明膠液化試驗
(1)原理:某些細菌可以產生一種胞外蛋白水解酶(明膠酶),能使明膠分解為氨基酸,使明膠失去凝固能力而液化,因而使半固體的明膠培養基成為流動的液體。
(2)方法:將待檢菌接種于明膠培養基中,22℃培養7d或更長時間,每天觀察結果有無凝固。
(3)結果:如無凝固,則表示明膠已被水解,液化試驗陽性。如凝固,則繼續培養。
(4)應用:腸桿菌科細菌的鑒別,如奇異變形桿菌、普通變形桿菌、沙雷菌屬和陰溝腸桿菌等到能液化明膠,腸桿菌科中的其它細菌很少液化明膠。有些厭氧菌如產氣莢膜梭菌、脆弱類桿菌等也能液化明膠。另外,許多假單胞菌也能產生明膠酶而使明膠液化
吲哚試驗(靛基質試驗)
(1)原理:某些細菌具有色氨酸酶,能分解蛋白胨水中的色氨酸產生吲哚,當加入吲哚試劑(對二甲氨基苯甲醛)后則形成紅色的玫瑰吲哚。
(2)培養基:蛋白胨水培養基。
(3)方法:將待檢菌接種于富含色氨酸的蛋白胨水培養基中,35℃孵育24~48h,沿試管壁慢慢加入吲哚試劑,觀察結果。
(4)結果:于兩液面接觸處出現紅色為陽性,無色為陰性。
(5)應用:主要用于腸桿菌科細菌的鑒定,如大腸埃希菌與產氣腸桿菌,肺炎克雷伯菌和產酸克雷伯菌等的鑒別。
硫化氫試驗
(1)原理:某些細菌能分解培養基中的含硫氨基酸產生硫化氫,硫化氫遇亞鐵離子或鉛離子則結合形成黑色沉淀物(硫化鐵或硫化鉛沉淀)。
(2)培養基:醋酸鉛培養基。
(3)方法:將待檢菌穿刺接種于醋酸鉛培養基中,于35℃孵育24h -48h,觀察有無黑色沉淀出現。
(4)結果:培養基變黑為陽性,不變為陰性。
(5)應用:主要用于鑒別腸桿菌科中屬及種的鑒別,如沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬、愛德華菌屬等為陽性,其它菌屬大多為陰性。但沙門菌屬中亦有部分硫化氫陰性菌株,如甲型副傷寒、仙臺、豬霍亂沙門菌等。
尿素分解試驗
(1)原理:某些細菌具有尿素分解酶,能分解尿素產生大量的氨,使培養基呈堿性。
(2)培養基:尿素培養基。
(3)方法:將待檢菌接種于尿素培養基,于35℃孵育18~24h小時觀察結果。
(4)結果:培養基呈堿性,使酚紅指示劑變紅為陽性,不變為陰性。
(5)應用:主要用于腸桿菌科中變形桿菌屬細菌的鑒定。奇異變形桿菌和普通變形桿菌脲酶陽性,另外雷氏普羅威登菌和摩根菌為陽性,而斯氏和產堿普羅威登菌陰性。