關鍵詞： 紫外線照射；充氧；溶血，血袋；游離血紅蛋白 中圖分類號 R454.2 R331.1＋41 R457．1＋2 紫外線照射血液在滅活血液病毒和減少細菌污染，降低免疫細胞抗原呈遞作用，預防同種免疫，增加受血者免疫耐受性，減少移植物抗宿主病方面有重要意義［1～4］；紫外線照射加充氧自血療法在提高機體紅細胞攜氧功能，治療多種疾病方面也得到公認［5、6］。但也有材料報道，其對細胞造成一定損害，溶血率達2％。為此，筆者觀察了庫血經紫外線照射并保存不同時間后血漿游離血紅蛋白和紅細胞滲透脆性的變化,報道如下。 1 材料與方法 1.1 材料 Gx-Ⅲ紫外光量子血液治療儀(長春中吉光電公司)。一次性透紫外光照袋(河北辛集醫療器械廠，透紫外線率＞80%，下稱一次性光照袋); CP2DA醫用三聯采血袋(天津高分子塑料制品廠)。UV-2100型分光光度計(日本津島SHIMADZU);SysmexF-820血細胞計(日本); 聯鄰甲苯胺(A.R，北京瀛海精細化工廠)；三氯甲烷(A.R，北京化學試劑廠)；10%乙酸溶液,用36％冰醋酸(A.R，北京化學試劑廠)配制。1％過氧化氫溶液，試驗前用 30%過氧化氫溶液配制 (A.R，北京化學試劑廠)；0.9%氯化鈉注射液 (北京雙鶴藥業股份有限公司)，蒸餾水(本院制劑室)。標本∶兩批（n1=21，n2=20)共41份。 1.2 方法
1.2.1 樣本留取 將41份4℃保存20h的260ml血液各留取30ml，首批21份儲存在原儲血袋中，作為對照組1（不做任何處理)；另20份裝于一次性光照袋中，在遮擋紫外線的條件下，在紫外光治療儀內充氧(3L／min)振蕩（60次／min）作為對照組2；41份余血液（約230ml／份)按無菌操作灌入一次性光照袋中，在紫外光治療儀中(波長255～550nm)充氧（3L/min)）、振蕩(60次/min)、照射(8min)。兩批樣本各分別留取30ml，儲存在三聯袋的另一袋中，密封，此為實驗組1、實驗組2樣本。除取出當天對照和實驗樣本外，其他樣本熱合密封后放4℃保存，在7、14和21d時分別取樣測定觀察。另約200 ml血液灌入另一空袋中，供臨床輸用。
1.2.2 血漿游離Hb檢測按鄰聯甲苯胺法［7］進行；紅細胞滲透脆性試驗采用Sanford'法［8］，用Marsh計分法計量溶血強度(可疑溶血記1分，W+ 3分，1+ 5分，2+ 8分，3+ 10分，4+ 12分)。
1.2.3 結果統計 使用SPSS/PC統計軟件包。血漿游離Hb和紅細胞滲透脆性用配對秩和檢驗(Wilcoxon Matched-Pairs Signed ranks test)和成組秩和檢驗(Mann－Whitney)。
2 結果與討論 2.1 對照組和實驗組兩批樣本血漿游離Hb測定及統計結果見表1，紅細胞滲透脆性實驗及統計結果見表2。 表1 兩組兩批樣本血漿游離Hb(mg/L)結果(n1＝16，n2＝20)
| 時間 (d) | 對照組1 | 實驗組1 | Z1 | P1 | 對照組2 | 實驗組2 | Z2 | P2 | P | ||||
| M | Q | M | Q | M | Q | M | Q | ||||||
| 0 | 5.89 | 22.94 | 31.51 | 86.19 | －2．02 | ＜0.05 | 56.46 | 74.86 | 68.47 | 60.22 | －0．11 | ＞0.05 | ＜0.01 |
| 7 | 60.71 | 104.77 | 143.91 | 282.86 | －2.79 | ＜0.01 | 202.84 | 138.08 | 130.34 | 73.09 | －2.65 | ＜0.01 | ＜0.01 |
| 14 | 158.78 | 165.41 | 218.78 | 434.79 | －2.04 | ＜0.05 | 237.65 | 132.20 | 155.57 | 189.06 | －0.28 | ＜0.01 | ＜0.05 |
