化學因素對微生物的影響測定

實驗方法原理 為了比較各種化學消毒劑的殺菌能力，常以石炭酸為標準，即將某一消毒劑作不同稀釋后，在一定條件下，一定時間內致死全部供試微生物的最高稀釋濃度，與達到同樣效果的石炭酸的最高稀釋度的比值，稱為這種消毒劑對該種微生物的石炭酸系數（酚系數）。石炭酸系數越大，說明該消毒劑殺菌能力越強。

實驗材料 大腸桿菌白色葡萄球菌

試劑、試劑盒 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基碘酒升汞石炭酸酒精來蘇爾新潔爾滅 龍膽紫龍膽紫

儀器、耗材 培養皿濾紙片試管吸管

實驗步驟

1.  各種化學藥品的殺菌作用

（1）用無菌吸管吸取培養18小時的白色葡萄球菌菌液0.2 ml 于無菌平皿內。

（2）倒入已溶化并冷至45℃左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基于上述平皿內，充分搖勻，水平放置，待凝。

（3）將上述已凝固的平皿用記號筆在平皿底劃成八等份，每一等份內標明一種藥物的名稱。

（4）用無菌鑷子將小圓形濾紙片分別浸入各種藥品中，取出，并在試管內壁上除去多余藥液后，以無菌操作將紙片對號放入培養皿的小區內。

（5）將上述放好濾紙片的含菌平皿，倒置于37℃溫室中培養24小時后，取出測定抑菌圈大小，并說明其殺菌強弱。

2.  石炭酸系數的測定

（1）將5%（1：20）的石炭酸液按表Ⅸ-1配成不同濃度，每管5 ml。

（2）將待測藥物（來蘇爾）先配成1：20的原液，再按表Ⅸ-2配成不同濃度，每管5 ml。

（3）取肉膏蛋白胨液體培養基30管，1~15管標明石炭酸的5種濃度，每種濃度3管，每3管分5、10、15分鐘處理，16~30管標明來蘇爾的5種濃度，同樣每種濃度3管，每3管分5、10、15分鐘處理。

（4）在上述不同濃度的石炭酸和來蘇爾溶液中，各接入0.5 ml 大腸桿菌液，搖勻。注意每管自接種時起在5、10、15分鐘，用同一接種環從各管內取一環接入上述已標記的液體培養基試管中。

（5）置37℃溫室中培養48小時，觀察并記錄生長情況。生長者溶液混濁，以“+”表示；不生長者溶液澄清，以“-”表示。

（6）計算系數值找出在5分鐘生長，而在10分鐘和15分鐘均不生長的石炭酸及來蘇爾的最大稀釋度，計算二者的比值。例如石炭酸在10分鐘內殺死大腸桿菌的最大稀釋度是1：70，來蘇爾是1：250，則來蘇爾的石炭酸系數為250/70=3.6。

3.  結果

（1）各種化學藥品對白色葡萄球菌的致死能力

（2）石炭酸系數的測定和計算