光學顯微鏡的石蠟切片制作過程

    I.將組織塊放入帶標記的盒子內，光學顯微鏡置于200m1液體中;

    2.按選定的溫度加熱;測定溫度。

    3.光學顯微鏡3%戊二醛預固定15秒鐘;緩沖液沖洗3次，光學顯微鏡每次3分鐘;1 %OsO;固定15秒鐘。如中斷操作，預固定后仍需在4℃下保存.

    用微波脫水、浸透每一步驟只需1-3分鐘;包埋需30-60分鐘。每次從微波滬中取出之后，在室溫中靜置1-2分鐘，以保證試劑液體滲入標本，光學顯微鏡與組織充分作用.

   重包埋

    1.電鏡環氧樹脂包埋標本極少數情況下需重新包埋。如若需重包埋，具體操作如下:

    Epon塊放置無水乙醉+KOH中浸泡數小時，可過夜，液體呈深棕色。組織塊用無水乙醇洗后，置于氧化丙烯中浸泡，然后用Epon重包埋。

    Spur:樹脂包埋塊需用氧化丙烯浸泡并加超聲處理以除去樹月旨.

    2.光學顯微鏡石蠟包埋組織塊或厚切片可重包埋用于超徽結構研究.具體做法是用100寫二甲苯去石蠟，振蕩1小時;經乙醉由I00%-95%~75%~50%，每次15分鐘;光學顯微鏡于緩沖液中過夜.將組織塊切成1mm3，用Os0,固定按電鏡標本制作過程進行。

    石蠟厚切片可裱在玻片上，置于一廣口瓶內，加100%二甲苯脫蠟;經丙酮由100%一95%-'75%--'50%;退至緩沖液。再以oso;固定、丙酮脫水、Epon浸透、包埋。浸透與包埋的做法是.用丙酮與Epon (1:1)混合液1-2滴加在切片上，光學顯微鏡20分鐘后加1滴純Epon包埋液。將充滿包埋液的膠囊倒扣在玻片的厚切片上，60 *C聚合.后用液氮或干冰浸泡分離玻片。

    用電子顯微鏡，人們可以觀察細胞的微細結構。光學顯微鏡但觀察的切片必須很薄(50- 100nm ).要將生物樣品切成厚為幾十納米(nm)、而又沒有刀痕與顫痕的薄片。