目前國際上最流行的免疫檢測擬合方式是“四參數邏輯擬合",用這種擬合方式往往能夠比較的反映濃度和吸光度的曲線關系,從而進一步比較正確的獲得樣品中待測物質的濃度值。
其實,在一個長的區間內,Logistic應該都能擬合得較為理想。但并不是說它就是的。事實上不僅是ELISA,其它很多生物學反應都是S形曲 線,也都可以用Logistic曲線擬合。但建模型是一回事,而用它來定量是另一回事。如果用來定量,S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的,而兩端的平 坦部分計算誤差會大,有時甚至會很大。
做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意:
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。
2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。
3、最好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。
4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
5、標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999.
在ICP-MS應用中,除了定性、同位素比例法和同位素稀釋法的定量方法,絕大部分情況下都是用外標法也就是標準曲線去做元素定量;即便是標準加入法,最后也由軟件會擬合出一個線性方程出來。線性經常做不好是初學......
1樣品概述2021年上半年度,安佑集團共檢測飼料原料樣本19733份(表1),對大部分原料中嘔吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、黃曲霉毒素B1(AFB1)3種毒素進行檢測,同時根據不同樣品受霉......
標準曲線的橫坐標(X)表示可以精確測量的變量(如標準溶液的濃度),稱為普通變量,縱坐標(Y)表示儀器的響應值(也稱測量值,如吸光度、電極電位等),稱為隨機變量。當X取值為X1,X2,……Xn時,儀器測......
鉛2040、鋅1020、鎘36、鉄1020、錳1020、鉻510,單位是ppb,進樣量15微升,大概是這個濃度,還得根據你儀器靈敏度做適當調節。......
外標法是與內標法相對,指按梯度添加一定量的標準品(對照品)于空白溶劑中制成對照樣品,與未知試樣平行地進行樣品處理并檢測。不同濃度的標準品進樣,以峰面積為值繪制成標準曲線,從而推算出未知試樣中被測組分濃......
1、高效液相做的標準曲線一般要求r>0.9999,只要達到要求且標線過原點,就可以采用外標一點法對此成分進行含量測定;2、另外,做標準曲線的還有一個目的就是,找到此成分的合理的進樣范圍;3、只要......
紅外測油儀不僅適用于地表水、地下水、海水、生活用水和工業廢水等各種水體及土壤中石油類(礦物油)、動植物油及總油含量的監測,同時也是煙氣(飲食行業油煙)含油量監測國家標準推薦的儀器。此外,還可用于有機試......
3、絕對標準曲線法取標準被測成分 按依次增加或減少階段法,各自調制成標準液,注入一定量后,按色譜圖取標準被測成分的峰面積或峰高為縱座標,而以標準被測成分的含量為橫坐標,制成標準曲線。然后按單......
氣相色譜儀廣泛應用在各個科研、生產領域,通過氣相色譜儀進行氣象色譜法的檢測分析是最常用的方式,其中如何定量了?下面我們就介紹一下四種定量方法。  ......
標準曲線的本質分析檢測中的標準曲線是指一系列已知含量(濃度/量)的物質與儀器響應/信號之間的關系,數學處理就是曲線方程,圖形表示就是標準曲線。標準曲線的目的是可以根據標準曲線查出待測物質的含量。當我們......