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  • 發布時間:2020-03-30 17:32 原文鏈接: 提取植物rna方法

      提到RNA的提取,是不是充滿了心酸和無奈呀,抽提過程中已十分小心謹慎了,但是有時候還是會出現RNA污染、降解的悲劇。別怕,今天小編給您介紹一種新的RNA提取方法,比以前的方法更快、更有效和更可靠,讓您從此不用再擔心的RNA的抽提了。

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      眾所周知:獲得純凈、完整的RNA樣品,是對一種植物的活性基因或轉錄組進行測序所必不可少的。但是存在于植物組織中的化合物(如黃酮類、鞣質、蠟和其他次生代謝產物),使我們很難始終如一地從很多種植物中提取到質量較好的RNA。

      在最近一期的《Applications in Plant Sciences》中,研究人員向我們詳細描述了這種新方法。這種最成功的方法:將Trizol試劑和Turbo DNA試劑盒與研究人員檢測的附加步驟相結合。

      在一個大型國際轉錄組測序項目中,研究人員選取了各種木質的、芳香的和水生的植物。他們進行了382次獨立的RNA提取實驗,在各種各樣的植物中檢測不同的技術。這種新程序的一個關鍵成分是常用于洗發劑的相同發泡劑——月桂酰肌氨酸鈉(sodium lauroyl sarcosinate),綽號Sarkosyl。自上世紀70年代以來科學家一直都在使用它,因為它能分解細胞脂肪膜,釋放細胞的內容物。

      “結合Trizol和Turbo試劑盒,Sarkosyl有助于從大多數植物種類中提取高品質和高數量的RNA。加入CTAB步驟,可提高RNA提取的成功率,即使是最頑固的物種。”另外,RNA是極其脆弱,對RNA酶的降解很敏感,這種酶到處存在于自然中,包括空氣中。工作區必須消毒,因為RNA酶可以迅速將完整的RNA鏈轉換成不適合測序的“核酸湯”。

      Jordon-Thaden還提到:“一旦我們收集了植物組織,如剪葉,用于RNA提取,我們就將其快速冷凍在液氮中,以防止降解。然后我們把它磨碎,并將其混入試劑混合物中,隨后洗去植物纖維和其他細胞成分。這個過程越長,RNA降解的可能性就越大。”


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