做試驗前要先學會凍存，以備自己在后面的試驗中能堅持同一來源、穩定牢靠的細胞，且可減少污染或其它不利影響。你們細胞是怎樣凍存的?求解！我的是4度冰箱放半小時,-20度冰箱半小時,然后轉移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1個月后,細胞復蘇就感覺狀態不太好了！
影響凍存細胞活性的因素
1，細胞凍存保護劑：常用的有二甲基亞砜（DMSO）和甘油，常用的濃度為5%-10%（90%小牛血清）。DMSO對二倍體細胞的毒性較甘油小。
2，細胞懸液的凍住速度：慢凍時冰凍在細胞外形成，因此不致危害細胞。多數細胞以每分鐘下降1℃的速度，降至-20℃凍住。均可取得滿足效果。
3，保存溫度：液氮罐，可到達-196℃，此刻所有的物理化學活動均降至zui低限度，以確保細胞長時間保存。
4，復蘇：急速消融復蘇可防止危害細胞。凍住細胞從液氮中取出后，應立即放入37℃~43℃的水浴中，30秒至一分鐘內消融。
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