| 21 | 258.27 | 277.53 | 346.27 | 454.63 | －1.49 | ＞0.05 | 393.64 | 266.43 | 239.93 | 191.64 | －2.84 | ＜0.01 | ＞0.10 |
注：M為百分比中位數，Q為四分位間距，P為對照組1與對照組2比較；P1為對照組1與實驗組1比較；P2為對照組2與實驗組2比較下同 表2 兩組兩批樣本紅細胞滲透脆性結果(n1＝21，n2＝20）
| 時間 (d) | 對照組1 | 實驗組1 | Z1 | P1 | 對照組2 | 實驗組2 | Z2 | P2 | P | ||||
| M | Q | M | Q | M | Q | M | Q | ||||||
| 0 | 110.00 | 14.00 | 103.00 | 13.50 | －3．46 | ＜0.01 | 87.50 | 13.00 | 101.00 | 12.50 | －3．14 | ＜0.01 | ＜0.01 |
| 7 | 98.00 | 28.50 | 100.00 | 87.00 | －2.94 | ＜0.01 | 94.00 | 18.00 | 97.50 | 19.50 | －0.19 | ＞0.1 | ＞0.1 |
| 14 | 97.50 | 23.75 | 97.50 | 23.50 | －1.85 | ＞0.05 | 102.5 | 26.50 | 101.5 | 22.00 | -0.68 | ＞0.1 | ＞0.6 |
| 21 | 96.00 | 22.75 | 97.00 | 27.25 | －0.24 | ＞0.1 | 105.5 | 28.00 | 100.00 | 25.50 | －2.37 | ＜0.05 | ＞0.1 |
2.2 實驗組1和實驗組2兩批樣本血漿游離Hb和紅細胞滲透性數據在0、7、14、21d時比較，結果一致均無差異。 2.3 為了較客觀地反映紫外線照射對紅細胞損傷作用，同時排除搖動時的機械振蕩對紅細胞的破壞作用，筆者在實驗設計上采用了兩兩對比排除法則，試圖通過兩批對照組對比振蕩(充氧)條件對Hb和RBC滲透脆性的影響；再通過兩批實驗組樣本與對照組2的比較，來反映單獨紫外線照射條件對Hb和RBC滲透脆性的影響。
2.3.1 振蕩對紅細胞有損害，照射對保存中的紅細胞有較強的保護作用
表1、表2對照組1、2的差別是振蕩(充氧)，P值結果顯示振蕩使保存14d前的樣本游游Hb有顯著變化；紅細胞滲透脆性在0天時差異顯著；證明振蕩對紅細胞確有一定損傷作用。至于游離Hb和RBC滲透脆性結果之間的差異，筆者認為，由于血漿游離Hb是在血漿中游離物累積的基礎上測得，而紅細胞滲透脆性則是測定洗滌后紅細胞本身，不存在累積影響，因而更能客觀地反應細胞受損程度。
2.3.2
通過對照組2與實驗組2的比較，結果顯示，0d時紫外線照射對紅細胞膜有損傷作用，但對血漿游離Hb無明顯影響；隨著儲存時間的延長，對上述兩項實驗結果表現出有較強的保護作用；綜合分析實驗結果表明，紫外線照射(充氧)對紅細胞雖短時有輕度損傷，但能很快得以修復，并能增強細胞膜抗衰老能力，這對庫血保存有積極意義。
參考文獻
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2，王憬惺.光化學光生物學和輸血醫學.中國輸血雜志 ，1993 ,6(4) : 227
3，王憬惺.光化學光生物學和輸血醫學．中國輸血雜志 ，1994 ,7(1) : 53
4，陳德芝，陳 理，鄒 佳.紫外線照射充氧自血回輸研究與臨床UBIO療法作用機理的研究進展. 北京：中國科技出版社，1997，35
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6，陳拱詒 .紫外線照射自血回輸療法的臨床應用. 中國輸血雜志，1990 ,3(1) : 5
7，葉應嫵， 王毓三. 血漿游離血紅蛋白測定 .見：全國臨床檢驗操作規程.南京： 東南大學出版社，1997 ,5 : 61
8，柏乃慶.紅細胞滲透脆性實驗.見：血液保存.上海科學技術出版社，1981,1 :346