第一章
抗體藥腥風血雨
正如我們今天要聊的抗體藥研發，由大分子藥物，小分子及多肽類藥物，甚至是相關佐劑都可能直接或者間接引起比較大的免疫原性反應，輕者可能項目止步于臨床前期甚至臨床期，對經濟投入可謂壓力山大；重者則可能會降低藥物療效，引起過敏反應，甚至威脅生命安全。故ADA（Anti-Drug-Antibody）——在PK研究的有效檢測，即系統性、科學性地完成ADA檢測是PK研究的迫切問題。
近年來經常會有各種抗體藥研發的新聞見諸報端，該市場可謂如火如荼，正值高光時期，從各大單抗藥企的社會責任來看，正不遺余力解決民生問題，甚感欣慰。
第二章
ADA檢測、免疫原性指導，你需要知道這些
那我們遵循規則，來探討一下ADA檢測的特點，繼2009版免疫原性指導原則之后，2016版FDA《免疫原性指導原則（試行）》的發布給免疫原性分析指明了方向，把兩個相隔7年的制度原則進行比較，即可得到以下幾點特征：
· 2016版指導原則推薦使用基于風險的方法來評價免疫反應及其帶來的副作用；
· 篩選和確證試驗的方法靈敏度至少達到100ng/mL，遠遠小于之前要求的250-500ng/mL；
· 對確證和滴度試驗做了詳細說明；
· 對方法學建立和驗證的時間做了更加詳細的說明；
· 增加了關于糖基化、Fc融合、ADC等內容的討論；
· 對于生物類似藥，要用一套標準試驗來真實對比類似藥和原研藥的ADA水平。
綜合幾點，即FDA對免疫原性的評估指導給出了具體要求：
· 高靈敏度
· 高特異性
· 高穩定性
· 高親和力
第三章
FDA的高要求，我們如何應對？
結合以上幾點特征，我們來看看目前通用的檢測方法：
對于抗體研究發展趨勢，鼠源向人源化—全人抗體—多功能化（雙/多特異性抗體）--小型化（抗體片段/肽段）--精準化（抗體/藥物偶聯物-ADC），對分析技術的要求越來越高。
常規分析技術一般包括直接或橋接酶聯免疫吸附分析（ELISA）、電化學發光法（ECLA）、放射免疫沉淀分析（RIPA）、表面等離子體共振（SPR）等，可采取一種或幾種組合。但由于受限于目前的技術瓶頸（如ELISA-酶聯免疫法,ECLA-電化學發光法）檢測靈敏度，即檢測背景的受限和反應性檢出能力的受限，再結合ADA的階段性特點，不同時間段的抗體亞型存在差異性的；而且機體在給藥后藥物以及內源性分子濃度水平的“干擾”均會影響分析結果，故抗藥性抗體分析方法應準確、靈敏、特異、耐用，能檢測出包括IgG和IgM等所有亞型，同時基于風險采用多層次檢測策略評價ADA，按照篩選分析、確證分析、中和分析等進行逐層分析。
第四章
秘籍出世——
默克幫您應對ADA檢測的挑戰
目前默克生命科學依托其SMC單分子超高靈敏度檢測平臺，專門開發了ADA檢測的專用方法學開發用檢測試劑盒。
圖1：SMCTM免疫原性檢測及開發試劑盒（Cat.No.03-0175-00）
圖2：單分子計數，精確計數光子數量