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  • 發布時間:2022-11-11 12:14 原文鏈接: 關于重組子的篩選方法介紹

      1、抗生素篩選法:菌株為某種抗生缺陷型,而質粒上帶有該抗性基因(如氨芐青霉素,卡拉霉素等)這樣只有轉化子才能在含該抗生素的培養基上長出。本實驗利用抗生篩選轉化子。

      2、互補法:至今使用的許多載體(如PUC系列)有含有一個大腸桿菌DNA的短區段,其中含有β-半乳糖苷酸基因(lacZ)的調控序列和頭146個氨基酸偏碼區。這個偏碼區中插入一個多克隆位點。受體菌則含編碼β-半乳糖苷酶C端aa的序列。當外源基因插入時,二者溶為一體后,有β-半乳糖苷酶表達,在生色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(x-gal)培養基中形成蘭色菌落。而當有外源基因插入到多克隆原點,從而造成插入失活,而使 lacZ基因不表達而形成白色菌斑。 通過顏色不同而區分重組子和非重組子。位于不同載體或染色體上的

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