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  • 發布時間:2022-06-01 21:20 原文鏈接: 戊糖的含量測定

    苔黑酚法

    五碳糖,如木糖(植物纖維原料半纖維素戊糖的主要成分 )、核糖,與濃鹽酸共熱時形成糠醛,在三氯化鐵存在的條件下與苔黑酚煮沸時呈藍綠色,在670nm測定吸光值,在一定的范圍內顯色程度與糖濃度成正比,以標準曲線法定量。 

    二、試劑

    (1)1g/L三氯化鐵鹽酸溶液稱取0.1g三氯化鐵,加入到100mL濃鹽酸中。

    (2)苔黑酚乙醇溶液1g苔黑酚(3,5-二硝基甲苯)溶于100mL95%乙醇溶液中。

    (3)木糖標準溶液(100μg/mL)準確稱取0.1g(精確至0.0001g)木糖溶于少量水中并定容至100mL。準確吸取上述溶液1mL稀釋至10mL,此溶液每mL含100μg木糖。 

    三、操作步驟

    1. 標準曲線的制作

    吸取100μg/mL木糖標準溶液0、0.1.0.2、0.3、0.4、0.6、0.8、1.0mL,分別置于10mL比色管中,用水補足到每管3mL,各管的木糖含量分別為0、10、20、30、40、60、80、100μg。各管分別加入1g/L三氯化鐵鹽酸溶液3mL,再加入苔黑酚乙醇溶液0.3mL,混合后放入沸水浴加熱20min,立即放入流水中冷卻,用水稀釋定容至10mL。在670nm波長處測定吸光值。以木糖含量為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪制標準曲線或求得回歸方程。

    2.樣品測定

    取3mL待測樣品(糖含量控制在10~100μg,其余操作與標準曲線相同,根據測定的吸光值查標準曲線或從回歸方程中計算出含糖量。 

    四、計算

    式中 :

    C—從標準曲線中求得試樣糖量,μg

    3—吸取試樣體積,mL

    1000—μg換算成mg

    本法對木糖的測定范圍在10~100μg。測定時要嚴格控制反應條件,特別是反應時間,才能取得比較滿意的效果。


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