1.測定血清鈣、磷、血漿蛋白和血糖并用血漿清蛋白所測結果糾正血鈣水平。本綜合征血鈣>2.7mmol/L，血磷<0.85mmol/L。
2.鋇餐檢查 可發現多發性胃、十二指腸和(或)空腸上段潰瘍，胃酸增高，血清促胃液素水平常> 500ng/L。必要時可作胰泌素興奮試驗，胃泌素瘤患者血漿促胃液素升高，如果于注射胰泌素后5~10分鐘的促胃液素峰值達到200ng/L則有診斷意義。
3.測定血清中泌乳素或生長激素 泌乳素瘤患者血清泌乳素水平(基礎值)多大于200μg/L；生長激素瘤患者血清生長激素水平明顯升高，大于5μg/L。
4.遺傳學檢查 MEN-1基因位于第11號染色體，11q13帶，編碼一含有610個氨基酸的蛋白質，稱為“多發性內分泌腺瘤蛋白”(menin)。確診MEN-1綜合征，遺傳學檢查是必需的，利用常染色體11q的DNA多態性序列作連鎖分析或用單鏈構象變異體(SSCV)分析證明在患者的甲狀腺和胰腺腫瘤中有雜合子的丟失和突變的性質。約20%散發性甲狀旁腺腺瘤及一部分散發性胰腺內分泌癌、肺類癌亦可出現menin基因突變，但此種突變只發生于腫瘤組織而不見于患者的正常細胞，故不形成疾病家族性聚集現象。