準確的血型鑒定及交叉配血是臨床安全有效輸血的重要保證。輸血配合是選擇用于受者的血液，使輸血的成分能在受者體內有效存活，無不良反應，即輸入的紅細胞在受者體內必須不凝集或不溶血，輸入的血漿成分不導致受者自身紅細胞顯著破壞，才能使受者獲得恢復健康所需的血液[1]。影響血型鑒定和交叉配血的因素很多，筆者結合工作實際就實驗過程中出現的一些問題及其對策報告如下。
1 標本和試劑因素
1.1 標本 交叉配血和血型鑒定血液標本的嚴格要求是安全輸血的關鍵性措施之一。首先要對標本進行科學管理，確保標本一一對應，其標識、血液量、紅細胞或血漿的質量符合實驗要求和受者血液的身體狀態，同時避免血樣的稀釋和溶血的產生。標本一般要求離體后盡快實驗，最長不能超過3d，每次輸血后受血者和供血者的血標本應在2℃～8℃保存7d[2]。患者的藥物使用有時也對實驗有一定影響，一般受者使用肝素治療，應用硫酸魚精蛋白對抗使標本凝結；如果受者使用右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）等治療，應注意將紅細胞洗滌。
1.2 試劑因素 血型定型試劑是做好定型的基礎。現在單克隆試劑是通過雜交瘤技術生產的，其效價、特異性、親和力都較人血清有很大進步，但試劑的運輸、貯存等條件不適可導致試劑變質失效，造成鑒定或配血錯誤。在實驗前進行試劑外觀、效價等項目質量控制。不同抗凝劑的血液制備的標準紅細胞質量也不同，各實驗室依據要求正確配制紅細胞濃度。常見的抗D試劑主要有IgM型、IgG型膠IgM+IgG型三種。
2 ABO血型鑒定和交叉配血
2.1 冷凝集素
在ABO血型鑒定和交叉配血的過程中，冷凝集素是影響ABO血型正反不符和交叉配血不合的常見原因。正常人血清中冷凝集素效價一般不高，且在4℃以下時才有活性。但由于人免疫系統的差異，在惡性腫瘤或病原體感染后有時冷反應性自身抗體可異常增高，造成溶血性貧血。這種冷凝集素效價在4℃可高于1000，用37℃生理鹽水洗滌紅細胞，操作時在37℃環境可以排除冷凝集素的干擾。
2.2 自身免疫性溶血性貧血
紅細胞被自身抗體強烈致敏后將干擾ABO定型，且自身抗體的存在會導致交叉配血不合，選擇合適的試驗方法對紅細胞上結合的抗體做放散處理，確定抗體的特異性。如果抗體屬于同種抗體，則交叉配血時應選取該抗原陰性的獻血者的血液。如果該抗體無法確定特異性，則交叉配血時要根據患者自身紅細胞與自身血清的對照反應選取較弱反應的獻血者血液，因為自身抗體的干擾而發生ABO正反定型不相符時，可用37℃～45℃生理鹽水洗滌紅細胞三次，或者用放散后的紅細胞（放散方法需不破壞紅細胞結構），血清定型則可用洗滌或放散后的紅細胞將血清中的自身抗體吸收后再進行。
2.3 弱凝集
血型試驗是抗原抗體反應，當患者紅細胞上抗原異常或血清中存在ABO血型以外的不規則抗體時，可能會導致減弱的或缺少的凝集反應。抗原異常包括：①亞型，這種亞型紅細胞抗原性較弱，可以通過亞型定型試劑來具體定型。②紅細胞抗原形成不足或敏感性降低，如新生兒、老年人及少數惡病質患者。鑒定血型時要注意正反定型的結合，加用抗H和抗A，B型標準血清、A2紅細胞等檢查唾液中的血型物質，必要時作吸收放散試驗以確定。若血清中存在不規則抗體可在反定型用O細胞加以鑒定，有些亞型因為抗原的某些位點缺失，也會產生相對于缺失抗原位點的抗體，這些抗體的產生有助于亞型的判定。
2.4 細菌性凝集
常見有類B凝集，A型或O型病人因大腸桿菌O86感染，從而使紅細胞上獲得類B抗原，能與抗B抗體發生凝集，表現為B 或AB型。其不受溫度影響，病情好轉類B凝集即消失。另外紅細胞被細菌或細菌酶污染，紅細胞上的T抗原被激活，與供血者中抗T抗體發生凝集。此種凝集在4℃和37℃之間隨著溫度的升高凝集程度逐漸減弱，在37℃時最弱或消失。
