第一步，用未知未標記抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上，在濕盒中37℃保溫30min，使抗原抗體充分結合，然后洗滌，除去未結合的抗體。
第二步，加上熒光標記抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應，標記[de]抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合，從而可鑒定未知抗體。
