將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。
其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少。
缺點是敏感性偏低；而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。
此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。
