月旭公司為您提供全套“羅丹明B”檢測方法

　　 前段時間，據《重慶商報》報道，接國家工商總局、衛生部等4部委聯合通知，重慶市工商、質監等部門抽查當地火鍋底料等調味品質量后發現，王牌麻辣魚調料等5個廠家10個批次的調味產品都含有工業染料“羅丹明B”（商品名為“玫瑰紅B”），這些調味產品多為麻辣調味料。

　　一．“羅丹明B”簡介

　　 據了解，問題火鍋底料里查出的工業染料“羅丹明B”主要來自生產底料所用的豆瓣里。加入這種物質后的豆瓣色澤紅潤，賣相好，很吸引消費者。“羅丹明B”（商品名為玫瑰紅B）為工業染料，又稱若丹明B，是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。英文名Rhodamine B.分子量479.0175。羅丹明B在溶液中有強烈的熒光, 用作實驗室中細胞熒光染色劑、有色玻璃、特色煙花爆竹等行業。曾經用作食品添加劑，但后來實驗證明羅丹明B會致癌，現在已不允許用作食品染色。

　　二．月旭的全套解決方案

　　1.適用范圍

　　適用于辣椒面中羅丹明 B的測定。

　　2.提取

　　精確稱取1g 辣椒面于50 mL聚丙烯離心管中，加入20 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，300 rpm振蕩10 min，4000 rpm離心5 min，轉移上清液于50 mL離心管中，殘渣重復提取一次，合并上清液，于40℃氮吹至10 mL左右，待凈化。

　　3.凈化

　　預處理：向Welchrom Alumina-N（500mg/6mL）中加入5 mL丙酮：正己烷（20:80）混合溶液，流出液棄去；

　　上樣：將上述提取液加入柱中，流出液棄去，此時，含羅丹明B的樣品在柱上部會出現鮮亮的粉紅色的熒光條帶，條帶邊緣清晰，粉紅色隨含量的增加而加深和加寬，不含羅丹明B的樣品提取液不會出現粉紅色條帶，只會出現黃紅色的界面不清晰的寬帶；

　　淋洗：加入含有20%丙酮的正己烷溶液淋洗SPE柱，可見柱體上的黃紅色條帶下移，直到黃色條帶洗出柱體為止；

　　洗脫：5 mL甲醇：水（90:10）洗脫（不同活度的氧化鋁選擇的洗脫液不一樣，Welchrom Alumina-N為Beckman Ⅰ級，采用純甲醇洗脫時，需要大量的洗脫液才能將羅丹明B 洗脫下來，故在此加入10%的水以提高洗脫強度）；

　　重新溶解：采用90%甲醇水溶液定容至5 mL，過0.22μm濾膜，裝瓶待分析；

　　4.檢測

　　色譜條件：

　　色譜柱： Topsil C18 液相色譜柱（4.6 mm x 250 mm, 5 μm）

　　流動相： 甲醇：水=75:25

　　流速： 1 mL/min

　　進樣量： 20 μL

　　柱溫： 40°C

　　檢測波長： 554 nm

　　運行時間：11 min

　　5.結果

　　回收率和重現性實驗

　　將空白辣椒面上述方法處理后，分別添加一定量的標準溶液，添加濃度分別為0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、2 mg/ kg、每批次內同一濃度做3次平行實驗，共3個批次（樣品典型回收率色譜圖見附圖）。

　　6.附圖

　　辣椒面中添加0.5 mg/kg 羅丹明B色譜圖

　　Welchrom Alumina-N上樣后圖片

　　本方法中使用到得耗材：

　　1.固相萃取小柱 Welchrom Alumina-N 500mg/6mL (P/N:WSAN010605)

　　2.色譜柱：Topsil, 4.6*250 mm，5μm(P/N: Tp5B18425)

　　3.13mm，孔徑0.22μm尼龍針孔濾膜(P/N: WEL-SFNY213022)