定光定量PCR技術已經有超過20年的發展歷史,如今廣泛應用在基礎科研、病原微生物核酸檢測,轉基因檢測等領域。近期新冠病毒疫情爆發,核酸分子檢測在新冠病毒診斷中發揮重要作用,該技術也逐漸被大眾所了解。
既往結果判讀的挑戰:
作為新冠病毒感染確診的金標準的熒光定量PCR檢測技術,對于檢測結果的的判讀一定需要長期專業的訓練。其挑戰如下:
l 操作人員需要具備較好分子生物學知識及相關操作技能
l 儀器的操作與維護需要專業的維護
l 光路需要定期矯正,光源衰減,信號穩定性下降
l 軟件上需要設置和調節的步驟也比較多
如今結果判讀的改善:
隨著儀器與軟件的進步,以上的眾多問題逐步得到改善和解決,如今諸如病毒核酸檢測的解決方案已變得比較便捷。
為了一次檢測多個病原體或者一個病原體的多個基因,常常采用多種不同的熒光染料來標記不同的分子探針,進行多重檢測。當分子探針識別出特異性目的基因片段并且結合上去,在DNA聚合酶水解的作用下釋放出熒光染料,檢測其熒光染料的信號有無就可獲知樣品中是否有目的基因的存在。檢測PCR反應溶液中的不同的熒光信號就成了判斷樣品中是否有特異性目的基因的標準,也就是是否有目標病原體的標準。市面上絕大多數的新冠病毒核酸檢測試劑盒就是采用這種多重檢測的方式。
l 商品試劑盒的推出和普及降低了操作人員的要求
l 儀器的硬件改進,多采用LED長壽命高強度光源,穩定性增加
l 軟件的界面的更加友好,包括中文化及判讀結果的簡單化
新冠病毒三重檢測試劑盒為例,進行樣本測試后的結果判讀
一個探針用于檢測正常人體的內標基因,另外兩個探針用于檢測新冠病毒特異性的基因,檢測結果判讀簡單明了:對于一個樣品來說,如果軟件分析界面上出現三條擴增曲線那么就是陽性結果,兩條擴增曲線是可疑結果,一條擴增曲線是陰性結果。
這樣的判讀方法既方便又快速。武漢火神山醫院的醫生們正是采用這種方便快捷的方式來完成每天繁重的檢測工作。
耶拿公司熒光定量PCR軟件可以同時顯示多重檢測結果,直觀簡單進行陰陽性判斷。得益于高強度LED光源,提高熒光定量PCR檢測靈敏度以減少假陰性,增強檢測重復性,可以進一步提高結果穩定性,讓整個檢測流程更加高效。
德國耶拿生命科學一直致力于為客戶提供全面的分子檢測解決方案。從病毒滅活——核酸提取——核酸質控——PCR體系構建——定量檢測等病毒檢測的每一個環節,德國耶拿均可提供高品質的產品和服務,助力新冠病毒核酸檢測。
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