雙向擴散試驗：在瓊脂內抗原和抗體各自向對方擴散，在最恰當的比例處形成抗原抗體沉淀線，根據沉淀線的位置、形狀以及對比關系，可對抗原或抗體作出定性分析。雙向擴散試驗也分為試管法和平板法。
1、試管法：
在含有抗原的溶液和含有抗體瓊脂中間，加一層普通瓊脂，讓下層抗體和上層抗原向中間自由擴散，在抗原、抗體濃度最適時形成沉淀線。
2、平板法：
是在瓊脂板上相距3～5mm打一對孔，或者梅花孔、雙排孔、三角孔等。在相應孔中加入抗原或抗體，待其自由擴散后，抗原、抗體形成可見的沉淀線。根據沉淀線的位置可作如下分析：
①抗原、抗體是否存在及其相對含量。一般沉淀線靠近抗原孔，提示抗體量大，沉淀線靠近抗體孔，提示抗原量大。
②抗原、抗體相對分子量的分析；抗原或抗體在瓊脂內自由擴散，其速度受分子量影響。醫學|教育網編輯整理分子量小者，擴散快，反之較慢。由于慢者擴散圈小，局部濃度較大，形成沉淀線彎向分子量大的一方。如若兩者分子量相等，則形成直線。
③抗原性質的分析，受檢的抗原性質可能完全相同、部分相同、完全不同，沉淀弧可分別出現完全融合、部分融合、不融合三種情況；
④抗體效價的滴定。抗體效價是抗原、抗體經過自由擴散形成沉淀線，出現沉淀線的最高抗體稀釋度為該抗體的效價。