品殘留量，得知這三種性質差異較大的分析物的樣品殘留量均少于0.001%。

四、小結

解決多種分析物的樣品殘留問題的能力是一個分析系統的重要性能。不論分析物的性質為何，ACQUITY UPLC I-Class系統的設計均可產生極低的交叉污染。Sample Manager的FTN注射平臺的設計簡單、靈活，因而可簡單直觀地對方法進行優化；因而可滿足挑戰較大的應用的要求，例如分析低濃度相關化合物。