凝膠色譜的基本原理
以凝膠為固定相的色譜,稱為凝膠色譜。葡聚糖凝膠的分離原理是葡聚糖凝膠在吸水后形成凝膠粒子,在其交聯鍵的骨架中有許多一定大小的網眼。網眼大,大分子物質能進入網眼內;網眼小,只有小分子物質才能進入網眼;而超過一定限度的大分子物質,就被排阻在凝膠粒子的外部而不能進入網眼。這就使得能進入凝膠內部與不能進入凝膠內部的分子,如同按照分子大小過篩一樣,所以稱為分子篩。操作時首先將凝膠在適宜的溶劑中浸泡,使其充分膨脹,然后再鋪成薄層,加入樣品后,再以同一溶劑洗脫,則樣品中大分子化合物不能進入凝膠顆粒內部,只在凝膠顆粒間移動,因此阻力小,行動快,走在前面;而小分子化合物能自由擴散進入到凝膠內部,因此在色譜時受到的阻力較大,行動慢,走在后面。如此經過一段時間的洗脫,混合物中各組分就會按照分子的大小而獲得分離。