CRISPR/Cas9系統的原理是利用gRNA特異性識別靶序列,并引導Cas9核酸內切酶對靶序列的PAM上游進行切割,從而造成靶位點DNA雙鏈斷裂,隨之利用細胞的非同源末端連接(NHEJ)或同源重組(HDR)的方式對切割位點進行修復,實現DNA水平的基因敲除、敲入或點突變。