1、氯霉素、紅霉素、四環素類、磺胺類可干擾本品活性，故不宜同瓶滴注。
2、丙磺舒、阿司匹林、吲哚美辛、保泰松和磺胺藥減少青霉素的腎小管分泌而延長本品的血清半衰期。青霉素可增強華法林的抗凝作用。
3、本品與重金屬，特別是銅、鋅、汞呈配伍禁忌。
4、青霉素靜脈輸液中加入頭孢噻吩、林可霉素、四環素、萬古霉素、琥乙紅霉素、兩性霉素B、去甲腎上腺素、間羥胺、苯妥英鈉、鹽酸羥嗪、丙氯拉嗪、異丙嗪、維生素B族、維生素C族等后將出現渾濁。
5、本品與氨基糖苷類抗生素同瓶滴注可導致兩者抗菌活性降低，因此不能置同一容器內給藥。