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  • 發布時間:2019-05-18 20:43 原文鏈接: 幾種常用特殊PCR技術

    幾種常用特殊PCR技術

    (一)逆轉錄PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)

    RNA經逆轉錄后可作為PCR的模板.逆轉錄PCR(RT-PCR)常用于基因表達研究(定量PCR)和逆病毒檢測.

    設計RT-PCR引物時,應使引物分別位于不同的外顯子中,以便區別cDNA和gDNA擴增產物。

    (二)多重PCR(Multiple PCR)

    在同一PCR反應體系中用多對引物(覆蓋不同長度的靶序列)同時擴增。

    例如用多重PCR進行DNA缺失篩選

    (三) 套式PCR(nested PCR)

    用第一次PCR擴增區域內部的第二對(套式)引物對第一次PCR產物再次擴增,可以增加特異性和靈敏度。

    (四)非對稱PCR(asymmetric PCR)

    在PCR反應體系中,限制引物之一的濃度(50-100:1)進行擴增,可得到單鏈PCR產物,可用于制備單鏈測序模板或單鏈DNA雜交探針。


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