低背景的蛋白質銀染(silverstaining)方法

我們做蛋白質電泳的人都知道，銀染色很靈敏，有很強的說服力，但通常膠背景較深，不易掃描。在這里介紹一下低背景的蛋白質銀染方法。

Step Reagent Time/min

Fix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60

Rinse 50% EtOH 5 min, 3 times

Sensitive 0.02% Na2S2O3 1 min

Rinse Double distilled H2O 1 min, 3 times

Silver 0.5% AgNO3, 0.075% HCHO(現用現加) 20 min

Wash* Double distilled H2O 1 min, 2 times

Develop 6% Na2CO3, 0.0004% Na2S2O3, 0.05% HCHO 4-15 min

Stop 50% EtOH, 12% HAC

*說明，此步中洗滌過程要控制好，時間太長，可能顯色時間太長甚至染不出色；反之，時間太短，銀沒有洗干凈，背景變深。但做幾次以后就很快掌握了。