2.5 混合外觀凝集現象
出現混合外觀凝集的情況時一般要核對標本，必要時可重新抽取血樣。患者在近期有過骨髓移植或輸血史、胎盤出血和白血病等應在疾病恢復后再確定血型。其他原因如嵌合現象、A3亞型及Tn多凝集反應等在定型時可幫助正確判斷血型。
2.6 不規則抗體及亞型
血型試驗是抗原抗體反應，當患者血清中存在ABO型以外的IgM或IgG和IgM混合型不規則抗體時，必然會導致ABO正反定型不一致。可通過測定唾液中的血型物質來鑒定ABO血型。由于受檢者紅細胞上有弱抗原，且抗原表達性特別弱，在紙片定型中很可能被錯誤定型，另外抗A/抗B/抗AB血清的效價低或Ac/Bc/Oc等其他因素的影響，正反定型不相符，也可能被錯定或無法確認[3],應用試管鹽水法鏡檢顯示抗A/抗B/抗AB管呈弱的混合外觀，正反定型相符，且經吸收放散試驗進一步確定相應的亞型。由于某些亞型紅細胞與抗A，B血清呈現出特異性反應，因此同時采用抗A，B血清，而在反定型時加入O細胞可以檢出部分不規則抗體。對ABO血型正反定型不一致的標本，正定型時加入抗H有助于檢測紅細胞表面H抗原的量，對鑒別亞型具有重要意義，同時有助于發現稀有血型，如孟買型等[4]。
2.7 假凝集
血清在室溫和37℃中，使紅細胞出現了假凝集，造成配血錯誤。常見于某些肝病、傳染病、多發性骨髓瘤、霍金氏病、心肌梗塞、感染等病，或用紙片或玻片作血型鑒定時，時間過長水份蒸發引起紅細胞發生凝集，這種凝集在鏡下為緡錢狀，可看清紅細胞形態，患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗陰性，用生理鹽水稀釋或洗滌紅細胞可使凝集消失。
3 Rh定型試驗
Rh血型系統可能是紅細胞血型系中最復雜的一個血型系[1]。常規條件下只作Rh(D)定型。Rh（D）陰性的受者必須接受Rh（D）陰性的血液。臨床輸血前檢查Rh（D）血型是一個常規項目，但部分小型醫院目前還未開展這類項目，這對輸血安全帶來很大隱患。鑒定Rh血型抗原有不同的血清血技術，主要按定型試劑的性質而確定，因此在作血型簽定時，應對所用的定型試劑有全面的了解，才能避免假陽性和假陰性，正確地獲得定型結果。Rh血型定型方法主要包括三種方法，即玻片法、鹽水法和酶或間接抗球蛋白試驗。試驗過程中對照系統應包括試劑對照和抗原陽性陰性對照，并對采用的試驗介質、濃度、溫度、離心條件等嚴格控制。Rh血型弱D是D的弱表現形式，即使很弱仍可能引起免疫反應，若將弱D型血輸給D陰性受者，有可能免疫受者，使之產生抗D；弱D紅細胞輸入血清中已有抗D的受血者，輸入紅細胞會被加速破壞，從而引起溶血性輸血反應，對于初篩為D陰性的獻血者，要分別用不同批次的IgG抗D試劑間接抗人球法進行Rh陰性確認，供者弱D型血作為D陽性血發放。臨床對于受者只做IgM抗D試驗，若為陰性，不再做弱D檢測，應把受者當作D陰性，并輸注D陰性血。另外標本污染和錯誤、操作者自身技術及判斷錯誤、病人用藥、輸血史及妊娠史等因素也影響血型定型和交叉配血，在試驗過程中要密切聯系臨床和環境因素，科學排除影響血型鑒定和交叉配血的因素，確保輸血安全。
2008年2月趙 鋒等：血型鑒定和交叉配血的影響因素及解決方法第1期2008年2月河北北方學院學報（醫學版）第1期參考文獻
【參考文獻】
1 王培華主編.輸血技術學\[M\].第2版.北京：人民衛生出版社，2002.164168，152160
2 徐忠，沈行峰主譯.血站和輸血機構標準\[S\].第21版.上海：上海科學技術出版社，2003.4658
3 薛敏，劉毅.Bx血型鑒定1例報告\[J\].臨床輸血與檢驗，2003，5（3）：215
4 馬曙軒，劉景漢，王全立,等.24例ABO血型正反定型不一致受血者的血型血清學分析\[J\].臨床輸血與檢驗，2005，7（4）：280