實驗簡介
囊泡天然存在于體液中，并穩定攜帶了一些重要的信號分子。囊泡相關功能的研究已經成為研究熱點，并有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用。通常因流式細胞儀無法檢測低于 250nm 的顆粒，因而并不是檢測囊泡微顆粒的最佳選擇。
而貝克曼庫爾特公司 CytoFLEX 流式細胞儀的問世，為流式檢測囊泡微顆粒開辟了蹊徑。 CytoFLEX 是第一臺可檢測 100 nm 微顆粒的流式細胞儀，并具有可同時檢測 13 色熒光、單個樣本存儲量大等 優秀性能，為微顆粒的檢測提供了理想的檢測平臺。
材料與方法
? 試劑
? 樣品制備
| Sample Type | 全血 |
| Species | 小鼠 |
| Age of specimen | 新鮮 |
| Prep Method | 1. 取新鮮的小鼠全血，加入檸檬酸鈉抗凝劑。用離心機 2500 xg 離心 15 min，將上清液倒掉； 2. 畫 FSC/VSSC 散點圖，用 Megamix-Plus FSC beads（100, 160, 200, 240, 300, 500, 900 nm）來標定囊泡微顆粒的位置； 3. 用 Annexin V FITC, CD41 PE and CD63 PE-Cy7 對囊泡微顆粒進行染色，用 CytoFLEX 進行檢測。 |
? 數據分析
1. 建立 FSC / VSSC 散點圖，檢測 Megamix-Plus FSC beads（100, 160, 200, 240, 300, 500, 900 nm），調整 gain 值。圈定 100 nm～900 nm 微顆粒分布區域，設定門 MP Gate。同樣電壓條件下，樣本檢測管分布于 MP Gate 門內的即為囊泡微顆粒；
2. 建立 AnnexinV-FITC/APC 雙參數散點圖，通過 AnnexinV 表達量的多少，區分不同類型的微顆粒。并建立 CD63-PE/CD41-PC7 雙參數的散點圖，來檢測不同類型的囊泡微顆粒，細胞表面抗原的不同。
* 實驗數據由 Kaluza 軟件分析
實驗結果
1. Megamix-Plus FSC beads 檢測結果
根據微球（100, 160, 200, 240, 300, 500, 900 nm）的分布，界定微顆粒的位置，將門命名為「MP Gate」。