實驗方法原理 氣流法測定植物呼吸速率的原理,是使不含CO2的穩定氣流通過裝有植物材料呼吸室,將植物呼吸釋放出來的CO2帶入CO2吸收瓶,被氫氧化鋇定量吸收,生成碳酸鋇白色沉淀,然后用標準草酸滴定剩余的氫氧化鋇。根據實驗前后二次測定草酸用量之差值,即可求出植物樣品釋放的CO2量,據此即可求出植物呼吸速率。反應式如下:
實驗步驟
一、材料儀器及試劑
1. 材料:番茄;馬鈴薯;水果類等其他植物材料。
2. 儀器設備:天平;抽氣機(或大氣采樣器);呼吸測定裝置(如圖);10ml大肚吸管;
25ml酸式滴定管;洗耳球;滴定管架;100ml三角瓶;100ml量筒;100ml容量瓶。
3. 試劑及配制:鈉石灰
1 / 44mol·L-1Ba(OH)2溶液配制:稱取Ba(OH)2·8H2O 7.25g溶于蒸餾水中,溶解后定容至1000ml,搖勻。
1 / 44mol·L-1標準H2C2O4溶液配制:準確稱取重結晶H2C2O4·2H2O 2.865g溶于蒸餾水中,溶解后定容至1000ml,搖勻。
1﹪酚酞溶液配制:稱取酚酞1g,溶于100ml 75﹪乙醇中。
二、實驗方法
1. 第一次測定(洗氣)
1.1 按呼吸測定裝置圖所示,在3、4兩個洗氣瓶用量筒分別加入約1 / 44mol·L-1Ba(OH)
溶液150ml;在7、8兩個CO2吸收瓶用容量瓶分別加入1 / 44mol·L-1 Ba(OH)2溶液200ml。
1.2 稱取1Kg樣品,裝入呼吸室內,蓋上蓋子。
1.3將大氣采樣器、氣體緩沖瓶、CO2吸收瓶、呼吸室、洗氣瓶、CO2吸收塔各橡膠管道連接好,隨后啟動抽氣裝置,檢查接口處嚴防漏氣。將大氣采樣器流量計氣流量調至0.5 L/抽氣5 min后停止抽氣(注意:記錄第一次停止抽氣時間),并將呼吸室前后(11、12)和兩個兩端的夾子夾緊。
1.4第一次滴定
取下兩個CO2吸收瓶蓋上的小塞子,用10ml大肚吸管從兩個CO2吸收瓶中各吸取Ba(OH)2溶液10ml注入同一三角瓶中(取兩次重復滴定。注意:取完樣液后立即塞緊蓋上小塞子),并加3滴酚酞作指示劑,用1 / 44mol·L-1標準草酸從三角瓶瓶塞上小孔進行滴定,滴定至紅色溶液剛剛消失為滴定終點,記錄草酸用量(ml)。兩次重復滴定值取平均值代入公式計算。
2. 第二次測定(呼吸測定)
2.1 將呼吸室前后(11、12)兩端的夾子打開,啟動抽氣裝置,將大氣采樣器流量計氣流量調至0.1~0.2 L/min(調節氣體流量,以每分鐘釋放約120個氣泡為宜), 檢查各瓶蓋及管口是否漏氣。呼吸測定30min,停止抽氣,記錄第二次停止抽氣時間,并將呼吸室前后(11、12)兩端的夾子夾緊。
注意:第二次停止抽氣時間減去第一次停止抽氣時間的差值,即為呼吸測定測定時間。
2.2 第二次滴定
方法與第一次測定的滴定方法相同。兩次重復滴定值取平均值代入公式計算。
三、計算
將實驗所得數據,按下公式計算植物呼吸速率:
四、記錄結果
將實驗數據及結果記錄下表
植物呼吸速率測定實驗數據及結果記錄表
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