試劑、試劑盒 ATP儲存液
實驗步驟
一、Mg-ATP 儲存液的配制
ATP 買來時通常是鈉鹽。大多數激酶需要 ATP 鎂鹽作為高效底物。有時可以用錳代替鎂。
1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO4
2. 20 mmol/L Na2-ATP
以 1:1 的比例混合這兩種溶液，測 pH 值。慢慢將 pH 值調至 pH 7.4。如果出現沉淀，應繼續攪拌，并要保持 pH 值在 pH 7.4。這就配成了 10 mmol/L 的 Mg-ATP 儲存液。將溶液分成小份保存于 -20℃，可以放一年以上。
二、[γ-32P] ATP 使用液的配制
[γ-32P] ATP 供應商有 Amersham Int、NEN 和 ICN；通常可以買到不同比活性的 [γ-32P] ATP。適宜使用的比活性是 3000 Ci/mmol，通常剛買來時的濃度是 10 mCi/ml。Amersham’s Rerfivue [γ-32P] ATP 溶液用起來很方便，因為它可以保存于 4℃ 而不是 -20℃。