葉酸的輔酶形式是四氫葉酸(圖6[四氫葉酸的結構式]),它作為酶促轉移一碳基團(如甲酰基等)的中間載體而在嘌呤類、絲氨酸、甘氨酸和甲基基團的生物合成中起作用。此外,葉酸在核蛋白的生物合成上也是不可缺少的。